樟樹(shù)無(wú)性系組培繁育方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種樟樹(shù)無(wú)性系組培繁育方法，屬于林木組培繁育技術(shù)領(lǐng)域，該方法步驟為：外植體材料的消毒→芽的誘導(dǎo)→芽的增殖→生根誘導(dǎo)→生根苗的煉苗→組培苗的移栽與管理，具體方法是將當(dāng)年生的嫩梢去掉葉片，切成每段帶有1～2個(gè)腋芽的莖段，將莖段消毒，用誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，新芽再進(jìn)行增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)，培育出的生根苗進(jìn)行煉苗馴化，最后將經(jīng)馴化的苗移栽到消毒的基質(zhì)上，進(jìn)行移栽苗的管理；采用該方法育苗不受季節(jié)、天氣等自然因素的影響，生產(chǎn)成本低，節(jié)約土地資源，提高育苗效率，同時(shí)采用該方法能有效防止褐化現(xiàn)象，有效增殖率高，生根苗生長(zhǎng)整齊，培養(yǎng)周期短，組培苗移栽成活率高，苗期培育周期短，該項(xiàng)技術(shù)有著非常重要的意義。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及ー種組 培繁育方法，具體涉及，屬于林木組培繁育

技術(shù)介紹
樟樹(shù)(Cinnamomum camphora (L. ) Presl),屬樟科樟屬樹(shù)種,是常綠喬木,是國(guó)家ニ級(jí)保護(hù)樹(shù)種。在華南地區(qū)，樟樹(shù)是著名的多用途鄉(xiāng)土珍貴樹(shù)種和經(jīng)濟(jì)樹(shù)種，分布范圍廣，開(kāi)發(fā)利用程度高，家喻戶曉，一直受到人們的高度重視。它除了是珍貴用材外，還可以提煉冰片、樟油等，其深加工產(chǎn)品在醫(yī)藥、光學(xué)及エ業(yè)上應(yīng)用廣泛，與人們的生產(chǎn)和生活息息相關(guān)。目前可供木材和樟油提取的資源已經(jīng)極為有限。天然分布的樟樹(shù)大都是低產(chǎn)低質(zhì)次生林，且多為零星分布，可利用的資源甚少。較好的樟樹(shù)一般都是房前屋后的風(fēng)水林、城市景觀和道路綠化樹(shù)木。近年來(lái)，隨著人們環(huán)保意識(shí)和商品林建設(shè)能力的提高，大規(guī)模造林緑化廣泛開(kāi)展，樟樹(shù)人工林開(kāi)始大量發(fā)展，樟樹(shù)良種苗木市場(chǎng)巨大。以往樟樹(shù)苗木培育技術(shù)主要有ニ種，一是種子培育，即在樟子種子成熟期，從樟樹(shù)上采摘果實(shí)，把果實(shí)經(jīng)地過(guò)去皮處理，得到種子，然后通過(guò)對(duì)種子適當(dāng)?shù)奶幚磉M(jìn)步播種催芽培育苗木；其ニ是扦插繁育，即從樟樹(shù)上采摘半木質(zhì)化的穗條，用激素處理穗條后，把穗條插入適當(dāng)?shù)幕|(zhì)中培育苗木。樟樹(shù)苗木的培育主要依靠種子繁育實(shí)生苗。但種子繁育苗木存在如下缺點(diǎn)，ー是種子育苗季節(jié)性強(qiáng)，一年ー茬，種子保存時(shí)間不長(zhǎng)，半年之后發(fā)芽率大幅下降；ニ是經(jīng)科學(xué)選育的良種一般種子都很少，難以滿足生產(chǎn)應(yīng)用的需求，而營(yíng)建種子園投資大，周期長(zhǎng)；三是種子培育苗木不能培育無(wú)性系，生產(chǎn)上林份分化大，林相參差不齊，對(duì)經(jīng)過(guò)選擇表現(xiàn)優(yōu)良的單株，無(wú)法實(shí)現(xiàn)規(guī)模利用。樟樹(shù)扦插繁育的缺點(diǎn)是，一是老樹(shù)穗條成活率低，因此需要營(yíng)建扦插用的采穗圃，經(jīng)過(guò)修剪矮化，培育合適的冠形，多產(chǎn)穗條。采穗圃需要精細(xì)化管理，必須投入大量的人工，在勞動(dòng)カ成本日漸高漲的今日，采穗圃管理成本難以承受；ニ是采穗母株容易老化，使用周期不長(zhǎng)，3-5年后即要淘汰；三是扦插成活率受天氣、管理、基質(zhì)、生根素等諸多因素的影響，往往成活率難以保證；四是苗木價(jià)格偏高，市場(chǎng)難以接受。樟樹(shù)是目前我國(guó)以南方地區(qū)的主要造林樹(shù)種和園林綠化樹(shù)種，毎年苗木用量約數(shù)億株，樟樹(shù)種苗基本上是采用種子繁育實(shí)生苗，少量扦插繁育的扦插苗。近幾年隨著樟樹(shù)良種選育的深入，所選育出來(lái)的的良種受到種子和插穗數(shù)量的限制，良種的推廣應(yīng)用遭遇瓶勁。樟樹(shù)無(wú)性系組培繁育技術(shù)的攻克，使得大樟樹(shù)良種的大規(guī)模使用成為現(xiàn)實(shí)。