控制害蟲的方法技術

本發明專利技術涉及一種控制二點委夜蛾害蟲的方法，包括：將二點委夜蛾害蟲與Cry1A蛋白接觸。本發明專利技術通過植物體內產生能夠殺死二點委夜蛾的Cry1A蛋白來控制二點委夜蛾害蟲。與現有技術使用的農業防治方法和化學防治方法相比，本發明專利技術對植物進行全生育期、全植株的保護以防治二點委夜蛾害蟲的侵害，且無污染、無殘留，效果穩定、徹底，簡單、方便、經濟。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種，特別是涉及一種用在植物中表達的CrylA蛋白來控制二點委夜蛾危害植物的方法。
技術介紹
二點委夜蛾(Athetis I印igone)屬鱗翅目夜蛾科，為雜食性害蟲，目前發現其主要危害玉米作物，主要分布于我國黃淮海夏玉米種植區，在境外主要分布于日本、朝鮮、俄羅斯、歐洲等地。二點委夜蛾主要在玉米氣生根處的土壤表層處危害玉米根部，咬斷玉米地上莖桿或淺表層根，受危害的玉米田輕者玉米植株東倒西歪，重者造成缺苗斷壟，玉米田中出現大面積空白地，危害嚴重地塊甚至毀種。 玉米是中國主要的糧食作物，2011年7月9日，中央電視臺新聞聯播首次報道二點委夜蛾在中國的發生情況，2011年秋季至2012年5月31日，國家玉米產業體系病蟲防控研究室通過多次田間調查，發現2012年度二點委夜蛾的越冬種群數量較大，蟲口基數偏高，一代幼蟲種群密度大，在黃淮海夏玉米苗期有繼續暴發為害的可能。為了防治二點委夜蛾，人們目前主要采用的防治方法有農業防治和化學防治。農業防治是對整個農田生態系統中多個因素的綜合協調管理，調控作物、害蟲、環境因素、創造一個有利于作物生長而不利于二點委夜蛾發生的農田生態環境，如及時清除玉米苗基部麥秸、雜草等覆蓋物至遠離植株的玉米大行間并裸露出地面，以便于后續用藥劑能直接接觸到二點委夜蛾。因農業防治必須服從作物布局和增產的要求，應用有一定的局限性，不能作為應急措施，在二點委夜蛾爆發時就顯得無能為力。化學防治即農藥防治，是利用化學殺蟲劑來殺滅害蟲，是二點委夜蛾綜合治理的重要組成部分，它具有快速、方便、簡便和高經濟效益的特點，特別是二點委夜蛾大發生的情況下，是必不可少的應急措施，它可以一定程度地在二點委夜蛾造成危害前降低蟲口密度。目前化學防治方法主要有毒餌法、毒土法、灌藥法和噴施農藥等。但化學防治也有其局限性，如使用不當往往會導致農作物發生藥害、害蟲產生抗藥性，以及殺傷天敵、污染環境，使農田生態系統遭到破壞和農藥殘留對人、畜的安全構成威脅等不良后果；且因二點委夜蛾喜潮濕、陰暗環境，一般躲藏于麥秸等覆蓋物或者土表之下，使得化學農藥很難直接接觸二點委夜蛾蟲體而使得防治效果不佳。為了解決農業防治和化學防治在實際應用中的局限性，科學家們經過研究發現將編碼殺蟲蛋白的抗蟲基因轉入植物中，可獲得一些抗蟲轉基因植物以防治植物蟲害。CrylA殺蟲蛋白是眾多殺蟲蛋白中的一種,是由蘇云金芽孢桿菌庫斯塔基亞種(Bacillusthuringiensis subsp. kurstaki, B. t. k.)產生的伴抱結晶蛋白。CrylA蛋白被昆蟲攝入進入中腸，毒蛋白原毒素被溶解在昆蟲中腸的堿性pH環境下。蛋白N-和C-末端被堿性蛋白酶消化，將原毒素轉變成活性片段；活性片段和昆蟲中腸上皮細胞膜上表面上受體結合，插入腸膜，導致細胞膜出現穿孔病灶，破壞細胞膜內外的滲透壓變化及PH平衡等，擾亂昆蟲的消化過程，最終導致其死亡。已證明轉Cry IAb基因的植株可以抵抗玉米螟、棉鈴蟲、二化螟等鱗翅目(Lepidoptera)害蟲的侵害,然而,至今尚無關于通過產生表達CrylA蛋白的轉基因植株來控制二點委夜蛾對植物危害的報道。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種，首次提供了通過產生表達CrylA蛋白的轉基因植株來控制二點委夜蛾對植物危害的方法，且有效克服現有技術農業防治和化學防治等技術缺陷。為實現上述目的，本專利技術提供了一種控制二點委夜蛾害蟲的方法，包括將二點委夜蛾害蟲與CrylA蛋白接觸。優選地，所述CrylA蛋白為CrylAb蛋白。 