一種水楊苷對照品的制備工藝制造技術

本發明專利技術公開一種水楊苷對照品的制備工藝，包括如下步驟：（1）楊樹花中水楊苷提取；（2）大孔樹脂初步分離水楊苷；（3）正丁醇萃取；（4）正相硅膠法分離純化水楊苷；（5）水楊苷的重結晶。與現有技術相比，本發明專利技術提供的水楊苷對照品的制備工藝，能夠很好地符合中藥標準品的要求。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及對照品的制備領域，確切地說是指一種水楊苷對照品的制備工藝。
技術介紹
水楊苷為白色結晶；味苦；熔點199 202°C，比旋光度α厙-45. 6° (O. 6克/100厘米3無水乙醇)；可溶于水，易溶于沸水，難溶于乙醇(1:90)，不溶于醚或氯仿，但能溶于堿溶液、吡啶或冰醋酸中，其水溶液呈中性反應，分子中無游離酚羥基，屬于酚苷類化合物；經稀酸或苦杏仁酶水解，可生成葡萄糖和水楊醇。水楊醇的分子式為C7H802 ;為斜方無色針晶；熔點86 87°C;熱至100°C升華；可溶于水、苯，易溶于乙醇、醚、氯仿；遇硫酸呈紅色。目前，現有技術的水楊苷對照品的制備工藝存在一定缺陷，需要改進，以更好地符合中藥標準品的要求。
技術實現思路
針對上述缺陷，本專利技術解決的技術問題在于提供一種水楊苷對照品的制備工藝，能夠很好地符合中藥標準品的要求。為了解決以上的技術問題，本專利技術提供的水楊苷對照品的制備工藝，包括如下步驟(I)楊樹花中水楊苷提取取楊樹花4kg，剪碎，加15倍量水煎煮提取兩次，每次I.2-1. 8h，合并兩液，過濾，濾液靜置過夜，取上層澄清提取液A，備用；(2)大孔樹脂初步分離水楊苷，包括以下步驟(21)和步驟(22)(21)大孔樹脂的預處理取大孔樹脂D-1015kg，加丙酮8000-10000ml攪拌，浸泡10-14小時，裝入層析柱，排盡丙酮，蒸餾水沖洗至無丙酮味，加92%-98%乙醇沖洗后，加蒸餾水28-32L浸泡，用4%-6%鹽酸4-6L沖洗樹脂后，加蒸餾水沖洗至pH至6_7，用4%-6%NaOH4-6L沖洗樹脂，后用蒸餾水沖洗至pH至6_7，加92%_98%乙醇浸泡過夜，放出乙醇，用蒸餾水沖洗至無醇味，備用；(22)吸附和解吸附將步驟(I)中提取液A加入大孔吸附樹脂中上樣吸附24h以上，吸附速率為10-16L/h，用水洗至流出液變為淺黃色后，用15%-25%乙醇洗樹脂至TLC檢測無水楊苷，收集15%-25%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得濃縮液B，保存備用；(3)正丁醇萃取取濃縮液B，加正丁醇萃取3次，每次6-10L，合并萃取液，減壓回收正丁醇，回收完畢后樣品中加少量甲醇，繼續回收溶劑，得水楊苷樣品粗品C ;(4)正相硅膠法分離純化水楊苷取200目-300目的硅膠I. 2-1. 8kg，加2-4L氯仿-甲醇=8 1溶液混合均勻，裝柱；取樣品粗品C，加甲醇溶解，加硅膠150-250g拌樣，旋轉蒸發回收溶劑后，上樣，依次采用氯仿-甲醇比例依次為7 :1、4 :1、3 1的溶液及純甲醇梯度洗脫，分段收集各流份；洗脫產品分別以TLC檢測，合并含水楊苷且雜質干擾小的洗脫液，回收適量溶劑，待析出晶體后，用少量甲醇潤洗，過濾，得水楊苷粗品D，備用；(5)水楊苷的重結晶取水楊苷粗品D，加適量甲醇熱溶，室溫冷卻結晶，待析出晶體后，過濾，收集結晶，如此重復操作至濾液無色，收集結晶，至真空干燥箱中干燥，得水楊苷標準品。