本發(fā)明專利技術(shù)涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種改良的硫酸銨梯度法制備脂質(zhì)體的方法，在制備空白脂質(zhì)體溶液后主動載藥的方法為：在空白脂質(zhì)體溶液中加入ｐＨ調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水，再加入藥物或藥物水溶液，進行主動載藥。本發(fā)明專利技術(shù)制備方法無需繁瑣耗時的工藝步驟或昂貴的特殊設(shè)備，可簡便實現(xiàn)主動載藥，大大簡化了生產(chǎn)工藝，提高了生產(chǎn)效率和重現(xiàn)性，同時大幅降低了生產(chǎn)成本。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種基于硫酸銨梯度法制備脂質(zhì)體的改良的制備方法。
技術(shù)介紹
脂質(zhì)體是藥物制劑中常用劑型之一，目前在制備脂質(zhì)體的過程中載藥方法主要分 為被動載藥法和主動載藥法兩大類。傳統(tǒng)的脂質(zhì)體被動載藥法包括薄膜分散法、逆相蒸發(fā) 法、注入法等。近年來，由于主動載藥方法的發(fā)展，大大改善了被動載藥包封率不高、包封條 件不易掌握、包封率差異較大等缺點。主動載藥法一般包括PH梯度法和硫酸銨梯度法，兩 者制備的脂質(zhì)體對兩親弱堿性藥物都有較高的包封率，硫酸銨梯度法尤其適用于兩親弱堿 性藥物中的蒽醌類藥物如米托蒽醌等。 硫酸銨梯度法原理如下采用硫酸銨水溶液作為水相，輔以磷脂等材料先行制備 空白脂質(zhì)體，此脂質(zhì)體雙分子膜內(nèi)存在有硫酸銨，硫酸銨分子發(fā)生解離形成銨離子(NH4+) 并可進一步解離成為氨分子(NH3)和氫離子(H+)。由于朋3跨膜速率和滲透系數(shù)遠遠大于 S042—，所以只要設(shè)法去除脂質(zhì)體外水相中的硫酸銨，便可形成脂質(zhì)體內(nèi)外水相的硫酸銨濃 度梯度，以此濃度梯度為驅(qū)動力，NH3分子可以離開脂質(zhì)體內(nèi)水相擴散到脂質(zhì)體外水相中。 同時，隨著NH3分子的向外擴散，脂質(zhì)體的內(nèi)水相中開始積累相應(yīng)多量的H+，進而在脂質(zhì)體 內(nèi)外建立起一個pH梯度。根據(jù)膜內(nèi)外離子平衡原理，兩個梯度的存在促使存在于外水相的 有機弱堿性藥物優(yōu)先逆梯度載入親脂性的脂質(zhì)體。相對于普通的pH梯度法和被動載藥法， 硫酸銨梯度法可制備出包封率更高的弱堿性藥物如蒽環(huán)類藥物的脂質(zhì)體。 形成脂質(zhì)體磷脂膜內(nèi)外硫酸銨梯度是實現(xiàn)脂質(zhì)體載藥的關(guān)鍵過程。傳統(tǒng)的硫酸銨 梯度法主要通過凝膠色譜法、透析法或超濾法去除空白脂質(zhì)體外水相的硫酸銨，以此構(gòu)建 磷脂膜內(nèi)外的硫酸銨梯度。這些方法處理過程繁瑣費時，而且存在脂質(zhì)體在長時間操作過 程中滲漏、機械力作用造成脂質(zhì)體粒子聚集和膜融合、小粒徑脂質(zhì)體被濾除、部分脂質(zhì)體被 凝膠吸附、操作終點(脂質(zhì)體乳光消失等)判斷偏差導(dǎo)致操作重現(xiàn)性不佳、需要價格昂貴的 特殊生產(chǎn)設(shè)備等問題。因此，如何簡化現(xiàn)有硫酸銨梯度法工藝、降低生產(chǎn)成本同時保留其高 包封率的優(yōu)點變得至關(guān)重要。研究一種簡便和有效地構(gòu)建硫酸銨梯度及PH梯度的方法以 實現(xiàn)空白脂質(zhì)體的有效載藥是本專利技術(shù)的目的。本專利技術(shù)通過對傳統(tǒng)硫酸銨梯度法的改良實現(xiàn) 了載藥脂質(zhì)體的制備，獲得了性能優(yōu)良的鹽酸米托蒽醌脂質(zhì)體。 國內(nèi)關(guān)于米托蒽醌或鹽酸米托蒽醌脂質(zhì)體的專利(公開號CN 1602844)采用了 主動載藥方法中的pH梯度法載藥，pH梯度法本身在載藥能力和防止藥物滲漏上相對于硫 酸銨梯度法有明顯不足。另一專利(公開號CN 1915220A)采用了被動方法載藥，藥脂比 相對于硫酸銨梯度法明顯偏低，300nm的脂質(zhì)體粒徑亦偏大。