進一步地,所述CrylAb蛋白存在于產生所述CrylAb蛋白的植物細胞中，所述二點委夜蛾害蟲通過攝食所述植物細胞與所述CrylAb蛋白接觸。更進一步地,所述CrylAb蛋白存在于產生所述CrylAb蛋白的轉基因植物中，所述二點委夜蛾害蟲通過攝食所述轉基因植物的組織與所述CrylAb蛋白接觸，接觸后所述二點委夜蛾害蟲生長受到抑制并最終導致死亡，以實現對二點委夜蛾危害植物的控制。所述轉基因植物可以處于任意生育期。所述轉基因植物的組織可以為根、葉片、莖桿、雄穗、雌穗、花藥或花絲。所述對二點委夜蛾危害植物的控制不因種植地點的改變而改變。所述對二點委夜蛾危害植物的控制不因種植時間的改變而改變。所述植物可以為玉米。所述接觸步驟之前的步驟為種植含有編碼所述CrylAb蛋白的多核苷酸的植物。優選地，所述CrylAb蛋白的氨基酸序列具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列。所述CrylAb蛋白的核苷酸序列具有SEQ ID N0:3或SEQ ID N0:4所示的核苷酸序列。二點委夜蛾(Athetis Iepigone)與小地老虎(Agrotis ypsilon Rottemberg)同屬鱗翅目夜蛾科，盡管其侵害部位和形態上相近，但是二點委夜蛾與小地老虎在生物學上是清晰的、截然不同的兩個物種，至少存在以下主要區別1、食性不同。二點委夜蛾除嚴重威脅夏玉米外，還對花生和大豆也造成危害；而小地老虎為雜食性害蟲，是對農、林木幼苗危害很大的地下害蟲，除了危害玉米、高粱、粟等作物外，在東北主要危害落葉松、紅松、水曲柳、核桃楸等苗木，在南方危害馬尾松、杉木、桑、茶等苗木，在西北危害油松、沙棗、果樹等苗木。2、分布區域不同。目前二點委夜蛾主要在黃淮海夏玉米區的河北、山東、河南、山西、江蘇、安徽共6省47個地(市)297個縣(市、區)暴發危害；而小地老虎在我國以雨量豐富、氣候濕潤的長江流域和東南沿海發生量大，東北地區多發生在東部和南部濕潤地區。3、為害習性不同。二點委夜蛾在河北省部分夏玉米，尤其以小麥套播的玉米田發生重，主要以幼蟲躲在玉米幼苗周圍的碎麥秸下或在2-5厘米的表土層危害玉米苗，一般一株有蟲1-2頭，多的達10-20頭；在玉米幼苗3-5葉期的地塊，幼蟲主要咬食玉米莖基部，形成3-4毫米圓形或橢圓形孔洞，切斷營養輸送，造成地上部玉米心葉萎蔫枯死；在玉米苗較大(8-10葉期)的地塊幼蟲主要咬斷玉米根部，包括氣生根和主根，造成玉米倒伏，嚴重者枯死。危害株率一般在1%_5%，嚴重地塊達15%-20%。而小地老虎1-2齡幼蟲晝夜均可群集于幼苗頂心嫩葉處取食危害；3齡后分散，幼蟲行動敏捷、有假死習性、對光線極為敏感、受到驚擾即卷縮成團，白天潛伏于表土的干濕層之間，夜晚出土從地面將幼苗植株咬斷拖入土穴、或咬食未出土的種子，幼苗主莖硬化后改食嫩葉和葉片及生長點，食物不足或尋找越冬場所時，有遷移現象。4、形態特征不同。I)卵的形態不同二點委夜蛾的卵成饅頭狀，上有縱脊，初產黃綠色，后土黃色；而小地老虎的卵亦成饅頭形，具縱橫隆線，初產乳白色，漸變黃色，孵化前卵一頂端具黑點。2)幼蟲的形態不同二點委夜蛾的老熟幼蟲體長20 mm左右，體色灰黃色，頭部褐色，幼蟲14-18 mm長，黃灰色或黑褐色，比較明顯的特征是個體節有一個倒三角的深褐 色斑紋，腹部背面有兩條褐色背側線，到胸節消失；而小地老虎幼蟲圓筒形，老熟幼蟲體長37-50_，頭部褐色，具黑褐色不規則網紋，體灰褐至暗褐色，體表粗糙、布大小不一而彼此分離的顆粒，背線、亞背線及氣門線均黑褐色，前胸背板暗褐色，黃褐色臀板上具兩條明顯的深褐色縱帶，胸足與腹足黃褐色。3)蛹的形態不同二點委夜蛾本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種控制二點委夜蛾害蟲的方法，其特征在于，包括將二點委夜蛾害蟲與Cry1A蛋白接觸。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：康越景，龐潔，張愛紅，程鵬，楊旭，牛麗紅，賈志偉，安羅旭，田康樂，姜自芹，
申請(專利權)人：北京大北農科技集團股份有限公司，北京大北農科技集團股份有限公司生物技術中心，
類型：發明
國別省市：