一種蒼黃擬無枝酸菌GB5-8及其在防治瓜列當中的應用制造技術

本發明專利技術提供了一種蒼黃擬無枝酸菌GB5

【技術實現步驟摘要】
一種蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8及其在防治瓜列當中的應用


[0001]本專利技術涉及應用農業微生物與生物防治
，具體涉及蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8及其在防治瓜列當生長中的應用。

技術介紹

[0002]瓜列當(Orabanche aegyptaica)是全寄生性高等植物，廣泛分布在地中海地區、亞洲西部和歐洲東部，對當地的農作物生產造成巨大的影響，被認為是世界范圍內危害最嚴重的寄生性雜草。由于瓜列當根寄生的特性，它對寄主的危害主要發生在出苗之前的地下生長時期，因此常見的人力拔除(傷害寄主根系)和農藥等除草方式幾乎不起作用，造成無法有效防除而嚴重影響農業生產。
[0003]近幾年利用微生物防治瓜列當的方法越來越受到重視，也是目前公認的成本低、效果好、較安全的防治瓜列當的方法。但不同微生物菌種對瓜列當生長的抑制能力有較大的差異，篩選優良的微生物菌種是研究生物防治瓜列當生長的重要步驟。目前報道的用于防治瓜列當的菌株種類較少，主要包括鐮刀菌、鏈格孢菌、腐霉菌等。因此，篩選有效抑制瓜列當生長能力的新菌株具有十分重要的意義。

技術實現思路

[0004]為了解決以上技術問題，本專利技術的目的在于提供蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8及其在防治瓜列當生長中的應用，蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsis lurida)GB5
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8，其保藏編號為GDMCC No：62475，該菌株的發酵液能夠顯著抑制瓜列當種子的萌發，為防治瓜列當提供了一個新的路徑。
[0005]本專利技術所采用的技術方案如下：
[0006]根據本申請的一個方面，提供了一種蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsis lurida)GB5
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8，其保藏編號為GDMCC No：62475。
[0007]具體的，該菌株GB5
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8的生物保藏信息：
[0008]菌株GB5
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8已保藏于布達佩斯條約微生物國際保藏單位：廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC)。地址：中國廣州市先烈中路100號，廣東省微生物所，郵編：510070，保藏日期為2022年05月17日，保藏號為GDMCC No：62475，分類學名稱為Amycolatopsis lurida。
[0009]根據本申請的另一個方面，還提供了所述的蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsis lurida)GB5
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8在防治瓜列當中的應用。
[0010]在本申請的具體實施方案中，提供了所述的蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsis lurida)GB5
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8在抑制瓜列當種子萌發中的應用。
[0011]在本申請的具體實施方案中，使用蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8的發酵液進行抑制瓜列當種子萌發。
[0012]在本申請的優選實施方案中，所述蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8的發酵液的獲得方法包括以下步驟：將蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8在培養基上進行培養，得到蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8的
發酵液。
[0013]優選的，所述培養的條件為：溫度25～30℃，時間3～10d。
[0014]優選的，所述培養基包含七水合硫酸亞鐵0.005～0.015g/L，七水合硫酸鎂0.4～0.6g/L，硝酸鉀0.5～1.5g/L，磷酸氫二鉀0.4～0.6g/L，氯化鈉0.4～0.6g/L，淀粉15～25g/L。
[0015]優選的，所述蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8的發酵液的濃度為8
×
105～4
×
108CFU/mL。
[0016]具體的，菌株GB5
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8發酵液的獲得方法包括以下步驟：挑取菌落接種于高氏一號固體培養基平板上，26℃溫度下培養24h后轉接于高氏一號液體培養基中，置于搖床上培養5d(26℃，180r/min)，采用分光光度計法計算菌懸液濃度，使用滅菌水將菌懸液濃度稀釋為4
×
108CFU/mL。將菌懸液分裝于離心管中，8000r.min
?1，離心10min，發酵液上清即為發酵液原液。
[0017]高氏一號固體培養基的配方為：七水合硫酸亞鐵0.01g，七水合硫酸鎂0.5g，硝酸鉀1g，磷酸氫二鉀0.5g，氯化鈉0.5g，淀粉20g，瓊脂20g，水1000mL。
[0018]高氏一號液體培養基的配方為：七水合硫酸亞鐵0.01g，七水合硫酸鎂0.5g，硝酸鉀1g，磷酸氫二鉀0.5g，氯化鈉0.5g，淀粉20g，水1000mL。
[0019]本專利技術的有益效果包括但不限于：
[0020](1)本專利技術提供了一種新的蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsis lurida)GB5
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8，該菌株GB5
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8能夠很好地抑制瓜列當生長，這次首次報道蒼黃擬無枝酸菌防治瓜列當的應用，豐富了防治瓜列當生長的菌株種類。
[0021](2)本專利技術提供的蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsis lurida)GB5
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8在防治瓜列當中的應用，利用分離出的菌種發酵液及發酵稀釋液對瓜列當種子萌發的抑制率高達100％，使用菌株GB5
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8的發酵液處理的瓜列當出土數量為0，且對寄生的番茄植株生長有明顯的促進作用，對于瓜列當生物防治具有廣泛的應用價值。
附圖說明
[0022]圖1為本專利技術基于16SrDNA的基因序列構建系統發育樹；
[0023]圖2為不同處理得到的瓜列當種子，(a)是菌株GB5
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8發酵液處理瓜列當種子，(b)是清水處理瓜列當種子；
[0024]圖3為本專利技術不同處理的番茄植株鮮重；
[0025]圖4為本專利技術不同處理的瓜列當結節數量；
[0026]圖5為本專利技術不同處理的瓜列當生物量。
具體實施方式
[0027]下面結合具體實施例對本專利技術進行詳細說明，以下實施例僅為方便本領域技術人員理解本專利技術技術方案，實現或使用本專利技術所做的說明，并不以此限定本專利技術的保護范圍。
[0028]本專利技術中，如未指定，所采用原料和設備等均可從市場購得或是本領域常用的。實施例中的方法，如無特殊說明，均為本領域的常規方法。
[0029]實施例1菌株GB5
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8的的分離、篩選及鑒定
[0030]土壤樣本采集：使用小鏟子將莖基部罹病的瓜列當莖基部上層土壤輕輕刮除，將
瓜列當植株輕輕拔出，使用小刷子刷取瓜列當罹病處周圍土壤100～150g，放入塑料袋，將塑料袋放置在裝有冰袋的泡沫箱中，及時帶回實驗室保存。
[0031]稱取10g土樣加入有50mL滅菌水的離心管中，均勻振蕩后靜置10min，吸取1mL上清液，加入9mL滅菌水記得到10
?1稀釋液，依次按10倍梯度本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsislurida)GB5
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8，其特征在于，其保藏編號為GDMCCNo：62475。2.權利要求1所述的蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsislurida)GB5
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8在防治瓜列當中的應用。3.權利要求1所述的蒼黃擬無枝酸菌(Amycolatopsislurida)GB5
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8在抑制瓜列當種子萌發中的應用。4.根據權利要求3所述中的應用，其特征在于，使用蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8的發酵液進行抑制瓜列當種子萌發。5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述蒼黃擬無枝酸菌GB5
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8的發酵液的獲得方法包括以下步驟：將蒼黃擬無枝酸菌GB5...

【專利技術屬性】
技術研發人員：何偉，許建軍，羅文芳，周軍輝，陳曉剛，葉仙濤，陳雅歡，
申請(專利權)人：新疆農業科學院植物保護研究所，
類型：發明
國別省市：