本發明專利技術公開了一種用于DNA和RNA快速分離純化回收的核酸吸附材料的制備方法，制得的核酸吸附材料由以下原料按重量百分比制成；紙纖維：3%～15%，硅粉：3%～20%，羧甲基纖維素：5%～15%，余量為去離子水，原料的重量百分比總和為100％；首先將配方中的原料加熱溶解形成混合物，然后用電動攪拌器進行勻漿后倒入直徑為4cm的六孔模具中；放置在60℃烤箱中烘烤30min或在常溫下自然干燥，即可得到核酸吸附材料。制得的核酸吸附材料做成直徑為0.7cm的圓形紙片，放入核酸吸附離心套管中作為核酸吸附介質，在特定溶液中能特異地吸附DNA或RNA，從而降低了蛋白質和其他雜質的污染，提高了DNA或RNA的純度和產量，避免使用有機溶劑提取DNA或RNA時所對人體引起的毒副作用。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于分子生物學
，涉及核酸DNA或RNA分離純化及回收的一種核酸吸附材料的制備，具體涉及一種對動物、植物、微生物的組織及細胞中的DNA或RNA特異吸附的核酸吸附材料的制備方法，采用該吸附材料能簡單、快速分離出超純的DNA或RNA。
技術介紹
目前，國內外提取動物、植物、微生物的組織及細胞中的DNA或RNA多采用有機溶劑抽提方法。該方法操作繁瑣、耗時長、不易被掌握，提取的核酸DNA或RNA易受蛋白質及雜質污染，且純度和產量不高，而且有機溶劑有害人體健康。
技術實現思路
針對上述方法存在的不足，本專利技術目的在于，用于DNA和RNA快速分離純化回收的核酸吸附材料的制備方法。為了實現上述任務，本專利技術采用如下的技術方案一種用于DNA和RNA快速分離純化回收的核酸吸附材料的制備方法，其特征在于，按以下步驟操作I)原料組成及重量百分比紙纖維3% 15%，硅粉3% 20%，羧甲基纖維素5% 15%，余量為去離子水，原料的重量百分比總和為100% ；2)將配方中的原料加熱溶解形成混合物，然后用電動攪拌器進行勻漿；3)將得到的勻漿液倒入直徑為4cm的六孔模具中；放置60°C烤箱中烘烤30min或常溫下自然干燥，即可得到核酸吸附材料。本專利技術的方法制備的核酸吸附材料，在特定的溶液中能特異性吸附DNA或RNA，從而使提取DNA或RNA操作方法簡單快速，且純度高、產量高，避免使用有機溶劑。可用于分子生物學研究領域中的動物、植物、微生物的組織及細胞中DNA或RNA的分離、純化和回收。附圖說明圖I是本專利技術制備核酸吸附材料的流程圖；圖2是制成的核酸吸附紙纖維材料圖片；下面結合附圖和實施例進一步詳細說明。具體實施例方式以下是專利技術人給出的實施例，需要說明的是，這些實施例是較優的例子，本專利技術不限于這些實施例。實施例I :參見圖1，本實施例的操作步驟為I)在三角瓶中按重量取優質紙纖維10%、硅粉15%，羧甲基纖維素15%，用去離子水補至總體積500ml。2)將三角瓶放入水浴中，加熱，直至上述混合物完全溶解。3)用電動攪拌器進行勻漿。4)將勻漿液倒入直徑為4cm的六孔模具中，將模具放置在60°C烤箱中烘烤30min或在常溫下自然干燥，即可得到核酸吸附材料。5)將制備好的核酸吸附材料做成直徑O. 7cm圓形紙片(如圖2所示)。實施例2 參見圖1，本實施例的操作步驟為I)在三角瓶中按重量取優質紙纖維5%、硅粉10%，羧甲基纖維素10%，用去離子水補至總體積500ml。2)將三角瓶放入水浴中，加熱，直至上述混合物完全溶解。3)用電動攪拌器進行勻漿。4)將勻漿液倒入直徑為4cm的六孔模具中，將模具放置在60°C烤箱中烘烤30min或在常溫下自然干燥，即可得到核酸吸附材料。5)將制備好的吸附材料做成直徑O. 7cm圓形紙片(如圖2所示)。實驗例I :微量血液RNA核酸吸附快速分離采用上述實施例制備的核酸吸附材料，放入核酸吸附離心套管的內層中作為核酸吸附介質，外層套管為液體收集管，使用時將內層吸附管插入到外層收集管中。 RNA提取試劑由紅細胞裂解溶液，離解溶液，清除溶液，洗滌液溶和分離溶液組成。所述的RNA提取試劑各組分及物質濃度(摩爾/升)組成按終濃度體積為紅細胞裂解溶液0.01-lmol/L 的 NH4C1，0. 