【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物醫學，具體地，涉及一種用于評估兒童難治性癲癇的代謝物組合及其應用。
技術介紹
1、癲癇是兒童最常見的神經系統疾病之一，其特征為大量神經元異常同步放電導致反復性、發作性和短暫性的腦功能失常。兒童癲癇的發病率約為成年人的15倍，60-70％的兒童癲癇患者在經過正規治療后能夠達到控制或者癥狀緩解，但仍有20-30％的患兒在經過治療后得不到有效控制或者出現復發，發展為兒童難治性癲癇。兒童難治性癲癇嚴重危害兒童的身心健康，兒童難治性癲癇病程長，患兒的精神合并癥比一般人群高10倍，死亡率是一般人群的3倍，對家庭和社會造成了沉重的負擔。
2、相較于成人癲癇患者，兒童癲癇病因復雜，發病機制不清，治療手段欠缺，使得兒童難治性癲癇的診治面臨重大挑戰。目前臨床上會通過患兒性別、年齡及癲癇確診6個月內的臨床資料，包括母孕期及圍生期情況、既往相關病史和相關家族史、起病年齡、病因、治療前發作類型、發作持續時間、發作次數、病程中癲癇持續狀態、初始和治療后腦電圖結果、影像學結果和采用抗癲癇藥物治療后的效果來診治兒童難治性癲癇。因此，臨床在診治兒童難治性癲癇時，因診治考慮因素過多、過程復雜以及準確性低導致兒童難治性癲癇診斷和治療的延遲。此外在兒童癲癇早期，患兒的臨床表現、生物化學指標、臨床影像學和組織學特征與其它腦部疾病存在重疊性，這又增加了診斷過程的曲折性、復雜性，容易導致對兒童癲癇的診治延遲。
3、當癲癇發作時，多種代謝產物及代謝途徑發生改變，例如能量代謝、氨基酸代謝、嘌呤代謝、三羧酸循環等。近年來，對于代謝產物與兒
技術實現思路
1、有鑒于此，為了克服現有技術存在的不足，本專利技術的目的在于為本領域提供一種用于評估兒童難治性癲癇的代謝物組合及其應用，以為日后的兒童難治性癲癇這一疾病相關的臨床工作提供指導。
2、本專利技術的上述專利技術目的通過以下技術方案得以實現：
3、本專利技術的第一方面提供了代謝標志物在制備用于診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的產品中的應用。
4、進一步，所述代謝標志物為3-羥基丙戊酸、反式-2-辛烯酸、谷氨酸、c-6神經酰胺和/或精氨酸。
5、進一步，所述產品包括檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑。
6、進一步，所述試劑包括通過靶向或非靶向的核磁共振法、色譜法、質譜法和/或光譜法檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑。
7、進一步，所述樣本為血液、血清和/或血漿。
8、進一步，所述產品包括檢測試劑盒或檢測芯片。
9、進一步，所述3-羥基丙戊酸、反式-2-辛烯酸、c-6神經酰胺對應的英文名稱分別為3-hydroxyvalproic?acid(cas:58888-84-9)、trans-2-octenoic?acid(cas:1871-67-6)、c-6ceramide(cas:124753-97-5)。
10、進一步，所述代謝標志物3-羥基丙戊酸、反式-2-辛烯酸、谷氨酸、c-6神經酰胺和/或精氨酸在難治性癲癇患兒體內顯著高表達。所述代謝標志物來自兒童難治性癲癇患者的生物樣本。
11、在本專利技術的具體實施方案中，本專利技術通過實驗證明了上述代謝標志物對兒童難治性癲癇的早期診斷或預測均具有較好的診斷效能，可用于兒童難治性癲癇的篩查與早期診斷中，最大程度提升難治性癲癇患兒的預后。
12、本專利技術提供的用于診斷、篩查和/或早期預測兒童難治性癲癇的代謝標志物、檢測試劑盒、檢測芯片、檢測裝置或檢測系統在兒童難治性癲癇的診斷、篩查和/或早期預測方面具有檢測通量高、靈敏度高、特異性好等優點。
13、在一些實施方案中，所述色譜法包括但不限于：高效液色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法和/或其任意組合。
14、在一些實施方案中，所述質譜法包括但不限于：基質輔助激光解吸電離(maldi)-飛行時間(tof)質譜法、maldi-tof-tof質譜法、maldi四極桿-飛行時間(q-tof)質譜法、電噴射離子化(esi)-tof質譜法、串聯質譜法、esi-q-tof、esi-tof-tof、esi-離子阱質譜法、esi三重四極桿質譜法、esi傅立葉變換質譜法(ftms)。
15、在一些實施方案中，所述光譜法包括但不限于：折射率光譜法、紫外光譜法、近紅外光譜法和/或其任意組合。
16、在一些實施方案中，所述試劑通過如下方法中的任意一種或多種確定樣本中所述代謝標志物的含量或濃度：核磁共振譜(nmr)、質譜法、色譜法、光譜法、熒光測定、紫外光譜(uv)、熒光分析、放射化學分析、電泳、免疫雜交、免疫化學、免疫親和、近紅外光譜(近ir)、光散射分析(ls)、比濁法。
17、本專利技術的第二方面提供了一種用于診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的產品。
18、進一步，所述產品包括檢測樣本中本專利技術第一方面中所述的代謝標志物含量或濃度的試劑；
