用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查方法，涉及醫(yī)療檢測(cè)的技術(shù)領(lǐng)域。凝膠試劑包括以下濃度的組分：尿素7mg/ml

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查方法


[0001]本專利技術(shù)涉及醫(yī)療檢測(cè)的
，尤其涉及一種用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查方法。

技術(shù)介紹

[0002]幽門螺桿菌是一種螺旋形、微厭氧、對(duì)生長(zhǎng)條件要求十分苛刻的細(xì)菌，1983年首次從慢性活動(dòng)性胃炎患者的胃黏膜活檢組織分離成功，是目前所知能夠在人體胃部生存的唯一微生物種類。幽門螺桿菌已經(jīng)被證實(shí)可引起活動(dòng)性慢性胃炎，是胃癌和粘膜相關(guān)淋巴型淋巴瘤的危險(xiǎn)因素。
[0003]目前已知的幽門螺桿菌感染診斷方法分為侵入式診斷方法和非侵入式診斷方法，侵入式診斷方法是指使用內(nèi)視鏡采集組織進(jìn)行檢查的方法，非侵入式診斷方法是指不使用內(nèi)視鏡的方法。其中侵入性診斷方法主要有組織病理診斷法、快速尿素酶實(shí)驗(yàn)法等，快速尿素酶實(shí)驗(yàn)法是通過檢測(cè)由幽門螺桿菌大量分泌的脲酶活性以診斷患者是否感染幽門螺桿菌的方法，這一方法能夠直接確認(rèn)是否感染幽門螺桿菌，其診斷的準(zhǔn)確率高，而且診斷迅速。
[0004]目前對(duì)尿素酶的檢測(cè)方法主要有納式試劑比色法、拉曼光譜法、酚紅指示劑法、膠體金免疫層析法為基礎(chǔ)的唾液測(cè)試板、精密試紙法均可以實(shí)現(xiàn)對(duì)唾液中的尿素酶的定性分析。現(xiàn)有技術(shù)中公開了一種幽門螺桿菌檢測(cè)試劑盒，包括反應(yīng)液和指示劑試紙，反應(yīng)液包括檸檬酸
?
檸檬酸鈉緩沖液、氯化鎳和尿素，指示劑試紙可檢測(cè)pH4.5
?
7.0范圍內(nèi)的變化。
[0005]然而，現(xiàn)有技術(shù)中的幽門螺桿菌檢測(cè)試劑的檢測(cè)速度較慢，需要花費(fèi)大量的時(shí)間等待指示劑試紙的顯色反應(yīng)，難以適用于幽門螺桿菌的快速檢測(cè)。因此，為了提高對(duì)幽門螺桿菌的篩查速率，有必要開發(fā)一種用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查方法，通過篩查檢測(cè)尿素酶的活性，來獲知受試者是否感染幽門螺桿菌。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

