一株具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌制造技術

一株具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它涉及一株乳酸菌。具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌為植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)I1，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期為2012年9月18日，保藏編號為CGMCCNo.6575。本發明專利技術中菌株I1，其ACE抑制率為66%，能耐受6%的NaCl及100mg/kg的亞硝酸鹽并能迅速產酸；它的生長溫度為4～40℃，適用于低溫發酵；它具有顯著的蛋白酶活性，脂肪酶活性，不產粘液，對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌抑菌效果明顯，可以作為低溫條件下肉制品發酵劑菌株使用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一株乳酸菌。
技術介紹
高血壓是世界性難題，影響15-20%的成年人健康。在控制人體血壓的多種因素中，腎素-血管緊張素調節系統(Renia-angiotensin system, RAS)和激肽釋放酶-激肽系統(Kallikrein-kininsystem, KKS)是人體內兩種重要的調節系統。其中血管緊張素轉換酶(ACE)是系統調節過程中起關鍵作用的酶，是使血壓升高的主要因素。抑制ACE的活性，就能有效的防治和治療高血壓的發生。 篩選具有ACE抑制活性微生物的研究以及使其生產具有降血壓功能多肽的食品主要集中在對乳制品的研究上。然而，篩選具有ACE抑制活性，具有耐低溫、耐鹽及耐亞硝酸鹽等特性，適合用于發酵肉制品發酵劑的菌種還未見報道。現有的植物乳桿菌通常為3. O - 8. O _長，O. 91. 2 _寬；形成菌落約3寬、凸起、圓、光滑、細密、白色、偶爾淺黃或深黃色；能產生乳酸，使牛奶酸化，并可能使之凝固；在15°C生長，通常最適溫度為30°C 35°C (R.E.，N. E.伯杰細菌鑒定手冊)；目前也尚未有植物乳桿菌具有ACE抑制活性的報導。目前為止還未有植物乳桿菌ACE抑制活性測定的報導，也沒有將其作為肉制品發酵劑菌株開發的相關報導，更沒有篩選出具有ACE抑制活性并能作為低溫發酵肉制品的植物乳桿菌菌株的報導。
技術實現思路
本專利技術目的是提供一株具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌。本專利技術具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌Hac tobacillusplan tarum) 11,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC),保藏地址為北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏日期為2012年9月18日，保藏編號為CGMCCNo.6575。本專利技術中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌ilMctobacillusplan tarum) 11，它在MRS瓊脂培養基中生長良好，菌落為針尖樣濕潤圓形小菌落、乳白色、邊緣整齊；它為革蘭氏陽性桿菌，無芽孢，大小為長(1.0 _ 4. 3 _)X寬(O. 4 _ 0. 8 ,)。本專利技術中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌{LactobacillusII，其在含溴甲酚綠的MRS液體培養基中產酸為陽性、呈黃色，其葡萄糖發酵產酸為乳酸，還原石蕊牛奶呈陽性；植物乳桿菌Hactobacillus plantarum) Il具有顯著的蛋白酶活性，脂肪酶活性，不產粘液，對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌抑菌效果明顯，對志賀氏菌和沙門氏菌有抑菌效果。本專利技術中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌{Lactobacillus應)II，它的生長溫度為4 40°C，最適生長溫度為37°C;它在濃度為O. 5% 6%的食鹽中正常生長，在濃度為2% 4%的食鹽中有最大生長量；它能在含亞硝酸鹽100 300mg/kg的亞硝酸鹽培養基中生長，當亞硝酸鹽為100mg/kg時生長最好。本專利技術中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌HactobaciIIusplan tarum) II,其 ITS 序列與 GenBank 中登錄的植物乳桿菌{Lactobacillus plan tarum)AB617650.1的基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性為99. 9%，確定植物乳桿菌Il為乳桿菌屬中植物乳桿菌{Lactobacillus plan tarum)。本專利技術中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌ilMctobacillusplan tarum) 11,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC ),保藏地址為北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏日期為2012年9月18日，保藏編號為CGMCCNo.6575。 本專利技術具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌(lac tobacillusP lantarum) II,對ACE的抑制率為66%。它能耐受6%的NaCl及100mg/kg的亞硝酸鹽并能迅速產酸。它的生長溫度為4 40°C，最適生長溫度為37°C，適用于低溫發酵。同時，它具有顯著的蛋白酶活性，脂肪酶活性，不產粘液，對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌抑菌效果明顯，對志賀氏菌和沙門氏菌有抑菌效果，因此，本專利技術中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，即植物乳桿菌ilactobacillus plantarum) Il可以作為低溫條件下肉制品發酵劑菌株使用。附圖說明圖1為具體實施方式一中純菌株Il連接到PMD19-T載體中的PCR鑒定結果圖，其中1-7泳道分別為Il的7個轉化菌落PCR產物，M泳道為DNA Marker ；圖2為具體實施方式一中純菌株Il與植物乳桿菌{Lac tobaci Ilus plan tarum)AB617650.1的16S基因序列分析結果圖3為具體實施方式一中純菌株Il的耐氯化鈉結果的柱狀圖4為具體實施方式一中純菌株Il的耐亞硝酸鹽結果的柱狀圖5為具體實施方式一中純菌株Il的生長與溫度關系的曲線圖。具體實施例方式本專利技術技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。具體實施方式一本實施方式具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，它為植物乳桿菌{LactobacillusII,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏日期為2012年9月18日，保藏編號為CGMCC No. 6575。本實施方式中具體的保藏地址為北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所，郵政編碼為100101。本實施方式中具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，該菌株自大慶新百大超市購買的泡菜中分離純化得到，其樣本現存于黑龍江八一農墾大學食品學院微生物實驗室；它按以下步驟進行分離純化培養泡菜用稀釋涂布法接種于MRS瓊脂培養基中，37°C培養24h，然后將生長出的菌落用MRS瓊脂培養基進一步分離純化得到純菌株，命名為純菌株Il [即植物乳桿菌(Lactobacillus plantarmi) 1\~\。MRS瓊脂培養基(g/L):蛋白胨10g、牛肉粉8g、酵母粉4g、葡萄糖20g、磷酸氫二鉀2g、檸檬酸氫二銨2g、乙酸納5g、硫酸鎂O. 2g、硫酸錳O. 04g、吐溫80 Ig、瓊脂15g、蒸餾水 IOOOmL、pH 5· 7±0· 2，118°C 滅菌 15 分鐘。MRS肉湯培養基(g/L):按上述配方去掉瓊脂。培養條件如上。的測定純菌株Il接種到MRS肉湯培養基中，37°C培養24h，取培養液離心(4000rpm，5min)后取上清液用NaOH調整pH值到8. 3，根據表1，將各試劑加入到試管中，在37°C水浴中反應 30min，反應結束后馬上加入ImoL/L HCl以終止反應，然后各試管中加入乙酸乙酯1. 5mL,旋渦混合后進行離心(4000rpm，IOmin);吸取1. OmL乙酸乙酯于另一試管中，放入真空烘箱中，100°C揮發溶劑30min，冷卻后加入去離子水3mL，旋渦混合后用紫外分光光度計在228nm測定其吸光值，按以下公式計算ACE抑制率。權利要求1.一株具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，其特征在于本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一株具有ACE抑制活性的耐低溫乳酸菌，其特征在于它為植物乳桿菌?(Lactobacillus?plantarum)I1，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC），保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期為2012年9月18日，保藏編號為CGMCC?No.6575。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：俞龍浩，王欣，
申請(專利權)人：黑龍江八一農墾大學，
類型：發明
國別省市：