本發明專利技術的課題在于提供使用了促進心肌細胞的增殖的miRNA的心肌細胞的增殖方法、心臟病治療用載體及心臟病治療用藥物組合物等。提供使用了具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA的心肌細胞的增殖方法、含有該miRNA的心臟病治療用載體及含有該載體的心臟病治療用藥物組合物等。作為miRNA，特別優選選自由作為成熟型miRNA的miR-148a、miR-148b、miR-152及miR-373以及該miRNA的前體、以及它們的突變體及類似物所組成組中的miRNA。
【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及使用了微小RNA的心肌細胞的増殖方法、心臟病治療用載體及心臟病治療用藥物組合物。
技術介紹
成體的心肌細胞由于已經喪失了細胞分裂能力，因而一旦因暴露于缺血或心肌炎等各種刺激下壞死或喪失，則無法補充。其結果，殘存的心肌細胞通過代償性肥厚以期保護心臟機能，但若該狀態持續、超出了心肌組織的允許范圍，則引起進ー步的心肌細胞的疲憊、死亡，最終呈現心肌機能的降低，即心カ衰竭。以心力衰竭為首的心臟病成為日本死亡原因的第2位。另 外，心臟病患者的預后非常差，5年生存率只不過50%左右。因此認為，從醫療福利以及醫療經濟的觀點來看，有效的心カ衰竭治療方法的開發是非常有益的。作為迄今為止的心カ衰竭治療藥，逐漸使用増加心肌收縮カ的洋地黃制劑、黃嘌呤制劑等強心劑，但已知，若長時間投與這些藥劑，有時反而會惡化病情。另外，最近，利用^阻斷藥、ACE抑制劑等減輕由交感神經系統、腎素-血管緊張素系統的亢奮所導致的過剩的心臟負荷的藥劑的治療逐漸成為主流，但這些不過是對癥的治療法，無法恢復受到傷害的心臟組織本身。另ー方面，心臟移植為對重癥心力衰竭的根本的治療法，但從臟器提供者的不足、醫療倫理、給患者的肉體帶來的負擔或經濟的重擔等問題出發，難以使用本法作為通常的治療法。微小RNA (以下稱為“miRNA”)為存在于細胞內的長度21 25個堿基的非編碼RNA。廣泛保存于線蟲至哺乳類，作為在生物體內的各種基因的表達調節方面擔負重要作用的分子，近年來備受注目。miRNA由存在于基因組DNA上的miRNA基因首先以數百至數千個堿基左右的miRNA初級轉錄產物(pri-miRNA)的形式被轉錄。接著，在核內由被稱作Drosha的RNaseIII酶加工，變成約70個堿基左右的具有發卡結構的前體miRNA (pre-miRNA)0之后由Exportin-5從核運送到細胞質中，受到被稱作Dicer的RNase III酶的加工,變成21 25個堿基的雙鏈的成熟型miRNA (mature miRNA)。已知，成熟型miRNA的其中的一條鏈與被稱作RNA誘導沉默復合體(RISC)的蛋白質形成復合體，與具有互補序列的目標基因的mRNA結合，抑制目標基因的表達(非專利文獻1、2)。推測每I個生物物種存在1000種左右的miRNA，據說它們分別調節多個目標基因的表達，控制著編碼蛋白質的基因的總體的約1/3 (非專利文獻3)。另外，逐漸清楚了miRNA參與發生、分化、病毒感染時的生物體反應等，也暗示其與人的疾病有關。特別是關于癌與miRNA的關系，由于正常組織和癌組織中存在較多表達方式不同的miRNA，因此強烈啟示miRNA參與癌變過程，報道存在促進癌變的miRNA、抑制腫瘤的miRNA兩者(非專利文獻4、5、6)。另外，作為心臟病相關信息，很多研究小組報道了正常心臟和病變心臟中的miRNA的表達譜解析。其中一部分解析了具體的機能，例如報道了，心臟肥厚時miR-195的表達增力口，強制表達該miRNA的轉基因小鼠的心臟肥厚，引起了擴張型心肌病、心力衰竭(專利文獻I、非專利文獻7);另外報道了，作為心臟肥厚時表達減少的miRNA的miR-1抑制心肌細胞的增殖(專利文獻2、非專利文獻8)等。