口部粘膜電穿孔裝置及其用途制造方法及圖紙

本發(fā)明專利技術(shù)涉及電穿孔(EP)裝置，其能夠優(yōu)選以可容忍的方式產(chǎn)生電穿孔，從而在粘膜層處引起電場。另外，其包括使用口部EP裝置連同編碼免疫原序列的基因構(gòu)造體來產(chǎn)生保護性免疫應(yīng)答(細胞和/或體液)。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】
本專利技術(shù)涉及能夠?qū)⒅委焺┻f送至受試者的電穿孔裝置。
技術(shù)介紹
已知大量人病原體在粘膜表面處引起感染，因此使得通過胃腸道、泌尿生殖道和呼吸道進入機體。結(jié)果，接觸感染的其他首要方式是通過血液-負載的途徑，例如注射、輸液和叮咬。粘膜感染劑的例子包括感冒病毒、流感、食物中毒劑、結(jié)核病、性傳播疾病和瘟疫。粘膜是機體的最大器官中的一種?？傮w來說，它們覆蓋超過400m2的表面積(等同于一個半網(wǎng)球場)，并且包括胃腸道、泌尿生殖道和呼吸道的內(nèi)層。這些粘膜表面盡管位于體內(nèi)，但是實際上是已知為"系統(tǒng)"環(huán)境的機體的外部和無菌內(nèi)腔之間的物理屏障。關(guān) 鍵營養(yǎng)物、氧氣和其他分子穿過這些粘膜屏障被不斷地攝??；然而，粘膜的另外重要功能是防范病原體入侵。每日這些粘膜被外部元素轟擊，并且直到獨特的粘膜免疫系統(tǒng)來決定什么是潛在有害的和什么是有益的。粘膜免疫的重要性存在于粘膜應(yīng)答和系統(tǒng)免疫應(yīng)答之間的相互影響。一些研究已經(jīng)證實，系統(tǒng)性刺激免疫系統(tǒng)(即通過注射或?qū)W院-負載的途徑)導(dǎo)致僅在機體的無菌內(nèi)部環(huán)境內(nèi)產(chǎn)生保護性抗體和T細胞-沒有產(chǎn)生粘膜應(yīng)答。另一方面，粘膜免疫應(yīng)答的刺激可以導(dǎo)致在粘膜和系統(tǒng)環(huán)境中產(chǎn)生保護性B和T細胞，使得在它們進入機體之前就停止感染。粘膜產(chǎn)生特定類型的抗體，稱為分泌型IgA或slgA。粘膜浸在大量slgA中，這起到防御第一線的作用以使侵入的病原體中和。試驗證據(jù)表明slgA的存在和對于各種病原體引起的感染的抗性有關(guān)，所述病原體包括細菌、病毒、寄生蟲和真菌。還表明使病毒中和并防止它們粘附于粘膜內(nèi)層的上皮細胞(從而防止感染)，以及介導(dǎo)病原體的排泄和防止成熟病毒顆粒的集合。粘膜免疫的另外重要部分是T細胞-介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。特異性識別病原體的T-細胞可以幫助抗體清除感染或直接殺死入侵者本身。粘膜中產(chǎn)生的T細胞能夠通過它們膜上的特別"導(dǎo)航"受體在粘膜組織內(nèi)運動。這表示如果免疫應(yīng)答產(chǎn)生于胃腸道內(nèi)層，此處產(chǎn)生的T細胞可以運動至其他粘膜位點，例如肺腔或鼻腔，從而在較大面積內(nèi)提供保護。盡管粘膜表面具有重要的作用，但是只有少量疫苗特異性靶向該免疫系統(tǒng)區(qū)域，因此保持需要這樣的疫苗，該疫苗導(dǎo)向粘膜表面以在粘膜組織處提供保護性免疫應(yīng)答。專利技術(shù)概述提供能夠電穿孔哺乳動物的粘膜細胞的電穿孔裝置。這種裝置包括電極顯微針板、反電極板、主殼體和能量源。主殼體物理相連所述顯微針板和反電極板,其中主殼體流體相連注射器，所述注射器能夠儲存用于遞送的藥劑。能量源電相連顯微針板，并且能夠產(chǎn)生電勢和通過所述顯微針板將所述電勢遞送至所述細胞。在另一方面，提供使用提供的裝置將藥劑施用至哺乳動物的粘膜細胞的方法。所述方法包括使所述顯微針板接觸所述粘膜；將所述藥物組成遞送至所述粘膜；以及應(yīng)用電穿孔，從而通過所述顯微針板由所述能量源產(chǎn)生電脈沖至所述粘膜。附圖簡述圖I示出待在小鼠中進行的免疫(通過標準注射)和攻擊時間表。圖2顯示圖，該圖示出趨化因子佐劑在粘膜肺部感染的小鼠模型中誘導(dǎo)特異性針對流感APR/8/34的細胞內(nèi)免疫。圖3a顯示圖，該圖示出流感A/PR/8/34-特異性血清長期存活的IgA和IgG預(yù)-攻擊；圖3b顯示圖，該圖示出流感A/PR/8/34中和抗體預(yù)-攻擊；圖3c顯示線圖，該圖示出數(shù)天內(nèi)平均重量損失；以及圖3d顯示線圖，該圖示出在攻擊后各種的存活率。