[0006]本專利技術(shù)的目的在于提供一種用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑、試劑盒及快速篩查方法，通過對(duì)尿素酶活性進(jìn)行快速篩查，從而準(zhǔn)確獲知受試者是否感染幽門螺桿菌。
[0007]第一方面，本專利技術(shù)提供用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑，采用如下的技術(shù)方案：
[0008]凝膠試劑包括以下濃度的組分：
[0009][0010]通過采用上述技術(shù)方案，有益效果在于：凝膠形成物能夠形成凝膠整體，將尿素、指示劑等其他組分進(jìn)行混合；對(duì)尿素酶的活性進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，尿素在尿素酶的作用下，被分解為氨，緩沖液對(duì)整體的pH值進(jìn)行調(diào)節(jié)，而氨在其中能夠與指示劑反應(yīng)，出現(xiàn)顯色反應(yīng)，從而達(dá)到對(duì)尿素酶活性的檢測(cè)；抑制劑在凝膠試劑中能夠抑制非目標(biāo)蛋白的表達(dá)，從而相對(duì)提高尿素酶的表達(dá)，能夠提高指示劑對(duì)尿素酶進(jìn)行顯色檢測(cè)的速率；促進(jìn)劑能夠提高尿素酶的活性，從而提高尿素酶對(duì)尿素進(jìn)行分解的速率，有利于提高指示劑對(duì)尿素酶活性進(jìn)行檢測(cè)的速率。
[0011]可選的，所述指示劑為苯酚紅。
[0012]通過采用上述技術(shù)方案，其有益效果在于：當(dāng)尿素在尿素酶的作用下，分解為氨后，氨在凝膠試劑中顯堿性，而苯酚紅與氨接觸后，苯酚紅顯紅色，紅色為顯眼色，容易被觀測(cè)到尿素酶的陽性反應(yīng)。
[0013]可選的，所述抑制劑包括對(duì)羥基苯甲醚與Proclin300的組合物，且所述抑制劑中的溶劑為乙醇；優(yōu)選為，所述對(duì)羥基苯甲醚與所述Proclin300的濃度比為2：1。
[0014]通過采用上述技術(shù)方案，其有益效果在于：對(duì)羥基苯甲醚和Proclin300溶解在乙醇中，有利于對(duì)羥基苯甲醚和Proclin300在凝膠試劑中進(jìn)行均勻分散，同時(shí)，對(duì)羥基苯甲醚和Proclin300均可以對(duì)非目標(biāo)蛋白起到抑制活性的作用，有利于尿素酶的表達(dá)，進(jìn)一步提高對(duì)尿素酶進(jìn)行檢測(cè)的速率。
[0015]可選的，所述促進(jìn)劑包括對(duì)羥基苯甲酸、酪蛋白和殼聚糖中的至少一種。
[0016]通過采用上述技術(shù)方案，其有益效果在于：對(duì)羥基苯甲酸、酪蛋白和殼聚糖均可以對(duì)尿素酶的活性起到促進(jìn)作用，有利于尿素酶的表達(dá)，進(jìn)一步提高對(duì)尿素酶進(jìn)行檢測(cè)的速率。
[0017]可選的，所述促進(jìn)劑至少包括酪蛋白與殼聚糖的兩種組合，優(yōu)選為，所述酪蛋白與殼聚糖的濃度比為1：1。
[0018]通過采用上述技術(shù)方案，其有益效果在于：促進(jìn)劑中包括濃度比為1：1的酪蛋白與殼聚糖，對(duì)尿素酶活性的促進(jìn)作用較好，能夠較快速的對(duì)尿素酶進(jìn)行顯色反應(yīng)。
[0019]可選的，所述緩沖液調(diào)節(jié)所述凝膠試劑pH至5
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8。
[0020]通過采用上述技術(shù)方案，其有益效果在于：pH在5
?
8之間，為尿素酶的活性表達(dá)pH
[0037]本實(shí)施例1
?
5中凝膠試劑中各組分的濃度如表1所示。
[0038]表1實(shí)施例1
?
5中凝膠試劑各組分的濃度
[0039][0040][0041]實(shí)施例6
?
11
[0042]本實(shí)施例6
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11中凝膠試劑中各組分與實(shí)施例2中的凝膠試劑的不同之處在于促進(jìn)劑的組分與濃度，實(shí)施例6
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11中凝膠試劑的促進(jìn)劑的組分和濃度如表2所示。
[0043]表2實(shí)施例6
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11的凝膠試劑中的促進(jìn)劑的組分與濃度
[0044][0045]本實(shí)施例1
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11中，指示劑為苯酚紅。
[0046]一些實(shí)施例中，指示劑可以是能夠與氨發(fā)生顯色反應(yīng)的試劑。
[0047]本實(shí)施例1
?
11中，緩沖液為2
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(N
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嗎啉)乙磺酸一水物和氫氧化鈉混合后的溶液，能夠調(diào)節(jié)凝膠試劑整體pH至5
?
8。
[0048]一些實(shí)施例中，緩沖液為能夠調(diào)整凝膠試劑整體pH至5
?
8的溶液。
[0049]一些實(shí)施例中，緩沖液為配合指示劑顯色的溶液。
[0050]本實(shí)施例1
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11中，凝膠形成物為瓊脂。
[0051]一些實(shí)施例中，凝膠也可以是明膠。
[0052]本專利技術(shù)實(shí)施例還提出了一種用于尿素酶活性快速篩查的試劑盒，應(yīng)用了本實(shí)施例1
?
11中的凝膠試劑。
[0053]試劑盒包括承載玻片，承載玻片上表面的中心內(nèi)凹開設(shè)有檢測(cè)部，凝膠試劑位于檢測(cè)部中，且承載玻片位于檢測(cè)部的開口處貼合有標(biāo)簽，標(biāo)簽用于記錄受試者的身份信息，并且標(biāo)簽貼合在承載玻片上后，能夠?qū)z測(cè)部的開口處進(jìn)行密封貼合。
[0054]一些實(shí)施例中，承載玻片為塑料玻璃片，呈透明長(zhǎng)方形。
[0055]一些實(shí)施例中，標(biāo)簽使用粘膠固定貼合在承載玻片上。
[0056]本專利技術(shù)實(shí)施例還提出一種用于尿素酶活性快速篩查的快速篩查方法，應(yīng)用了上述的試劑盒，快速篩查方法包括以下步驟：
[0057]S100、取待測(cè)樣本；
[0058]S200、將待測(cè)樣本暴露于凝膠試劑中；
[0059]S300、觀察凝膠試劑變色情況；
[0060]S410、凝膠試劑變本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
1.用于尿素酶活性快速篩查的凝膠試劑，其特征在于，包括以下濃度的組分：2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凝膠試劑，其特征在于，所述指示劑為苯酚紅。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凝膠試劑，其特征在于，所述抑制劑包括對(duì)羥基苯甲醚與Proclin300的組合物，且所述抑制劑中的溶劑為乙醇。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凝膠試劑，其特征在于，所述促進(jìn)劑包括對(duì)羥基苯甲酸、酪蛋白和殼聚糖中的至少一種。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的凝膠試劑，其特征在于，所述促進(jìn)劑至少包括酪蛋白與殼聚糖的兩種組合。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凝膠試劑，其特征在于，所述緩沖液調(diào)節(jié)所述凝膠試劑pH至5
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8。7.用于尿素酶活性快速篩查的試劑盒，其特征在于，包括如權(quán)利要求1
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7...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：許奕鵬，楊曉輝，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：楊曉輝，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：