一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的膠體金試紙條及試劑盒制造技術(shù)

本實(shí)用新型專(zhuān)利技術(shù)一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的膠體金試紙條及試劑盒，屬醫(yī)用檢測(cè)耗材，其特征在于，所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的群勃龍單抗；所述對(duì)照線C包被有兔抗小鼠IgG多抗，所述檢測(cè)線T包被有群勃龍-牛血清蛋白BSA偶聯(lián)物，本實(shí)用新型專(zhuān)利技術(shù)試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)食品中的群勃龍殘留，本實(shí)用新型專(zhuān)利技術(shù)試紙條簡(jiǎn)捷、靈敏、準(zhǔn)確，用于動(dòng)物源性食品的檢測(cè)。（*該技術(shù)在2022年保護(hù)過(guò)期，可自由使用*）

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

，本專(zhuān)利技術(shù)屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，涉及一種醫(yī)用檢測(cè)耗材，具體涉及一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的膠體金試紙條及試劑盒。
技術(shù)介紹
群勃龍(TrenboloneJRE)是應(yīng)用廣泛的留類(lèi)同化激素，曾對(duì)畜禽疾病控制和治療起重要作用。但由于群勃龍存在嚴(yán)重的副作用，能使人引起疾病，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已相繼禁止或嚴(yán)格禁止使用。我國(guó)農(nóng)業(yè)部第235號(hào)文件中規(guī)定，動(dòng)物源性食品中群勃龍的殘留限量為不得檢出。目前，群勃龍殘留的主要檢測(cè)方法有氣相色譜(RPMC)分析法，酶聯(lián)免疫吸附分析 法。氣相色譜(RPMC)分析法樣本前處理及測(cè)定操作繁瑣且費(fèi)用高，酶聯(lián)免疫吸附分析法使用成本高、回收方法復(fù)雜、靈敏度不高，這些缺陷使其推廣使用受到限制。申請(qǐng)?zhí)枮?0510086773. 7的專(zhuān)利技術(shù)專(zhuān)利，公開(kāi)了一種檢測(cè)群勃龍殘留的酶聯(lián)免疫試劑盒及方法，該方法檢測(cè)群勃龍殘留前、后都需要做必要的儀器清洗及保養(yǎng)工作，并且要求專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員來(lái)操作。免疫膠體金技術(shù)(Immunogold labelling techique)是上世紀(jì)80年代繼突光素、放射性同位素和酶三大標(biāo)記技術(shù)后發(fā)展起來(lái)的固相標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。該技術(shù)主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)，形成肉眼可見(jiàn)的紅色或粉紅色斑點(diǎn)，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)方法中?？焖僭\斷試紙條是20世紀(jì)90年代以來(lái)在單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)和新型層析材料基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新型體外診斷技術(shù)，近年來(lái)發(fā)展迅速，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域特別是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中得到了廣泛應(yīng)用。該技術(shù)主要是將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在硝酸纖維膜上，膠體金標(biāo)記試劑吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待測(cè)樣品加到試紙條一端的樣品墊上后，通過(guò)毛細(xì)作用向前移動(dòng)，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng)，再移動(dòng)至固定的抗原或抗體區(qū)域時(shí)，待測(cè)物金標(biāo)試劑復(fù)合物與之發(fā)生特異性結(jié)合而被截留，膠體金標(biāo)記聚集在檢測(cè)帶上，可通過(guò)目測(cè)得到直觀的顯色結(jié)果。而游離的標(biāo)記物則越過(guò)檢測(cè)帶，從而達(dá)到與檢測(cè)物自動(dòng)分離的目的。