以上兩專利均以薄膜分散法制 備空白脂質(zhì)體，分別采用氯仿和乙酸乙酯作為溶劑，存在溶劑的安全性問題，在工業(yè)化生產(chǎn) 的重現(xiàn)性上也存在明顯缺陷。還有專利(公開號CN 101209243A)采用了主動載藥法中的 硫酸銨梯度法載藥，該專利通過傳統(tǒng)的超濾法構(gòu)建磷脂膜內(nèi)外的硫酸銨梯度，需要昂貴的超濾設(shè)備，同時存在前述多種缺點。采用心磷脂脂質(zhì)體來包裹米托蒽醌的專利(公開號CN1469735)系根據(jù)米托蒽醌與心磷脂的相互作用特性來制備米托蒽醌脂質(zhì)體組合物，但心磷 脂自然界來源極少，合成工藝復(fù)雜，成本明顯偏高，實施難度較大。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)公開了一種基于硫酸銨梯度法的改良的、簡便的、適合工業(yè)化生產(chǎn)的制備 脂質(zhì)體的方法。 本專利技術(shù)的主要特點在于改良了傳統(tǒng)的硫酸銨梯度構(gòu)建方法，采用pH調(diào)節(jié)法或滲 透壓調(diào)節(jié)法代替凝膠色譜法、透析法、超濾法構(gòu)建硫酸銨梯度，非常簡便地實現(xiàn)主動載藥， 特別是采用PH調(diào)節(jié)法調(diào)節(jié)外水相pH值，能將主動載藥法理論中pH梯度法和硫酸銨梯度法 兩種載藥機理巧妙結(jié)合，相對于滲透壓調(diào)節(jié)法，能進一步提高磷脂膜內(nèi)外的pH梯度，達到 更高的包封率。 —般的硫酸銨梯度法制備脂質(zhì)體的方法包括以磷脂、膽固醇等為脂質(zhì)材料，以硫 酸銨水溶液為水相，制備空白脂質(zhì)體溶液，主動載藥，過濾除菌即得。本專利技術(shù)中主動載藥的 方法為在空白脂質(zhì)體溶液中加入pH調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水，再加 入藥物或藥物水溶液，進行主動載藥。pH調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水任選 一種均可。 制備空白脂質(zhì)體可以按常規(guī)方法制備，如注入法、逆相蒸發(fā)法、薄膜分散法、復(fù)乳 法，本專利技術(shù)優(yōu)選注入法。 推測本專利技術(shù)的原理在空白脂質(zhì)體體系中加入pH調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水會導(dǎo)致脂質(zhì)體外水相的稀釋和外水相硫酸銨濃度的降低，由于脂質(zhì)體內(nèi)水相硫酸銨濃度并未變化，磷脂膜內(nèi)外便產(chǎn)生一內(nèi)高外低的硫酸銨梯度，該梯度導(dǎo)致氨分子向外擴散進而促進另一梯度即pH梯度的形成，這兩個梯度可為主動載藥提供動力。pH調(diào)節(jié)劑在構(gòu)建上述兩梯度的同時，使外水相pH值增加，進一步加大了磷脂膜內(nèi)外的pH梯度，增加了主動載藥的動力，所以相對于單純調(diào)整滲透壓能進一步提高脂質(zhì)體包封率。 本專利技術(shù)方法相對于凝膠色譜法，不會大量稀釋脂質(zhì)體而降低最終載藥能力，無需繁瑣的預(yù)處理過程，對脂質(zhì)體粒徑無要求，不會出現(xiàn)小粒徑脂質(zhì)體體系無法去除外水相硫酸銨的現(xiàn)象，另外，也不存在凝膠吸附導(dǎo)致的脂質(zhì)體損失和脂質(zhì)體乳光判斷偏差導(dǎo)致的操作重現(xiàn)性不佳等問題。傳統(tǒng)的硫酸銨梯度法采用超濾和透析工藝需要數(shù)小時甚至更長時間來去除脂質(zhì)體外水相的硫酸銨，進而構(gòu)建硫酸銨梯度，而且樣品體積越大，所需時間越長。本專利技術(shù)方法對任何體積的樣品，均能通過簡單的溶液混合瞬時構(gòu)建硫酸銨梯度，節(jié)省時間同時避免了長時間操作導(dǎo)致的脂質(zhì)體滲漏，并且無需超濾和透析相關(guān)的昂貴的生產(chǎn)設(shè)備。另外，與超濾法相比，該方法不會損失小粒徑脂質(zhì)體或因機械力作用造成脂質(zhì)體粒子聚集和膜融合進而引起脂質(zhì)體破壞。