現有技術文獻專利文獻專利文獻1:W02009/062169 專利文獻2:冊2006/107826非專利文獻非專利文獻l:He & Hannon, Nature Reviews Genetics, 5:522-531，(2004)非專利文獻2:Bartel, Cell, 116:281-297，(2004)非專利文獻3:Berezikov et al. , Cell, 120:21-24, (2005)非專利文獻4: Esquela-Kerscher & Slack, Nature ReviewsCancer, 6:259-269, (2006)非專利文獻5:Kent & Mendell, Oncogene, 25:6188-6196，(2006)非專利文獻6: Zhang et al. , Developmental Biology, 302:1-12, (2007)非專利文獻7:van Rooij et al. , Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America, 103:18255-18260，(2006)非專利文獻8:Zhao et al.，Cell, 129:303-317，(2007)
技術實現思路
專利技術要解決的問題本專利技術的課題在于鑒定促進心肌細胞的增殖的miRNA并提供一種使用該miRNA的心肌細胞的增殖方法、心臟病治療用載體及心臟病治療用藥物組合物等。用于解決問題的方案為了解決上述課題，本專利技術人等著眼于作為調節心肌細胞增殖因子的微小RNA(以下稱為“miRNA”)而進行研究，進行有關調節心肌細胞的增殖的miRNA的解析。并且，進行深入研究，結果，本專利技術人等成功地鑒定了調節心肌細胞的增殖的多個miRNA，從而完成了本專利技術。作為本專利技術的第I方式，本專利技術人等提供具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA。更具體而言，本專利技術的miRNA包括以下的方式(1-1)具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA。(1-2)根據上述(1-1)所述的miRNA，其中，miRNA為選自由成熟型miRNA及該miRNA的前體、以及它們的突變體及類似物所組成組中的物質。(1-3)根據上述(1-1)或(1-2)所述的miRNA，其中，miRNA為包含由SEQ ID NO: I或SEQ ID N0:2構成的種子序列的物質。(1-4)根據上述(1-3)所述的miRNA，其中，包含由SEQ ID N0:1構成的種子序列的物質為選自由 miR-148a (SEQ ID NO:3)、miR_148b (SEQ ID NO:5)、miR-152 (SEQ IDNO: 7)及它們的前體、以及它們的突變體及類似物所組成組中的物質。(1-5)根據上述(1-3)所述的miRNA，其中，包含由SEQ ID N0:2構成的種子序列的物質為選自由miR-373 (SEQ ID N0:9)及其前體、以及其突變體及類似物所組成組中的物質。作為本專利技術的第2方式，本專利技術人等提供了具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA的藥物用途，所述藥物用途可以記載為如下形式Ca) 一種用于治療心臟病的藥物組合物，其使用了上述規定具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA的核酸；(b)—種心臟病的治療方法，其特征在于，將規定具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA的核酸導入個體心臟的損傷部位，從而使心肌細胞在該部位增殖；(c) 一種規定具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA的核酸在制造用于治療心臟病的藥物中的用途；或((1) 一種規定具有心肌細胞的增殖促進作用的miRNA的核酸，其在心臟病的治療中使用。本專利技術中“規定miRNA的核酸”是指用于使(i )成熟型miRNA及該miRNA的前體以及它們的突變體及類似物或(ii )成熟型miRNA及該miRNA的前體、以及它們的突變體及類似物在生物體內或細胞內表達的表達載本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...
【專利技術屬性】
技術研發人員：河島佳代子，小清水右一，
申請(專利權)人：第一三共株式會社，
類型：
國別省市：
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