競(jìng)爭(zhēng)抑制法可用于測(cè)定抗原或抗體，以測(cè)定抗原為例，其原理為標(biāo)本中的受檢抗原和固相的包被抗原競(jìng)爭(zhēng)與標(biāo)記抗體結(jié)合，當(dāng)標(biāo)本中的受檢抗原的量大于等于試劑的閾值，則標(biāo)記抗體則不會(huì)與固相的包被抗原結(jié)合；若標(biāo)本中無(wú)受檢抗原，則標(biāo)記抗體直接與固相的包被抗原結(jié)合。目前，將免疫競(jìng)爭(zhēng)抑制法與膠體金檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合來(lái)對(duì)群勃龍殘留進(jìn)行快速檢測(cè)，且具有高效、靈敏、特異、便捷，經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)的膠體金試紙條鮮有報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為解決上述領(lǐng)域的需求和空白，本技術(shù)旨在提供一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的膠體金試紙條及試劑盒，本技術(shù)試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法和免疫膠體金技術(shù)相結(jié)合快速檢測(cè)食品中的群勃龍殘留，用于動(dòng)物源性食品的檢測(cè)；本技術(shù)試紙條操作簡(jiǎn)單，拿來(lái)即用，不需要本領(lǐng)域的專(zhuān)業(yè)人員，能夠滿(mǎn)足不同層次人員的需要，容易普及，以符號(hào)顯示結(jié)果，擺脫了對(duì)設(shè)備、儀器、人員及貯存和運(yùn)輸環(huán)境的特殊要求，并且具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、特異、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)。一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的膠體金試紙條，在高度方向上包括基板支撐層、反應(yīng)試劑載體吸附層，所述反應(yīng)試劑載體吸附層固定在所述基板支撐層上；所述反應(yīng)試劑載體吸附層從沾液端到手持端依次設(shè)有樣品纖維墊，金標(biāo)纖維墊，纖維素藥膜，手持端吸水材料墊；在所述樣品纖維墊、金標(biāo)纖維墊和手持端吸水材料墊上覆蓋有保護(hù)膜層，所述纖維素藥膜墊上從手持端到沾液端依次設(shè)有對(duì)照線C、檢測(cè)線T，所述對(duì)照線C和檢測(cè)線T相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直，其特征在于，所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的群勃龍單抗；所述對(duì)照線C包被有兔抗小鼠IgG多抗，所述檢測(cè)線T包被有群勃龍-牛血清蛋白BSA偶聯(lián)物。 所述膠體金試紙條，其特征在于，在樣品纖維墊上對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜層上表面標(biāo)有與所述檢測(cè)線T平行的可視的MAX標(biāo)志線。所述吸水材料墊的材料是粗纖維吸水紙，所述金標(biāo)纖維墊的材料是吸附金標(biāo)蛋白的玻璃纖維棉。所述保護(hù)膜層為膠帶。所述基板支撐層為不吸水的塑料基板。還包括外殼，所述外殼具有中空位，所述中空位與所述反應(yīng)試劑載體吸附層及所述基板支撐層形成的簡(jiǎn)易膠體金試紙條的形狀大小相匹配，用于裝載所述反應(yīng)試劑載體吸附層，所述外殼上表面對(duì)應(yīng)于樣品纖維墊及纖維素藥膜的位置分別設(shè)有加樣窗和視窗。一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的試劑盒，其特征在于包括上述任一膠體金試紙條和樣品稀釋用具。技術(shù)效果根據(jù)膠體金檢測(cè)的原理，將本技術(shù)的膠體金試紙條的粘液端浸入待測(cè)液中，或者在粘液端的樣品纖維層滴加待測(cè)液，待測(cè)液通過(guò)虹吸帶動(dòng)待檢群勃龍殘留及金標(biāo)纖維墊中的膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體一起向硝酸纖維素膜方向擴(kuò)散，并最終滲入手柄端吸水紙中，擴(kuò)散過(guò)程中待檢群勃龍殘留可與膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體相結(jié)合，進(jìn)而封閉膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體上群勃龍結(jié)合點(diǎn)，阻止膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體與纖維素藥膜上偶聯(lián)群勃龍的載體蛋白的檢測(cè)線T相結(jié)合，檢測(cè)線不能顯色，而兔抗小鼠IgG多抗則可與膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體相結(jié)合，對(duì)照線C顯紅色，則為陽(yáng)性，反之，待測(cè)液中無(wú)群勃龍則不能阻止膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體與纖維素藥膜上偶聯(lián)群勃龍的載體蛋白的檢測(cè)線T相結(jié)合，檢測(cè)線T顯紅色，同樣，兔抗小鼠IgG多抗也與膠體金標(biāo)記的群勃龍抗體相結(jié)合，對(duì)照線C顯紅色，形成兩條紅色印記為陰性，如果纖維素藥膜上沒(méi)有顯示紅色標(biāo)記，則表明試紙條生效。