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    一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法技術

    技術編號:44365733 閱讀:2 留言:0更新日期:2025-02-25 09:45
    本發明專利技術提供了一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,包括向96孔板(已包被NF1抗體)內加入100μL標準品或樣本,封膜后,37度搖晃孵育2小時;300μL洗板液洗板3次;每孔內加入100μL生物素標記的二抗,封膜后37度搖晃孵育1小時;300μL洗板液洗板3次;向每孔中加入50μL顯色液,室溫搖晃混勻20min;向每孔內加入50μL終止液,室溫搖晃混勻;30min內讀板(Bio?Rad),當肺泡灌洗液中NF1蛋白的檢測值為0.62ng/mL(即cut?off值)以下時,可認為ARDS患者死亡風險低,而在0.62ng/mL以上時,可認為ARDS患者為危重患者,死亡風險較高。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及生物醫藥,特別涉及一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法


    技術介紹

    1、急性呼吸窘迫綜合征(ards)是由肺內原因和/或肺外原因引起的,以頑固性低氧血癥為顯著特征的臨床綜合征,因高病死率而倍受關注。及時準確評價ards患者的狀態、診療前后差異、預后進展,從而盡早發現和識別高危患者,對降低患者死亡風險至關重要。急性病理生理和慢性健康(acute?physiology?and?chronic?health?evaluation?ii,apacheii)評分可用于ards預后評價,其中包括急性生理評分、年齡評分及慢性健康評分。apacheii評分的缺點是涉及評估項目較多,耗時繁瑣,且具有一定的主觀性。

    2、生物標志物則是一種評價ards預后的新興手段。目前已經報到了若干血漿內的生物標志物,例如:降鈣素原、srage、ang-2、vwf、sp-d、tnfr-1、il-6、il-8等等,但是血漿中標志物往往不具有肺部病變特異性。同時,由于ards患者需要通過氣管插管機械通氣,在治療過程中,纖支鏡檢查是評估呼吸道及肺部病變的常規檢查,檢查中留取的肺泡灌洗液標本可以行微生物培養、細胞染色等檢查。肺泡灌洗液來源于肺部,更能準確地反映肺部病變的特點,在評估患者肺部病變時優于血液標本。但目前,針對肺泡灌洗液中的生物標志物在ards預后評估中的作用相關研究數量遠低于針對血漿標志物的相關研究。

    3、nf1(uniprot中編號為po00712),nf1表達減少導致癌癥對egfr抑制產生抵抗egfr受體(egfr)的激活突變與egfr酪氨酸激酶抑制劑(tki)的臨床反應性相關,如埃洛替尼和吉非替尼。然而,耐藥性最終出現,通常是由于第二個egfr突變,最常見的是t790m。通過患者檢測評估,發現肺泡灌洗液中nf1的表達變化可以用于評估急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征預后效果。


    技術實現思路

    1、本專利技術的主要目的是提供一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,實現了預測急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果。本專利技術對于急性呼吸窘迫綜合征早期診斷、干預治療以及預后監測提供了重要的檢測手段。

    2、為實現上述目的,本專利技術提出了一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,所述急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法包括:

    3、向96孔板(已包被nf1抗體)內加入100μl標準品或樣本,封膜后,37度搖晃孵育2小時;

    4、300μl洗板液洗板3次;

    5、每孔內加入100μl生物素標記的二抗,封膜后37度搖晃孵育1小時;

    6、300μl洗板液洗板3次;

    7、向每孔中加入50μl顯色液,室溫搖晃混勻20min;

    8、向每孔內加入50μl終止液,室溫搖晃混勻;

    9、30min內讀板(bio-rad),當肺泡灌洗液中nf1蛋白的檢測值為0.62ng/ml(即cut-off值)以下時,可認為ards患者死亡風險低,而在0.62ng/ml以上時,可認為ards患者為危重患者,死亡風險較高。

    10、進一步地,所述樣本中的檢測方法包括免疫方法、熒光方法、流式熒光法、膠乳比濁法、生化法、酶法、雜交法、氣質聯用法、液質聯用法、層析法、化學發光方法、磁電法、或光電轉換方法。

    11、進一步地,所述試劑為能夠用于檢測蛋白標志物nf1表達水平的試劑,包括試劑盒、或試紙、或芯片。

    12、本專利技術提供了一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法在實驗中發現,ards患者的預后與其肺泡灌洗液中nf1蛋白的表達水平存在顯著性區別,ards危重患者(容易在28天內死亡)肺泡灌洗液中nf1蛋白表達水平遠高于非危重患者。根據該發現,本專利技術的試劑可快速對ards患者預后進行評估,進而識別其中的危重患者。

    本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,其特征在于,所述急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法包括:

    2.根據權利要求1所述的急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,其特征在于,所述樣本中的檢測方法包括免疫方法、熒光方法、流式熒光法、膠乳比濁法、生化法、酶法、雜交法、氣質聯用法、液質聯用法、層析法、化學發光方法、磁電法、或光電轉換方法。

    3.根據權利要求1所述的急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,其特征在于,所述試劑為能夠用于檢測蛋白標志物NF1表達水平的試劑,包括試劑盒、或試紙、或芯片。

    【技術特征摘要】

    1.一種急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,其特征在于,所述急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法包括:

    2.根據權利要求1所述的急性呼吸窘迫綜合征治療預后效果的試劑預測方法,其特征在于,所述樣本中的檢測方法包括免疫方法、熒光方法、流式熒光法、膠乳比...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:張勇
    申請(專利權)人:廣州源古紀科技有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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