但是研究人員發(fā)現(xiàn)樟樹(shù)在組織培養(yǎng)中存在以下幾方面的問(wèn)題一是組培芽増殖吋，褐化現(xiàn)象嚴(yán)重，芽尖壞死，甚至枯褐而死，有效增殖率低；ニ是組培生根誘導(dǎo)吋，生根苗生長(zhǎng)不整齊，生根苗培養(yǎng)周期長(zhǎng)；三是組培苗移栽成活率低，苗期培育周期長(zhǎng)，所以研究樟樹(shù)無(wú)性系組培繁育的新技術(shù)有非常重要的意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是克服現(xiàn)有種子繁育和扦插繁育技術(shù)的不足，提供一種，該方法克服了樟樹(shù)種子繁育受季節(jié)影響、種子發(fā)芽率低，繁殖速率慢的缺點(diǎn)，同時(shí)克服了扦插苗繁育的缺點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了樟樹(shù)良種大規(guī)模繁育。為實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)的目的，本專利技術(shù)采取的技術(shù)方案如下 ，包括如下步驟 (1)外植體材料的消毒取當(dāng)年生嫩梢去掉葉片，切段，使每段為帶有廣2個(gè)腋芽的莖段，莖段先用0. 2%滅菌凈消毒10 20min，無(wú)菌水清洗6次，再用0. 1%升汞，2 5滴吐溫80，處理3 5min，無(wú)菌水清洗6次，消毒后備用；消毒成功率在80%以上(見(jiàn)表I)。表I外植體材料的消毒試驗(yàn) I 試驗(yàn)序號(hào) I 接種芽數(shù) I存活的芽數(shù)成功率(％) I 160'4981.67 12.35.28. 80.0 I_^_I_^_I__!_說(shuō)。_I (2)芽的誘導(dǎo)把步驟(I)經(jīng)消毒的莖段，接種到芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)6 15d的培養(yǎng)，在腋芽處開(kāi)始萌動(dòng)，并長(zhǎng)出新芽，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為DCRa+6-BA 0. 3mg+NAA 0. 05 0. 5mg ;芽的誘導(dǎo)率最高達(dá)75. 3%(見(jiàn)表2)。表2不同培養(yǎng)基對(duì)外植體腋芽誘導(dǎo)的影響為t本崎擇I_—_i__ 丨半じ)I丨K狀況丨丨秀け書(shū)い.)狀況:忑麗:.....豕函涵AiWft,—,麗丨丨:...... DCR79.5 m I,"十片 M:) F，尤愈傷79.6 較 IH I;，I!ト片展} f-, ii組織愈傷tl織 DrR兀揭化，芽綠丨I'In I"兀揭化，￥綠丨1.祖 75.3 壯,Hf汁M丌,尤愈傷組73.4 壯，葉片M開(kāi),尤愈傷 a 織 |_ 紐織 MS55 . 6揭化+芽:濃綠fH—'62 . 3渴化1f—:，—芽濃綠胤_.葉片イ、城汗，節(jié)Iim WWTWWl F イ(愈傷紐沒(méi)1_fiijK,打愈傷fi丨.織 注X5和X9為樟樹(shù)的家系號(hào) (3)芽的増殖將步驟(2)長(zhǎng)出的新芽培養(yǎng)30d后，將新芽切割下來(lái)，接到繼代増殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在増殖培養(yǎng)基培養(yǎng)6 15d，就會(huì)形成叢生芽，所述的増殖培養(yǎng)基為DCRa +6-BAO. 5 3mg+NAA 0. 05 0. 5mg+IAA 0. 05 2mg 或 DCR改+ 6-BA 0. 5 4mg+NAA 0. 05 Img ;有效芽的増殖系數(shù)最高為3. 2 (見(jiàn)表3和表4)。表3 X5在不同激素不同水平組合正交L9 (34)試驗(yàn)的芽増殖結(jié)果分析權(quán)利要求1.，其特征在于包括如下步驟 (I)外植體材料的消毒取當(dāng)年生嫩梢去掉葉片，切段，使每段為帶有廣2個(gè)腋芽的莖段，莖段先用O. 2%滅菌凈消毒10 20min，無(wú)菌水清洗6次，再用O. 1%升汞，2 5滴吐溫80，處理3 5min，無(wú)菌水清洗6次，消毒后備用；(2)芽的誘導(dǎo)把步驟(I)經(jīng)消毒的莖段，接種到芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)6 15d的培養(yǎng)，在腋芽處開(kāi)始萌動(dòng)，并長(zhǎng)出新芽，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為DCR改+ 6-BA O. 3mg+NAA O. 05 O. 5mg ； (3)芽的增殖將步驟(2)長(zhǎng)出的新芽培養(yǎng)30d后，將新芽切割下來(lái)，接到繼代增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)6 15d，就會(huì)形成叢生芽，所述的增殖培養(yǎng)基為DCR改+ 6-BA O. 5 3mg +NAA O. 05 O. 5mg +IAAO.05 2mg 或 DCR 改+ 6-BA O. 5 4mg +NAA O. 05 Img ； (4)生根誘導(dǎo)步驟(3)的叢生芽的單芽長(zhǎng)到I. 5 2cm左右長(zhǎng)時(shí)，選取葉片展開(kāi)的單芽，分割下來(lái)接到生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)7 10d，莖基部誘導(dǎo)出根，所述的生根培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA L 5 2. 