改進經口遞送的方法技術

本發明專利技術提供了一種改進經口遞送治療劑的方法，包括將治療劑連接至含血管生成素的載體蛋白質的步驟，含有所述血管生成素和治療劑的融合蛋白質或綴合物以及其在醫學上的用途。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及改進經口遞送治療性蛋白質或肽的方法，并且具體涉及設計當口服時具有改進的生物利用度的蛋白質或肽的方法以及具有改進的生物利用度的治療性蛋白質和肽。
技術介紹
口服治療劑是需要的，因為它通常與患者對治療方法的最佳順應性聯系在一起，并且使得給藥方案有更大靈活性，以及避免與注射給藥法有關的危險、不便和費用。但是，使用口服途徑的能力受到藥物的如下能力的限制(a)被通過口、食道或腸道的粘膜層吸收的能力， (b)在消化道中酸和酶降解下存在的能力，以及(C)經過上皮細胞層進入體循環的能力。幾乎所有的藥理學肽都不可口服利用至可用程度。具體地，激素例如胰島素、生長激素、促卵泡激素或降鈣素，以及細胞因子例如干擾素或白細胞介素，已知在沒有特殊劑型時的口服利用度遠低于2%。在這種水平下，利用度的時間差異和個體差異通常較高，使得口服不實用、不經濟或危險。肽在藥物治療中的重要性逐漸增加。但是，它們的使用受到大部分肽必須通過注射給藥這個事實的限制。雖然已建議全身給藥的替代途徑，例如肺、鼻或經皮路徑，但是迄今僅被開發用于有限范圍的藥劑，并且受到耐受性和可以單劑量遞送的化合物量的限制。已經進行了多種嘗試以改進藥物的生物利用度。這些包括結合滲透促進劑，例如水楊酸鹽、脂質-膽汁鹽混合物、膠束、甘油酯和?；舛緣A，但是它們被發現在大多數情況下會引起毒性問題。如果藥物是蛋白質或肽，嘗試改進口服生物利用度包括將蛋白質或肽與蛋白酶抑制劑——例如抑肽酶、大豆胰蛋白酶抑制劑和抑氨肽酶素——混合以限制所給予的治療劑降解。遺憾的是這些蛋白酶抑制劑是非選擇性的，并且內源性蛋白酶也被它們抑制而產生不良作用。提供肽的口服制劑的其他嘗試已使用保護性包衣例如腸溶衣，單獨使用或與通過將蛋白質或肽與兩性寡聚物或多聚物偶聯的肽的化學修飾一起使用，所述兩性寡聚物或多聚物包括例如親水的聚乙二醇部分和親脂的烷基部分。這些技術僅提供了非常有限的成功。另一個方法是加入疏松胃腸道緊密連接的賦形劑，但是這一方法引起了耐受性問題，因為所損壞的屏障可以允許附近的所有分子進入，包括細菌。也有藻酸鈣包衣的脂質體制劑已用于肽的結腸遞送。但是，到目前為止已發現這些方法只能有限應用。一些使治療性肽或蛋白質可口服生物利用的嘗試依賴于使用載體蛋白質或肽，例如維生素B12。這些體系仍然在研究中。因此，本領域需要用于改進經口遞送藥劑——尤其是蛋白質或肽——的新方法，以使它們能夠完整的存在于腸道或能夠穿過胃腸道進入體循環。
技術實現思路
在第一方面中，本專利技術提供了一種改進經口遞送治療劑的方法，包括將治療劑連接到含有血管生成素的載體蛋白質的步驟。申請人:更早的申請PCT/AU2009/000602證明了血管生成素是可口服利用的，因為當在小鼠飲食中飼喂給小鼠時能夠產生效果。還已經發現牛奶提取物中的血管生成素在任何劑量下都沒有已知的毒性，并且可以從幾天一次至持續的頻率被有效給藥。專利技術人目前已經發現，將血管生成素連接至本身不可口服生物利用(或只有有限的口服利用度)的治療劑可以向治療劑提供大的口服生物利用度。在第二方面中，本專利技術提供了一種經口遞送體系，含有血管生成素作為載體用于將治療劑基本完整地轉運進入或穿過胃腸道。在第三方面中，本專利技術提供了一種含有連接至治療劑的血管生成素的融合蛋白質或綴合物。 在第四方面中，本專利技術提供了一種藥物組合物，含有本專利技術第三方面的融合蛋白質或綴合物以及可藥用載體。在一個實施方案中，所述藥物組合物用于口服。第五方面提供了血管生成素用于連接到治療劑以改進所述治療劑的口服生物利用度的用途。在第六方面中，本專利技術還提供了預防或治療需要用治療劑治療的動物中病理病癥的方法，所述方法通過對動物口服給予有效量的本專利技術第三方面的融合蛋白質或綴合物或者本專利技術第四方面的藥物組合物，其中所述治療劑通常是基本不可口服生物利用的。本專利技術的第七方面提供了血管生成素在制造含有治療劑的藥劑中的用途，其中所述藥劑用于經口給予至需要用所述治療劑治療的患者。還預料期，血管生成素可以用于經口遞送劑，用于診斷和或監測病理病癥的進程和或另一種治療劑對病理病癥進程的作用。