19、可選地，所述試劑包括通過靶向或非靶向的核磁共振法、色譜法、質譜法和/或光譜法檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑；
20、可選地，所述產品還包括對樣本進行預處理的預處理試劑；
21、可選地，所述產品包括檢測試劑盒或檢測芯片。
22、在一些實施方案中，所述檢測試劑盒用于檢測所述代謝標志物的濃度；所述代謝標志物的濃度通過對受試者來源的生物樣本進行處理后，通過液相色譜-質譜聯用(lc-ms/ms)方法對所述受試者來源的生物樣本中的代謝標志物進行濃度的定量測量、計算后得到相應的結果。
23、在一些實施方案中，所述檢測試劑盒包含檢測所述代謝標志物濃度的高效液相色譜檢測試劑和同位素內標；所述對受試者來源的生物樣本進行處理為使用萃取液將所述受試者來源的生物樣本中的代謝物提取出來作為待檢測樣本，待檢測樣本為生物樣本的有機溶劑分散體系，所述生物樣本為全血。
24、在一些實施方案中，所述萃取液為有機溶劑，有機溶劑包括但不限于：甲醇、乙醇、丙醇、醚或乙腈。
25、在一些實施方案中，所述同位素內標為穩定同位素標記的代謝物，示例性的同位素內標例如為氚代。
26、在一些實施方案中，液相色譜可以是高效液相色譜(hplc)、氣相色譜(gc)、超高效液相色譜(uhplc)、尺寸排阻色譜(sec)、離子交換色譜(iec)、親和色譜(ac)或反向色譜(rp-lc)中的任意一種。
27、在一些實施方案中，所述液相色譜的分離條件如下：流動相1為包含添加劑的水溶液，添加劑選自甲酸、乙酸、甲酸銨和乙酸銨中的任一種或幾種的組合；流動相2選自甲醇、乙醇、乙腈、丙二醇和異丙醇中的一種或幾種的組合；固定相選自c8或c18的硅膠填料柱，柱溫維持在25-50℃，流速設置在0.2-0.6ml/min，ph維持在3-8；所述質譜的檢測條件包括：采用數據依賴性采集模本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.代謝標志物在制備用于診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的產品中的應用，其特征在于，所述代謝標志物為3-羥基丙戊酸、反式-2-辛烯酸、谷氨酸、C-6神經酰胺和/或精氨酸。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述產品包括檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述試劑包括通過靶向或非靶向的核磁共振法、色譜法、質譜法和/或光譜法檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述樣本為血液、血清和/或血漿。
5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述產品包括檢測試劑盒或檢測芯片。
6.一種用于診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的產品，其特征在于，所述產品包括檢測樣本中權利要求1中所述的代謝標志物含量或濃度的試劑；
7.權利要求1中所述的代謝標志物在構建兒童難治性癲癇預警模型中的應用，其特征在于，所述兒童難治性癲癇預警模型以樣本中所述代謝標志物的含量值或濃度值作為輸入變量。
8.一種基于代謝組學數據的兒童難治性
9.一種利用代謝標志物診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的系統，其特征在于，所述代謝標志物為權利要求1中所述的代謝標志物，所述系統包括：
10.權利要求1中所述的代謝標志物在構建診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的計算模型中的應用。
...【技術特征摘要】
1.代謝標志物在制備用于診斷和/或早期預測兒童難治性癲癇的產品中的應用，其特征在于，所述代謝標志物為3-羥基丙戊酸、反式-2-辛烯酸、谷氨酸、c-6神經酰胺和/或精氨酸。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述產品包括檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述試劑包括通過靶向或非靶向的核磁共振法、色譜法、質譜法和/或光譜法檢測樣本中所述代謝標志物含量或濃度的試劑。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述樣本為血液、血清和/或血漿。
5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述產品包括檢測試劑盒或檢測芯片。
6.一種用于診斷...
【專利技術屬性】
技術研發人員：徐健，孔爍，彭碧文，陳宇，
申請(專利權)人：濰坊市婦幼保健院濰坊市婦幼保健計劃生育服務中心，濰坊市第七人民醫院，
類型：發明
國別省市：
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