圖4顯示關(guān)于Indian Rhesus獼猴免疫目錄的時間表和另外的信息?！D5顯示圖，該圖示出DNA疫苗的已知頂(肌肉)/EP(電穿孔)遞送的ELISpot數(shù)據(jù)優(yōu)于僅僅頂遞送。圖6顯示圖和圖像，它們示出產(chǎn)生強烈的免疫應(yīng)答圖6a顯示圖，該圖示出ELISpot數(shù)據(jù)；圖6b顯示圖，該圖示出T細胞增殖水平；圖6c示出來自RlO或SIV肽培養(yǎng)基的板；以及圖6d示出表明CFSE增殖的圖像。圖7顯示圖像，該圖像示出在BAL中由⑶4+T細胞引起的CTACKCo-免疫增強細胞因子分泌圖7a顯示圖，該圖示出外周中的細胞應(yīng)答；圖7b顯示圖，該圖示出BAL中的細胞應(yīng)答。圖8顯示圖，該圖示出CTACK在肺部引誘高水平的細胞因子分泌⑶8+T細胞圖8a顯示圖，該圖示出107a+⑶8+水平；圖8b顯示圖，該圖示出IFN-Y⑶+水平；圖8c顯示圖，該圖示出TNF+⑶8+水平；以及圖8d顯示圖，該圖示出IL-2+⑶8+水平。圖9顯示照片，其通過熒光的方式示出陽性GFP表達。圖 10 顯不4x4 陣列(Inovio Pharmaceuticals, Inc. ,Blue Bell,Pennsylvania)。附圖說明圖11顯示圖，該圖示出使用SynCon 流感疫苗免疫的獼猴血清中的HAI滴度水平。示出的結(jié)果為兩周后的次級免疫圖Ila為涉及A/HlNl/Mexico/2009株的HAI滴度；以及圖Ilb為涉及A/HlNl/NewCaledonia的HAI滴度。圖12a顯示照片，其示出淺層注射GFP質(zhì)粒和電穿孔后豚鼠口部粘膜組織中的GFP表達。在3天后處理收獲全部面頰頂部，并且在熒光顯微鏡下觀察以確定陽性GFP表達。圖12b顯示圖，該圖示出在豚鼠中3次免疫后H5-特異性IgA滴度。圖13是口部電穿孔/注射裝置的3/4視圖，其包括脈沖發(fā)生器、注射和電穿孔裝置。圖14是繪圖，其示出口部電穿孔/注射裝置的垂直剖視圖A-A。圖15是電穿孔/注射裝置的分解組件。圖16是電穿孔/注射裝置的主電極顯微針板。圖17示出涉及開口的0Μ-Ι/ΕΡ裝置。圖18顯示圖，該圖示出a)唾液；b)大便；c)血液中的IgA滴度。專利技術(shù)詳述提供能夠電穿孔哺乳動物的粘膜細胞的電穿孔裝置。這種裝置包括電極顯微針板、反電極板、主殼體和能量源。主殼體物理相連所述顯微針板和反電極板,其中主殼體流體相連注射器，所述注射器能夠儲存用于遞送的藥劑。能量源電相連顯微針板，并且能夠產(chǎn)生電勢和通過所述顯微針板將所述電勢遞送至所述細胞。在實施方案中，在所述主殼體和所述顯微針板之間還存在物理相連的活塞。所述活塞是可驅(qū)動的，并且通過驅(qū)動能夠通過所述顯微針板弓I起甚至所述藥劑的分布。在本專利技術(shù)的一個方面，提供口部電穿孔(EP)裝置，其能夠優(yōu)選以可容忍的方式產(chǎn)生電穿孔，從而在粘膜層處引起電場。在該方面的一個實施方案中，存在口部粘膜注射和電穿孔裝置(0Μ-Ι/ΕΡ)，其適于遞送治療劑(或預(yù)防劑)，例如DNA疫苗，并且轉(zhuǎn)染到口腔內(nèi)部上的粘膜組織/細胞中。在DNA免疫過程中，裝置將穿過患者的面頰區(qū)域附著。具有主電極顯微針板特征的主體在口腔的內(nèi)部上，并且臨近的返回電極板夾具特征在面頰的外部上。DNA疫苗將通過顯微針板注射；然后這將進行施加至相同電極顯微針板的低電壓EP脈沖，該設(shè)計將DNA疫苗和電穿孔共同定位至相同區(qū)域。研究表明DNA疫苗和EP以DNA疫苗轉(zhuǎn)染到周圍細胞中的量共同定位是非常重要的。在一些實施方案中，顯微針板的顯微針由導(dǎo)電材料制成，所述導(dǎo)電材料包括鍍金和銀的黃銅、鍍金和銀的銅、不銹鋼或鈦、或其他通常已知的導(dǎo)電金屬或金屬樣材料。在一·些實施方案中，能量源能夠以至少一種電能脈沖通過所述顯微針板遞送至所述粘膜細胞，所述電能脈沖具有IV至30V、2mA至IOOmA或ImS至250mS的特性。粘膜或粘膜組織可以是頰粘膜、鼻粘膜、食道粘膜、直腸粘膜、陰道粘膜、外陰粘膜、小腸粘膜、腸粘膜、胃粘膜、膀胱粘膜、尿道粘膜或眼組織粘膜，并本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：S·V·克默雷爾，J·麥科伊，K·布羅德里克，
申請(專利權(quán))人：因諾維奧制藥公司，
類型：
國別省市：