在一個實施方案中，所述治療劑是蛋白質或肽。在另一方面中，本專利技術提供了含有本專利技術第三方面的所述融合蛋白質或綴合物的食物、營養制品或飼料。不希望受限于任何對觀測到的有益效果提出的機制，認為血管生成素高度折疊的結構造成了它對胃腸道中存在的蛋白酶的抗性。另外，認為血管生成素具有特定膜結合性質以及親脂和親水的平衡，所述平衡增強了它穿過胃腸(GI)道中粘膜層的轉運(以及它綴合于的任何物質的轉運)。這種性質也被認為使血管生成素和它所綴合的任何物質能夠轉運穿過上皮細胞膜。附圖說明在隨后的非限定性的實例中，參照附圖描述了本專利技術，其中圖I顯示了在pH 3. O、酶與底物比例為1:20下以胃蛋白酶消化2小時天然bAng的消化抗性。泳道I給出分子量，對于胃蛋白酶消化的天然bAng,泳道4至12給出bAng的譜和強度。圖2顯示了使用Nde I和Xho I限制酶切位點構建至pET30C載體的a MSH. bAng的N-末端載體構建體圖譜。圖3顯示了使用Nde I和Xho I限制酶切位點構建至pET30C載體的a Ang. aMSH的C-末端載體構建圖譜。圖4提供了用于構建使用Nde I和Xho I限制酶切位點構建至pET30C載體的a MSH. bAng 和 bAng. aMSH 的引物序列。圖5提供了 a.來自PET30C載體構建體的a -MSH-bAng的DNA序列和蛋白質序列，以及b.來自pET30C載體構建體的bAng- a -MSH的DNA序列和蛋白質序列。圖6顯示了來自pET30C載體內構建體的在大腸桿菌中表達的純化的a MSH. bAng和bAng- a -MSH融合蛋白質的SDS聚丙烯酰胺凝膠。 圖7顯示了 C57Black/6J小鼠的血液(a.)和組織(b.)中放射性標記的a MSH.bAng融合蛋白質的比例，表示為總的口服飼喂所給予的百分比。圖8顯示了 C57Black/6J小鼠的血液(a.)和組織(b.)中放射性標記的bAng.a MSH融合蛋白質的比例，表示為總的口服飼喂所給予的百分比。具體實施例方式專利技術人提出，由血管生成素提供的疏水殘基和親水殘基的平衡使其保護與其一起給藥的治療劑免受消化道中酸和酶降解，并使得治療劑通過口、食道或腸道的粘膜層吸收，并任選經過上皮細胞層基本完整地進入體循環。“基本完整”表示沒有除去藥劑的治療活性。本說明書中使用的術語“治療劑”包括藥物(drug)(例如小分子藥物，例如抗生素)、藥品(medicine)、可檢測的標記物、蛋白質(例如，酶)、基于蛋白質的化合物(例如含有一條多肽鏈的蛋白質復合物)以及多肽(肽)。所述藥劑不限于它們的治療用途。本文所指的“經口遞送”或“口服”意在包括任何向GI道的給藥或遞送，并且包括直接向口咽腔給藥以及經口給藥，其中肽或多肽實際吸收進入腸道或體循環發生在胃腸道中，包括胃、小腸和大腸。本文使用的口服包括舌下給藥(通過施用于受者的舌下給藥，代表一種通過口咽腔的給藥形式)和頰給藥(一種在受者牙齒和面頰之間的劑型的給藥)。經口遞送或口服在本文可以互換使用。本文使用的生物利用度是指治療劑在腸道、血液或體循環中的本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2009.11.18 AU 20099056321.一種改進經口遞送治療劑的方法，包括將所述治療劑連接至含血管生成素的載體的步驟。2.—種經口遞送體系，含有血管生成素作為載體用于將治療劑轉運進入或穿過胃腸道。3.一種融合蛋白質或綴合物，含有連接至治療劑的血管生成素。4.一種藥物組合物，含有權利要求3的融合蛋白質或綴合物和可藥用載體。5.權利要求4的藥物組合物，用于口服給藥。6.血管生成素用于連接到治療劑以改進所述治療劑的口服生物利用度的用途。7.一種預防或治療需要用治療劑治療的動物的病理病癥的方法，通過對所述動物口服給予有效量的權利要求3的融合蛋白質或綴合物或權利要求4的藥物組合物，其中所述治療劑是通?；静荒芸诜锢玫摹?.權利要求3的綴合物，其中所述治療劑是蛋白質或肽。9.權利要求I的方法，其中所述治療劑是蛋白質或肽。10.權利要求2的遞送體系，其中所述治療劑是蛋白質或肽。11.權利要求8的藥物組合物，其中所述治...

【專利技術屬性】
技術研發人員：M·麥克多諾，A·泰斯特，B·庫克斯，R·克里滕登，J·王，
申請(專利權)人：墨累古爾本合作有限公司，維多利亞農業服務控股公司，
類型：發明
國別省市：