0001-0. 3mol/L 的 KHCO3,O. 00001-lmol/L EDTA余量為去離子水；離解溶液0.l-10mol/L 的胍鹽，O. 005-0. 5mol/L 的 C6H5Na3O7,0. 0001-lmol/L 的C15H28NaNO3, ,0. 01_2mol/L 的 C2H6OS, O. Ι-lOmol/L 的 NaAc，余量為去離子水；清除溶液0. 01-20mol/L的胍鹽，O. 001-0. 60mol/L的C4H11NO3,余量為乙醇和去離子水(2:1，v/v)的混合溶液；洗滌溶液0.001-2mol/L 的 NaCl，0. 0001_2mol/L 的 C4H11NO3，余量為乙醇和去離子水(2:1，v/v)的混合溶液；操作步驟是I、取O. 5-lml血液，加入3倍體積紅細胞裂解溶液混勻，室溫放置5min。2、4000r離心Imin棄去上清。3、沉淀中加入Iml離解溶液混勻，室溫放置5min。4、將液體吸入核酸吸附管中室溫放置5min。5. 12000r離心30s，棄去收集管中的廢液，將吸附管插回收集管中。6、加清除溶液，12000r離心30s，棄去收集管中的廢液，將吸附管插回收集管中。7、加洗滌溶液，12000r,離心30s，棄去收集管中的廢液。8、將吸附管插入一干凈的離心管中，加分離溶液室溫放置2min后，12000r離心Imin，即獲得純化的RNA。實驗例2 :組織細胞基因組DNA的核酸快速分離本實施例與實驗實施例I不同的是，選用的DNA核酸提取試劑由懸浮溶液、離解溶液、清除溶液、洗滌溶液和分離溶液組成。DNA核酸提取試劑各組分及物質濃度(摩爾/升)組成按終濃度體積為懸浮溶液0.01-0. 2mol/L 的 C4H11NO3,0. 001-0. 5mol/L 的 EDTA, O. 0001-0. 9mol/L的C15H28NaNO3,余量為去離子水；離解溶液0. 5-1OmoI/L是胍鹽，余量為去離子水；清除溶液0. l-10mol/L的胍鹽，O. 01_4mol/L的C4H11NO3,余量為乙醇和去離子水(2:1, v/v)的混合溶液；洗滌溶液0. 01-8mol/L的NaCl，0. 001_3mol/L的C4H11NO3,余量為乙醇和去離子 水(2:1, v/v)的混合溶液；，分離溶液0.01-10mol/L 的 EDTA，0. 001-0. 6mol/L 的 C4H11NO3,余量為去離子水。操作步驟是I、收集經勻漿后的組織或消化后的細胞，加懸浮溶液懸浮。2、加離解溶液混勻，室溫5min。3、將液體吸入吸附管中，12000r離心30s，棄去收集管中的廢液，將吸附管插回收集管中。4、加清除溶液，12000r離心30s，棄去收集管中的廢液，將吸附管插回收集管中。5、加洗滌溶液，12000r,離心30s，棄去收集管中的廢液。6、將吸附管插入一干凈的收集管中，加分離溶液室溫放置2min后，12000r離心Imin，即獲得純化的DNA。本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種用于DNA和RNA快速分離純化回收的核酸吸附材料的制備方法，其特征在于，按以下步驟操作：1）原料組成及重量百分比：紙纖維：3%～15%，硅粉：3%～20%，羧甲基纖維素：5%～15%，余量為去離子水，原料的重量百分比總和為100％；2）將配方中的原料加熱溶解形成混合物，然后用電動攪拌器進行勻漿；3）將得到的勻漿液倒入直徑為4cm的六孔模具中；放置在60℃烤箱中烘烤30min或在常溫下自然干燥，即可得到核酸吸附材料。
【技術特征摘要】
1 .一種用于DNA和RNA快速分離純化回收的核酸吸附材料的制備方法，其特征在于，按以下步驟操作 1)原料組成及重量百分比 紙纖維3% 15%，硅粉3% 20%，羧甲基纖維素5% 15%，余量為去離子水，原料的重量...
【專利技術屬性】
技術研發人員：饒國洲，李昂，周洪，李曉紅，
申請(專利權)人：西安交通大學口腔醫院，
類型：發明
國別省市：
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