綜上所述，該方法無需繁瑣耗時的工藝步驟或昂貴的特殊設(shè)備，可簡便實現(xiàn)主動載藥，大大簡化了生產(chǎn)工藝，提高了生產(chǎn)效率和重現(xiàn)性，同時大幅降低了生產(chǎn)成本。 本專利技術(shù)中pH調(diào)節(jié)劑的水溶液的加入量優(yōu)選加入后使溶液的pH范圍為4. 0-9. 0。 所述的pH調(diào)節(jié)劑優(yōu)選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉或氫氧化鈉 中的一種或多種。 滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水的加入量優(yōu)選加入后使溶液的滲透壓范圍為 50_1000m0sm/L。 滲透壓調(diào)節(jié)劑優(yōu)選自氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、磷酸鹽緩沖劑中的一種或多種。 pH調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水加入后脂質(zhì)體溶液體積優(yōu)選為原 體積的1. 1-4. 0倍。 本專利技術(shù)的制備方法也適于將脂質(zhì)體制成凍干制劑，上述制備方法在過濾除菌后冷 凍干燥，制得脂質(zhì)體凍干制劑。 本專利技術(shù)的制備方法尤其適用于兩親弱堿性藥物或其鹽酸鹽。 以鹽酸米托蒽醌為例，本專利技術(shù)制備方法制備的鹽酸米托蒽醌脂質(zhì)體包封率達98% 以上，同其他文獻或?qū)＠容^，超過了他人采用被動載藥法或pH梯度法制得的脂質(zhì)體，達 到了目前為止通過傳統(tǒng)硫酸銨梯度法能達到的最高水平。該方法亦可應(yīng)用于其它兩親弱堿 性藥物或其鹽酸鹽脂質(zhì)體的制備，如伊立替康、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星，特別是蒽環(huán)類藥物， 如米托蒽醌、多柔比星、表柔比星、柔紅霉素、吡柔比星、依達比星及其鹽酸鹽，有著廣泛的 應(yīng)用前景。 本專利技術(shù)制備中，如在膜材中另外添加PEG修飾脂質(zhì)，可制備長循環(huán)脂質(zhì)體，達到腫 瘤靶向和本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種采用硫酸銨梯度法制備脂質(zhì)體藥物的方法，包括：以磷脂、膽固醇等為脂質(zhì)材料，以硫酸銨水溶液為水相，制備空白脂質(zhì)體溶液，主動載藥，過濾除菌即得，其特征是：主動載藥的方法為在空白脂質(zhì)體溶液中加入ｐＨ調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水，再加入藥物或藥物水溶液，進行主動載藥。
【技術(shù)特征摘要】
一種采用硫酸銨梯度法制備脂質(zhì)體藥物的方法，包括以磷脂、膽固醇等為脂質(zhì)材料，以硫酸銨水溶液為水相，制備空白脂質(zhì)體溶液，主動載藥，過濾除菌即得，其特征是主動載藥的方法為在空白脂質(zhì)體溶液中加入pH調(diào)節(jié)劑的水溶液、滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水，再加入藥物或藥物水溶液，進行主動載藥。2. 權(quán)利要求1的方法，其中pH調(diào)節(jié)劑的水溶液的加入量為使溶液的pH范圍為 4. 0-9. 0。3. 權(quán)利要求1的方法，其中pH調(diào)節(jié)劑選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉 或氫氧化鈉中的一種或多種。4. 權(quán)利要求1的方法，其中滲透壓調(diào)節(jié)劑的水溶液或水的加入量為使...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：平其能，呂文莉，石勇平，莊婕，
申請(專利權(quán))人：中國藥科大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：84[中國|南京]
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