一種用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的裝置制造方法及圖紙

一種用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的裝置，包括培養井及與其對應的嵌入井，所述培養井內盛放營養液，所述嵌入井上面有保護蓋、底部為屏障片且活動嵌入所述培養井內，待測材料放置在所述嵌入井內腔底部。本實用新型專利技術的嵌入井活動嵌入培養井中，培養井內的營養液通過嵌入井底部屏障片中的微小孔隙滲入嵌入井內與待測材料接觸，可測定培養液中靶細胞的增殖率及觀察細胞形態，判斷待測材料的細胞毒性，與在體實驗有更好的相關性，能更好的測定牙齒修復材料的生物相容性，且結構簡單，使用方便，實驗試驗結果重復性好。（*該技術在2022年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本技術涉及ー種用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的裝置。
技術介紹
牙齒修復材料是口腔醫學應用最廣的生物材料，隨著科學技術的發展，毎年都有許多新型牙齒修復材料出現。這些材料能被臨床接受的先決條件是必須經過安全性和有效性的檢測與評價，其中，生物相容性的測定是確保材料能安全地應用于人體的重要保證。生物相容性是指在特定應用中，材料產生適當的宿主反應的能力。這一定義的內在含義是指某ー單個材料并不是在所有應用中均是生物可接受的。例如氫氧化鈣水門汀材料作為牙齒蓋髓材料是可接受的，但作為植入材料就不可接受。 在牙齒修復材料的生物相容性評價中應用了許多體外試驗，其目的是盡量減少昂貴且影響因素眾多的動物試驗和在體試驗。其中應用細胞培養技術進行的細胞毒性試驗是ー項應用最廣泛的體外試驗方法，也是口腔材料生物相容性評價體系中重要的檢測指標。該試驗讓培養細胞與被測材料通過一定方式接觸后，測定細胞的生長數量、生長情況及活性狀態來評價被測材料的細胞毒性。該試驗容易實施，速度快，費用比動物試驗和在體試驗低很多，可以高度標準化和實驗控制，結果的重復性好，并且可以嚴格控制以針對特定科學問題。現有用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的試驗方法有3種直接接觸法或浸提液法、瓊脂擴散(agar diffusion)法和濾膜擴散(millipore filter)法。在直接接觸法或浸提液法中，被測材料或其浸提液直接與培養細胞接觸。瓊脂擴散法和濾膜擴散法分別是以瓊脂層和纖維素濾膜為屏障的間接接觸方法，被測材料通過瓊脂層或濾膜與培養細胞間接接觸，材料釋放的物質通過滲透、擴散的方式穿過瓊脂層或濾膜，作用于其下的細胞。上述標準細胞毒性試驗方法測定牙齒修復材料的細胞毒性時存在缺陷，最典型的是被測材料與細胞的接觸方式與實際情況差異很大，而接觸方式又是影響測定結果的重要因素。在體時，絕大多數的牙齒修復材料并不與組織細胞(主要是牙髓組織細胞)直接接觸，而是被ー層牙本質隔開。因此，一般認為直接接觸法所得結果并不能反映或預測材料在在體時的生物相容性。在瓊脂擴散法和濾膜擴散法中，雖然被測材料與培養細胞間有屏障隔開，但這兩種方法的屏障是模擬口腔黏膜，而非牙本質。在瓊脂擴散法中，材料釋放的物質中，只有水溶性成分可以擴散通過瓊脂層，作用于其下的細胞。如果材料中的成分不能擴散過瓊脂，則不能測出，盡管在體證明了其刺激性。瓊脂的滲透特性與牙本質的相差太大，遠不能模擬牙本質。另外，瓊脂擴散法的結果是等級的半量化指標，受觀察者主觀性影響較大，客觀性不高。濾膜擴散法所用的濾膜實際上是由醋酸纖維制成的纖維網膜，其厚度、孔隙度及滲透性均與牙本質相去甚遠，而且濾膜能被ー些牙齒修復材料中的成分溶解，其適用測定的材料有限。因此，以此兩種方法測定牙齒修復材料的細胞毒性結果與動物試驗及在體觀察差別較大，相關性較小，表現在許多牙齒修復材料體外細胞毒性試驗顯示較強的細胞毒性，但動物試驗及在體觀察卻顯示無刺激性。以臨床上常用的氧化鋅丁香油水門汀為例，現有的體外細胞毒性試驗結果顯示該材料有嚴重的細胞毒性，而動物試驗和長期臨床應用表明，該材料對牙髓組織刺激性小，而且還具有安撫收斂作用。導致體外細胞毒性試驗結果與動物試驗或在體觀察相關性差的重要原因之ー是體外細胞毒性試驗中材料和靶細胞的接觸方式及牙本質屏障的缺失。因為牙本質能形成材料成分必須通過才能到達牙髓組織的屏障，研究表明，厚度為O. 5^2mm的牙本質屏障，能有效調節材料對牙髓的影響。