優選地，在步驟(I)中，取上層澄清提取液A的體積為90L-100L。優選地，在步驟(2)中(21)大孔樹脂的預處理取大孔樹脂D-1015kg，加丙酮8000-10000ml攪拌，浸泡12小時，裝入層析柱，排盡丙酮，蒸餾水沖洗至無丙酮味，加95%乙醇沖洗后，加蒸餾水30L浸泡，用5%鹽酸5L沖洗樹脂后，加蒸餾水沖洗至pH至6-7，用5%Na0H5L沖洗樹脂，后用蒸懼水沖洗至pH至6-7,加95%乙醇浸泡過夜,放出乙醇，用蒸懼水沖洗至無醇味，備用；(22)吸附和解吸附將步驟(I)中提取液A加入大孔吸附樹脂中上樣吸附24h以上，吸附速率14L/h，用水洗至流出液變為淺黃色后，用20%乙醇洗樹脂至TLC檢測無水楊苷，收集20%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得濃縮液B，保存備用。 優選地，在步驟(3)中取濃縮液B，加正丁醇萃取3次，每次8L，合并萃取液，減壓回收正丁醇，回收完畢后樣品中加少量甲醇，繼續回收溶劑，得水楊苷樣品粗品C。優選地，在步驟(4)中取200目-300目的硅膠I. 5kg，加3L氯仿-甲醇=8 1溶液混合均勻，裝柱，裝柱規格為7. 5cmX IlOcm ;取樣品粗品C,加甲醇溶解,加娃膠200g拌樣，硅膠為100目-200目，比例為樣品硅膠=1:2，旋轉蒸發回收溶劑后，上樣，依次采用氯仿-甲醇比例依次為7 :1、4 :1、3 1的溶液及純甲醇梯度洗脫，分段收集各流份，每種比例洗脫液約30L，每段收集5L ;洗脫產品分別以TLC檢測，合并含水楊苷且雜質干擾小的洗脫液，回收適量溶劑，待析出晶體后，用少量甲醇潤洗，過濾，得水楊苷粗品D，備用。優選地，在步驟(6)中取水楊苷粗品D，加適量600ml甲醇熱溶，室溫冷卻結晶，待析出晶體后，過濾，收集結晶，如此重復操作至濾液無色，收集結晶，至真空干燥箱中干燥，得水楊苷標準品。與現有技術相比，本專利技術提供的水楊苷對照品的制備工藝，水楊苷對照品的制備工藝，能夠很好地符合中藥標準品的要求。具體實施例方式為了本領域的技術人員能夠更好地理解本專利技術所提供的技術方案，下面結合具體實施例進行闡述。本專利技術實施例提供的水楊苷對照品的制備工藝，包括如下步驟( I)楊樹花中水楊苷提取取楊樹花4kg，剪碎，加15倍量水煎煮提取兩次，每次I.5h，合并兩液，過濾，濾液靜置過夜，取上層澄清提取液A，(約95L)，備用；(2)大孔樹脂初步分離水楊苷，包括以下步驟(21)和步驟(22)(21)大孔樹脂的預處理取大孔樹脂D_1015kg，加丙酮8000-10000ml攪拌，浸泡12小時，裝入層析柱，排盡丙酮，蒸餾水沖洗至無丙酮味，加95%乙醇沖洗后，加蒸餾水30L浸泡，用5%鹽酸5L沖洗樹脂后，加蒸餾水沖洗至pH至6-7，用5%Na0H5L沖洗樹脂，后用蒸懼水沖洗至pH至6-7,加95%乙醇浸泡過夜,放出乙醇,用蒸懼水沖洗至無醇味,備用；(22)吸附和解吸附將步驟(I)中提取液A加入大孔吸附樹脂中上樣吸附(速率14L/h) 24h以上，用水洗至流出液變為淺黃色后，用20%乙醇洗樹脂至TLC檢測無水楊苷，收集20%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得濃縮液B (約13L)，保存備用；(3)正丁醇萃取取濃縮液B，加正丁醇萃取3次，每次8L，合并萃取液，減壓回收正丁醇，回收完畢后樣品中加少量甲醇，繼續回收溶劑，得水楊苷樣品粗品C (約142. 