本申請公開了一種檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，屬于液相色譜分析技術領域。該方法包括：將供試品溶液和對照溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按自身對照法以峰面積計算雜質含量。該方法解決了現有技術中某種雜質出峰晚或者無法檢出的問題，同時響應值高，分離度滿足要求，填補了拉考沙胺干糖漿有關物質檢測的空白，且專屬性強，靈敏度高，能夠滿足該物質的純度檢測以及有關物質的定量檢測要求。
【技術實現步驟摘要】
本申請涉及一種檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，屬于液相色譜分析。
技術介紹
1、拉考沙胺中存在的例如ep雜質a、ep芐胺、eplkxa-1、ep雜質e、eplkxa-zz-f、ep雜質b、eplkxa-zz-h、ep雜質c、ep雜質g、ep雜質h、ep雜質i等直接影響產品的質量以及藥效。
2、目前拉考沙胺有關物質的檢測方法，只能檢測幾種雜質，雜質檢測不全面，且色譜峰峰型欠佳。此外，目前ep10.6僅提供了拉考沙胺片劑有關物質檢測方法，使用該方法進行干糖漿劑型的有關物質檢測并不完全適用。中國專利202310538220.9公開了一種分離檢測拉考沙胺中間體有關物質的方法，該方法使用c18色譜柱，分析時間長，且長時間使用或不當清洗可能導致柱子污染，影響分離效果。此外，該專利為拉考沙胺中間體的檢測方法，由于拉考沙胺中間體以及拉考沙胺干糖漿雜質種類以及分子極性不同，其方法無法適用拉考沙胺干糖漿有關物質的檢測。
技術實現思路
1、根據本申請的一個方面，提供了一種檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，該方法解決了現有技術中某種雜質出峰晚或者無法檢出的問題，同時響應值高，分離度滿足要求，填補了拉考沙胺干糖漿有關物質檢測的空白，且專屬性強，靈敏度高，能夠滿足該物質的純度檢測以及有關物質的定量檢測要求。
2、所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，包括：將供試品溶液和對照溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按自身對照法以峰面積計算雜質含量。
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p>3、可選地，所述有關物質包括：lkxa對映異構體、芐胺、lkxa-0、l?kxa-1、lkxa-zz-e、lkxa-zz-f、lkxa-zz-g、lkxa-zz-h、lkxa-zz-i、lkxa-zz-j、lkxa-zz-k、lkxa-zz-l、lkxa-zz-m、lkxa-zz-o；4、其中，lkxa對映異構體的化學名稱為(2s)-2-乙酰氨基-n-芐基-3-甲氧基丙酰胺，結構如下：
5、
6、lkxa-0的結構如下：
7、
8、lkxa-1的化學名稱為(2r)-2-氨基-n-芐基-3-甲氧基丙酰胺，結構如下：
9、
10、lkxa-zz-e的化學名稱為(2r)-2-氨基-n-芐基-3-羥基丙酰胺，結構如下：
11、
12、lkxa-zz-f的化學名稱為(2r)-2-乙酰氨基-n-芐基-3-羥基丙酰胺，結構如下：
13、
14、lkxa-zz-g的化學名稱為(r)-2-乙酰胺基-3-(芐胺基)-3-乙酸氧代丙酯，結構如下：
15、
16、lkxa-zz-h的化學名稱為2-乙酰氨基-n-芐基-2-丙烯酰胺，結構如下：
17、
18、lkxa-zz-i的結構如下：
19、
20、lkxa-zz-j的化學名稱為(r)-3-甲氧基-2-(n-甲基乙酰氨基)-n-芐基丙酰胺，結構如下：
21、
22、lkxa-zz-k的結構如下：
23、
24、lkxa-zz-l的結構如下：
25、
26、lkxa-zz-m的結構如下：
27、
28、lkxa-zz-o的化學名稱為苯甲醛，結構如下：
29、
30、可選地，流動相a為甲酸-乙腈的混合水溶液；
31、流動相b為甲酸-乙腈的混合水溶液；
32、所述流動相a中甲酸和乙腈的總體積比為10-15％；
33、所述流動相b中甲酸和乙腈的總體積比為85-95％。
34、優選地，所述流動相a中甲酸和乙腈的總體積比為12％。
35、優選地，所述流動相b中甲酸和乙腈的總體積比為90％。
36、可選地，所述流動相a中甲酸和乙腈的體積比為0.1：(95-105)；優選地，所述流動相a中甲酸和乙腈的體積比為0.1:100。
37、可選地，所述流動相b中甲酸和乙腈的體積比為0.1：(850-950)；優選地，所述流動相b中甲酸和乙腈的體積比為0.1:900。
38、可選地，供試品溶液和對照溶液的溶劑為甲醇的水溶液。
39、可選地，甲醇的水溶液中，甲醇和水的體積比為(10-20)：(90-80)；優選地，甲醇的水溶液中，甲醇和水的體積比為15：85。
40、可選地，采用梯度洗脫；
41、洗脫梯度如下：
42、0min，流動相a?95-100vol％，流動相b?5-0vol％；
43、6min，流動相a?95-100vol％，流動相b?5-0vol％；
44、25min，流動相a?65-75vol％，流動相b?35-25vol％；
45、30min，流動相a?5-0vol％，流動相b?95-100vol％；