為了模擬在體情況，許多學者用離體牙制備牙本質片作為屏障用于體外細胞毒性試驗中，所得結果與動物試驗及在體研究的相關性有明顯的提高。但是，由于人離體牙本質的通透性因牙齒不同而變化很大，甚至同一顆牙齒不同部位的牙本質的滲透性也不同，因此，在用牙本質片作為屏障時，需要廣泛收集并測定牙本質片的滲透性，以篩選滲透率相近的牙本質片來進行試驗。然而，由于符合要求的新鮮人離體牙越來越難以獲得，獲得足夠數量且滲透率相近的牙本質片更不易得到。若采用易于獲得的動物牙齒(如牛牙)，也存在動物牙本質與人牙本質在結構和滲透性方面差異大的問題。這些原因使得以離體牙本質片作為屏障的體外細胞毒性試驗難以推廣。·
技術實現思路
本技術的目的在于提供一種用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的裝置，能夠模擬牙齒充填材料與牙髓細胞的接觸狀態，解決現有技術難以有效預測牙齒修復材料生物相容性的問題。本技術的目的是這樣實現的，一種用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的裝置，包括培養井及與其對應的嵌入井，所述培養井內盛放營養液，所述嵌入井上面有保護蓋、底部為屏障片且活動嵌入所述培養井內，待測材料放置在所述嵌入井內腔底部。所述嵌入井底部位于培養井下四分之ー處。所述培養井的壁厚為l_2mm。所述培養井底部為底盤，所述底盤上有多個培養井且為一體。所述屏障片為離體人牙本質片或者離體牛牙本質片或者與人牙本質相同通透性的陶瓷片。所述陶瓷片為有孔隙的羥基磷灰石陶瓷片，所述孔隙的平均直徑為O. Γδμπι.進ー步，所述孔隙的平均直徑為O. 2^2 μ m。再進ー步，所述孔隙的平均直徑為O. 5^1 μ m。所述屏障片通過無毒粘結劑與嵌入井底部粘接。所述底盤、培養井、嵌入井及保護蓋均為光學級聚苯こ烯樹脂材料。本技術具有如下有益效果，本技術的嵌入井活動嵌入培養井中，培養井內的營養液通過嵌入井底部屏障片中的微小孔隙滲入嵌入井內與待測材料接觸，待測材料中的可析出成分析出，再通過嵌入井底部屏障片中的微小孔隙滲透或擴散進入細胞培養井內作用于營養液中的靶細胞，即可測定培養液中靶細胞的増殖率及觀察細胞形態，判斷待測材料的細胞毒性。本技術與在體實驗有更好的相關性，能更好的測定牙齒修復材料的生物相容性，且結構簡單，使用方便，實驗試驗結果重復性好。附圖說明圖I為本技術實施例結構示意圖；圖2為本技術實施例保護蓋結構示意圖；圖3為本技術實施例嵌入井結構示意圖；圖4為本技術實施例培養井結構示意圖。圖中，I.底盤、2.嵌入井、3.保護蓋、4.培養井、5.屏障片、6.待測材料、7.營養液。具體實施方式實施例1，一種用于體外測定牙齒充填修復材料體外細胞毒性的裝置，包括用于培養細胞的培養井4、培養井4下面的底盤I、嵌入井2和保護蓋3，底盤I位于裝置底部，底盤I上有24個培養井4，分3排排列，每排6個，共3排。嵌入井為24，其分布及位置關系與培養井4 對應。嵌入井2嵌入培養井4內，保護蓋3覆蓋于嵌入井2上。培養井4與底盤I是一體的，培養井4的壁厚為I. 5mm，嵌入井2是活動的，當其嵌入培養井4內吋，其底部位于培養井4內下四分之ー處。嵌入井2的底部為屏障片5，屏障片5為具有與人牙本質相同通透性的陶瓷片，陶瓷片上有孔隙，孔隙的平均直徑為3 μ m。屏障片5通過粘接劑粘接到嵌入井2的底部，所用的粘接劑具有非常小的細胞毒性，可選用的粘接劑有纖維蛋白類醫用粘接劑、氰基丙烯酸酯類醫用粘接劑。培養井4的底盤I上可以制作多個培養井4，例如24個，48個，這些培養井4均與底盤I為一體。每個培養井4對應的嵌入井2可以是單個的，嵌入井2也可以連接為一體，成為嵌入井盤，嵌入井2的數量及位置分布與培養井4相對應。嵌入井2嵌入培養井4后，其底部與培養井本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種用于體外測定牙齒充填修復材料細胞毒性的裝置，其特征在于：包括培養井（4）及與其對應的嵌入井（2），所述培養井（4）內盛放營養液（7），所述嵌入井（2）上面有保護蓋（3）、底部為屏障片(5)且活動嵌入所述培養井(4)內，待測材料（6）放置在所述嵌入井（2）內腔底部。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：趙信義，
申請(專利權)人：中國人民解放軍第四軍醫大學口腔醫院，
類型：實用新型
國別省市：