6g)(4)正相硅膠法分離純化水楊苷取200目-300目的硅膠I. 5kg，加3L氯仿-甲醇=8 :1溶液混合均勻，裝柱(7. 5CmX110Cm);取樣品粗品C，加甲醇溶解，加硅膠200g拌樣(100目-200目，比例為樣品硅膠=1:2)，旋轉蒸發回收溶劑后，上樣，依次采用氯仿-甲醇比例依次為7 :1、4 :1、3 1的溶液及純甲醇梯度洗脫，分段收集各流份(每種比例洗脫液約30L，每段收集5L);洗脫產品分別以TLC檢測，合并含水楊苷且雜質干擾小的洗脫液，回收適量溶劑，待析出晶體后，用少量甲醇潤洗，過濾，得水楊苷粗品D (9.5g)，備用；(5)水楊苷的重結晶取水楊苷粗品D，加適量甲醇(約600ml)熱溶，室溫冷卻結晶，待析出晶體后，過濾，收集結晶，如此重復操作至濾液無色，收集結晶，至真空干燥箱中干燥，得水楊苷標準品(編號SYG-5021，3. 本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種水楊苷對照品的制備工藝，其特征在于，包括如下步驟：（1）楊樹花中水楊苷提取：取楊樹花4kg，剪碎，加15倍量水煎煮提取兩次，每次1.2？1.8h，合并兩液，過濾，濾液靜置過夜，取上層澄清提取液A，備用；（2）大孔樹脂初步分離水楊苷，包括以下步驟（21）和步驟（22）：（21）大孔樹脂的預處理：取大孔樹脂D？1015kg，加丙酮8000？10000ml攪拌，浸泡10？14小時，裝入層析柱，排盡丙酮，蒸餾水沖洗至無丙酮味，加92%？98%乙醇沖洗后，加蒸餾水28？32L浸泡，用4%？6%鹽酸4？6L沖洗樹脂后，加蒸餾水沖洗至pH至6？7，用4%？6%NaOH4？6L沖洗樹脂，后用蒸餾水沖洗至pH至6？7，加92%？98%乙醇浸泡過夜，放出乙醇，用蒸餾水沖洗至無醇味，備用；（22）吸附和解吸附：將步驟（1）中提取液A加入大孔吸附樹脂中上樣吸附24h以上，吸附速率為10？16L/h，用水洗至流出液變為淺黃色后，用15%？25%乙醇洗樹脂至TLC檢測無水楊苷，收集15%？25%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得濃縮液B，保存備用；（3）正丁醇萃取：取濃縮液B，加正丁醇萃取3次，每次6？10L，合并萃取液，減壓回收正丁醇，回收完畢后樣品中加少量甲醇，繼續回收溶劑，得水楊苷樣品粗品C；（4）正相硅膠法分離純化水楊苷：取200目？300目的硅膠1.2？1.8kg，加2？4L氯仿？甲醇=8：1溶液混合均勻，裝柱；取樣品粗品C，加甲醇溶解，加 硅膠150？250g拌樣，旋轉蒸發回收溶劑后，上樣，依次采用氯仿？甲醇比例依次為7：1、4：1、3：1的溶液及純甲醇梯度洗脫，分段收集各流份；洗脫產品分別以TLC檢測，合并含水楊苷且雜質干擾小的洗脫液，回收適量溶劑，待析出晶體后，用少量甲醇潤洗，過濾，得水楊苷粗品D，備用；（5）水楊苷的重結晶：取水楊苷粗品D，加適量甲醇熱溶，室溫冷卻結晶，待析出晶體后，過濾，收集結晶，如此重復操作至濾液無色，收集結晶，至真空干燥箱中干燥，得水楊苷標準品。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：房春林，吳學淵，李超，楊海涵，李猶平，
申請(專利權)人：成都乾坤動物藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：