【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種超靈敏的信號倍增系統,具體地說,涉及一種新的堿性磷酸酶標記信號放大系統。
技術介紹
酶作為靈敏的標記物已被廣泛用于各種生化檢測系統,如免疫測定(ELISA),核酸測定(PCR和基因測序)等,其酶活力大小可用在一定條件下催化某一化學反應的速度來表示,催化反應速度愈大,活力愈高,反之則活力愈低,因此,測定酶活力實際就是測定酶促反應的速度。酶促反應速度常用單位時間內、單位體積中底物的減少量或產物的增加量來表示,單獨一個酶分子可以催化大量底物(如一分子高純度酶在Imin內可催化10000-1000000分子的底物),因而通過對產物生成及底物或共反應物消耗來反應的酶活力,檢測的不是酶本身,而是大量生成的底物或消耗的產物,從而提供了高度放大的信號。目前利用工具酶結合其他分析檢測手段的信號放大技術因其具有特異、靈敏、簡便、快速等特點,已在生物醫學研究領域及臨床疾病的診療中得到廣泛應用。相較于放射免疫(RIA)技術,酶聯技術具有試劑半衰期長,對環境污染小,試驗廢物易于處理等優點,但其測定敏感性仍比不上RIA技術,在一些方面尤其在微量物質測定方面還不能替代RIA。但由于放射性物質對人體、環境有極大危害,并且其操作和處理極為不便,因此,如何提高酶聯技術的測試靈敏度,使其達到甚至超越RIA技術,一直是科研界的研究熱點。酶循環法是在原始標記酶催化基礎上附加了一個反應系統(如酶底物反應循環或酶級聯反應),利用酶的底物特異性來放大靶物質(被測物)的測定方法。傳統的酶反應只能按靶物質的量生成相應的產物量,而酶循環法則可在一定的反應時間內通過靶物質的重復反應來增加產物 ...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一種堿性磷酸酶標記信號放大系統,其特征在于該系統包括 (1)堿性磷酸酶底物,其結構通式如下式(I)所示2.根據權利要求I所述的堿性磷酸酶標記信號放大系統,其特征在于式(I)中所述的烷基,烯烴基和炔烴基為Cl-IO的烷基、C2-10的烯烴基或炔烴基;或Cl-IO的烷基、C2-10的烯烴基或炔烴基的取代基。3.根據權利要求2所述的堿性磷酸酶標記信號放大系統,其特征在于所述的Cl-IO的烷基、C2-10的烯烴基或炔烴基的取代基包括鹵代,=0,=N-CN, =N-OR, =NR, OR, NR2,SR, SO2R, SO2NR2, NRSO2R, NRCONR2, NRCOOR, NRCOR, CN, C00R, CONR2, 00CR, COR 和 NO2,其中每個R可以是H,C1-C8烷基,C2-C8雜烷,C3-C8環烷,C4-C10雜環烷,C1-C8?;?,C2-C8雜?;?,C2-C8烯,C2-C8雜鹵代烯烴,C2-C8炔,C2-C8雜炔或C5-C10雜環;其中R也可被鹵代,=0,=N-CN, =N-0R’,=NR,,OR,,NR,2,SR,,SO2R,,SO2NRj 2,NR,SO2R,,NR,C0NR,2,NR,COOR,,NR,COR,,CN, C00R,,C0NR,2, 00CR,,COR,和 NO2 取代,其中每個 R’ 可以是 H,C1-C8 烷基,C2-C8雜烷,C3-C8環烷,C4-C10雜環烷,C1-C8?;?,C2-C8雜?;?,C2-C8烯,C2-C8雜鹵代烯烴,C2-C8炔,C2-C8雜炔或C5-C10雜環取代,每個取代又可被適宜的取代基取代;如果取代基R或R'在相同或相鄰的原子上,兩者可形成5-8碳的環狀化合物,并且環上可以包含一個雜原子。4.根據權利要求I所述的堿性磷酸酶標記信號放大系統,其特征在于,所述的堿性磷酸酶標記信號放大組合物,包括了堿性磷酸酶底物,具體還包括以下幾項 (1)醇類氧化酶,能分別將堿性磷酸酶水解堿性磷酸酶底物生成的伯醇或叔醇氧化成相應的醛或酮化合物; (2)醇類脫氫酶,能將生成的醛和酮化合物轉化為醇化合物; (3)參與還原反應的共反應物——NADH,其與醇類脫氫酶共同作用能將生成的醛和酮化物轉化為醇化物; (4)用于檢測副產物H2O2的試劑。5.根據權利要求4所述的堿性磷酸酶標記信號放大...
【專利技術屬性】
技術研發人員:鄒炳德,鄒繼華,沃燕波,袁藝天,
申請(專利權)人:寧波美康生物科技股份有限公司,
類型:發明
國別省市:
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