46、35min，流動相a?95-100vol％，流動相b?5-0vol％；
47、45min，流動相a?95-100vol％，流動相b?5-0vol％。
48、優選地，洗脫梯度如下：
49、0min，流動相a?100vol％，流動相b?0vol％；
50、6min，流動相a?100vol％，流動相b?0vol％；
51、25min，流動相a?70vol％，流動相b?30vol％；
52、30min，流動相a?0vol％，流動相b?100vol％；
53、35min，流動相a?100vol％，流動相b?0vol％；
54、45min，流動相a?100vol％，流動相b?0vol％。
55、可選地，色譜柱的填充劑為辛烷基硅烷鍵合硅膠。
56、可選地，色譜柱的規格為150mm×4.6mm，5μm。
57、可選地，柱溫為30-40℃；優選地，柱溫為35℃。
58、可選地，柱溫獨立地選自30℃、35℃、40℃中任一值或上述任意二者之間的范圍值。
59、可選地，流動相流速為1.2-1.6ml/min；優選地，流動相流速為1.4ml/min。
60、可選地，流動相流速獨立地選自1.2ml/min、1.4ml/min、1.5ml/min、1.6ml/min中任一值或上述任意二者之間的范圍值。
61、可選地，檢測器為uv檢測器。
62、可選地，檢測波長為200-230nm；優選地，檢測波長為215nm。
63、可選地，進樣量為5-10μl；優選地，進樣量為8μl。
64、雜質的計算方法如下：
65、
66、式中：a雜質為供試品溶液中單個雜質的峰面積
67、a對照為對照溶液中主峰本文檔來自技高網
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【技術保護點】
1.一種檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，包括：將供試品溶液和對照溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按自身對照法以峰面積計算雜質含量；
2.根據權利要求1所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，供試品溶液和對照溶液的溶劑為甲醇的水溶液。
3.根據權利要求2所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，甲醇的水溶液中，甲醇和水的體積比為(10-20)：(90-80)。
4.根據權利要求1-3任一項所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，采用梯度洗脫；
5.根據權利要求4所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，流動相A為甲酸-乙腈的混合水溶液；
6.根據權利要求5所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，所述流動相A中甲酸和乙腈的體積比為0.1：(95-105)。
7.根據權利要求5所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，所述流動相B中甲酸和乙腈的體積比為0.1：(850-950)。
8.根據權利要求1所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，色譜柱的填充劑為辛烷基硅烷鍵合硅膠。
9.根據權利要求1所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，流動相流速為1.2-1.6ml/min。
10.根據權利要求1所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，檢測波長為200-230nm；
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【技術特征摘要】
1.一種檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，包括：將供試品溶液和對照溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按自身對照法以峰面積計算雜質含量；
2.根據權利要求1所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，供試品溶液和對照溶液的溶劑為甲醇的水溶液。
3.根據權利要求2所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，甲醇的水溶液中，甲醇和水的體積比為(10-20)：(90-80)。
4.根據權利要求1-3任一項所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，采用梯度洗脫；
5.根據權利要求4所述檢測拉考沙胺干糖漿有關物質的反相液相色譜方法，其特征在于，流動相a為甲酸-乙腈的混合水溶液；<...
【專利技術屬性】
技術研發人員：李冠南，周子碩，仲達，馬莉，趙琳琳，史權杰，王秀娥，
申請(專利權)人：海南衛康制藥潛山有限公司，
類型：發明
國別省市：
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