5mg +IAA L 5 2. 5mg +6-BA O O. 5mg+NAA·O.05 O. 5mg ； (5)生根苗的煉苗經(jīng)過(guò)生根誘導(dǎo)，當(dāng)苗誘導(dǎo)生根后，將瓶苗置于有70%遮蔭的大棚中煉苗30 40d后，苗高3cm以上，可進(jìn)行移栽； (6)組培苗的移栽與管理將步驟(5)進(jìn)行煉苗的樟樹(shù)苗移栽至消毒的基質(zhì)上，移載時(shí)，把根放進(jìn)預(yù)先打好的小孔中，使根系舒展，充分壓實(shí)，使根土密接，要防止栽植過(guò)深、窩根或露根，移栽后澆透水；栽植后用塑料薄膜作小拱狀蓋好小苗保濕，遮蔭60-80% ;為防止病害，移苗后當(dāng)天噴防病藥劑800 - 1000倍菌毒清液或多菌靈一次，以后每周噴藥劑一次，3d后逐漸打開(kāi)塑料薄膜，15天后全部打開(kāi)，待小苗長(zhǎng)出新葉時(shí)方可開(kāi)始薄施肥，I個(gè)月后，本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
樟樹(shù)無(wú)性系組培繁育方法，其特征在于：包括如下步驟：（1）外植體材料的消毒：取當(dāng)年生嫩梢去掉葉片，切段，使每段為帶有1~2個(gè)腋芽的莖段，莖段先用0.2%滅菌凈消毒10～20min，無(wú)菌水清洗6次，再用0.1%升汞，2～5滴吐溫80，處理3～5min，無(wú)菌水清洗6次，消毒后備用；（2）芽的誘導(dǎo)：把步驟（1）經(jīng)消毒的莖段，接種到芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)6～15d的培養(yǎng)，在腋芽處開(kāi)始萌動(dòng)，并長(zhǎng)出新芽，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為DCR改＋6？BA？0.3mg+NAA？0.05～0.5mg；？（3）芽的增殖：將步驟（2）長(zhǎng)出的新芽培養(yǎng)30d后，將新芽切割下來(lái)，接到繼代增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)6～15d，就會(huì)形成叢生芽，所述的增殖培養(yǎng)基為DCR改＋6？BA？0.5～3mg？+NAA？0.05～0.5mg？+IAA？0.05～2mg或DCR改＋6？BA？0.5～4mg？+NAA？0.05～1mg；？（4）生根誘導(dǎo)：步驟（3）的叢生芽的單芽長(zhǎng)到1.5～2cm左右長(zhǎng)時(shí)，選取葉片展開(kāi)的單芽，分割下來(lái)接到生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)7～10d，莖基部誘導(dǎo)出根，所述的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA？1.5～2.5mg？+IAA？1.5～2.5mg？+6？BA？0～0.5mg+NAA？0.05～0.5mg；？（5）生根苗的煉苗：經(jīng)過(guò)生根誘導(dǎo)，當(dāng)苗誘導(dǎo)生根后，將瓶苗置于有70%遮蔭的大棚中煉苗30～40d后，苗高3cm以上，可進(jìn)行移栽；（6）組培苗的移栽與管理：將步驟（5）進(jìn)行煉苗的樟樹(shù)苗移栽至消毒的基質(zhì)上，移載時(shí)，把根放進(jìn)預(yù)先打好的小孔中，使根系舒展，充分壓實(shí)，使根土密接，要防止栽植過(guò)深、窩根或露根，移栽后澆透水；栽植后用塑料薄膜作小拱狀蓋好小苗保濕，遮蔭60？80%；為防止病害，移苗后當(dāng)天噴防病藥劑800－1000倍菌毒清液或多菌靈一次，以后每周噴藥劑一次，3d后逐漸打開(kāi)塑料薄膜，15天后全部打開(kāi)，待小苗長(zhǎng)出新葉時(shí)方可開(kāi)始薄施肥，1個(gè)月后，可進(jìn)行正常的水肥管理。...

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：曾令海，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：廣東省林業(yè)科學(xué)研究院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：