本技術(shù)的膠體金試紙條不同于現(xiàn)有的試紙條之處在于所述纖維素藥膜墊上從手持端到沾液端依次設(shè)有對(duì)照線C、檢測(cè)線T，所述對(duì)照線C和檢測(cè)線T相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直，其特征在于，所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的群勃龍單抗；所述對(duì)照線C包被有兔抗小鼠IgG多抗，所述檢測(cè)線T包被有群勃龍-牛血清蛋白BSA偶聯(lián)物。本技術(shù)試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)食品中的群勃龍殘留，用于動(dòng)物源性食品的檢測(cè)。本技術(shù)試紙條通過(guò)選定金標(biāo)纖維墊、T線、C線和樣品纖維墊上的相應(yīng)的生物包被試劑來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)群勃龍殘留的快速檢測(cè)，同時(shí)本技術(shù)試紙條兼顧檢測(cè)的靈敏度和特異性。本技術(shù)，優(yōu)選在樣品纖維墊上對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜層上表面標(biāo)有與所述檢測(cè)線T平行的可視的MAX標(biāo)志線。用于提醒操作人員，操作時(shí)待測(cè)液不要超過(guò)標(biāo)志線，以免引起假陽(yáng)性。本技術(shù)，優(yōu)選所述樣品纖維墊的材料是玻璃纖維棉，所述吸水材料墊的材料是粗纖維吸水紙，所述纖維素藥膜的材料是硝酸纖維素膜，所述金標(biāo)纖維墊的材料是吸附金標(biāo)蛋白的玻璃纖維棉。這些材料配合使用，其吸水性及毛吸作用配合良好，保證本技術(shù)檢測(cè)試紙條的檢測(cè)速度和準(zhǔn)確性。本技術(shù)，優(yōu)選保護(hù)膜層為膠帶，使試紙條免受污染，成本低且效果好。本技術(shù)，優(yōu)選基板支撐層為不吸水的塑料基板，不吸水的材料，避免支撐材料吸收待測(cè)液從而影響水平方向的遷移。本技術(shù)，優(yōu)選還包括外殼，所述外殼具有中空位，所述中空位與所述反應(yīng)試劑載體吸附層及所述基板支撐層形成的簡(jiǎn)易膠體金試紙條的形狀大小相匹配，用于裝載所述反應(yīng)試劑載體吸附層，所述外殼上表面對(duì)應(yīng)于樣品纖維墊及纖維素藥膜的位置分別設(shè)有加樣窗和視窗。便于攜帶和保存。本技術(shù)試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)食品中的群勃龍殘留，用于動(dòng)物源性食品的檢測(cè)；本技術(shù)試紙條操作簡(jiǎn)單，拿來(lái)即用，方便快捷，不需要本領(lǐng)域的專(zhuān)業(yè)人員，能夠滿(mǎn)足不同本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種快速檢測(cè)群勃龍殘留的膠體金試紙條，其特征在于，在高度方向上包括基板支撐層、反應(yīng)試劑載體吸附層，所述反應(yīng)試劑載體吸附層固定在所述基板支撐層上；所述反應(yīng)試劑載體吸附層從沾液端到手持端依次設(shè)有樣品纖維墊，金標(biāo)纖維墊，纖維素藥膜，手持端吸水材料墊；在所述樣品纖維墊、金標(biāo)纖維墊和手持端吸水材料墊上覆蓋有保護(hù)膜層，所述纖維素藥膜墊上從手持端到沾液端依次設(shè)有對(duì)照線C、檢測(cè)線T，所述對(duì)照線C和檢測(cè)線T相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直，其特征在于，所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的群勃龍單抗；所述對(duì)照線C包被有兔抗小鼠IgG多抗，所述檢測(cè)線T包被有群勃龍？牛血清蛋白BSA偶聯(lián)物。

【技術(shù)特征摘要】

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張春山，張永勝，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：北京博歐實(shí)德生物技術(shù)有限公司，
類(lèi)型：實(shí)用新型
國(guó)別省市：