一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系及其制備方法與應用技術

本發(fā)明專利技術屬于生物醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系及其制備方法與應用。本發(fā)明專利技術中羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物具有良好的生物相容性，并且其氨基在正常生理環(huán)境下帶有一定的電正性，可用于負載包括核酸、多肽和蛋白類帶負電的藥物，實現炎癥、癌癥等疾病的治療；通過簡單易操作的靜電相互作用自組裝法，可通過簡單的一步法制備形成。并且所修飾的穩(wěn)定的氮氧有機自由基還具有優(yōu)異的順磁響應效應，可實現高效的磁響應性藥物靶向遞送，增強藥物在腫瘤部位發(fā)揮的腫瘤殺傷效果。增強藥物在腫瘤部位發(fā)揮的腫瘤殺傷效果。增強藥物在腫瘤部位發(fā)揮的腫瘤殺傷效果。

【技術實現步驟摘要】
一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系及其制備方法與應用


[0001]本專利技術屬于生物醫(yī)藥
更具體地，涉及一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系及其制備方法與應用。

技術介紹

[0002]現有技術研究發(fā)現越來越多的蛋白多肽類藥物具有抗腫瘤的效果，但是游離的蛋白多肽類藥物在環(huán)境中穩(wěn)定性較差，并且攝入機體時容易被機體中的酶等各種因素影響，導致失活，進入機體后的效果顯著降低。為了提高蛋白多肽類藥物的穩(wěn)定性及生物利用率，現有技術常將蛋白多肽類藥物負載在納米遞藥體系上對其進行保護，通過靶向因子到達病灶，釋放達到抗腫瘤的效果。如中國專利申請CN113956327A 公開了一種靶向人APC蛋白的多肽，具有毒性副作用小、特異性強的靶向效果，在制備成藥物使用時需要結合藥學上可接受的載體。可見，迫切需要提供一種可以負載蛋白藥物的納米遞送體系。

技術實現思路

[0003]本專利技術要解決的技術問題是克服現有蛋白多肽類藥物缺少載體遞送體系的缺陷和不足，提供一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系。
[0004]本專利技術的目的是提供所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系的制備方法。
[0005]本專利技術另一目的是提供所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系的應用。
[0006]本專利技術上述目的通過以下技術方案實現：
[0007]一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，所述高分子納米遞送體系為羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物，其上負載蛋白藥物。
[0008]本專利技術中羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物具有良好的生物相容性，并且其氨基在正常生理環(huán)境下帶有一定的電正性，可用于負載包括核酸、多肽和蛋白類帶負電的藥物，實現炎癥、癌癥等疾病的治療；通過簡單易操作的靜電相互作用自組裝法，可通過簡單的一步法制備形成，相較于現有多數基于有機高分子材料的納米遞送體系制備所用的納米沉淀法，通過靜電作用自組裝方法可以不引入額外的有機溶劑，避免復雜除雜過程。除了作為有效安全的生物大分子藥物遞送的載體，所修飾的穩(wěn)定的氮氧有機自由基還具有優(yōu)異的順磁響應效應，可實現高效的磁響應性藥物靶向遞送，增強藥物在腫瘤部位發(fā)揮的腫瘤殺傷效果。
[0009]進一步地，所述蛋白藥物為錳基蛋白納米藥物、胰島素、牛血清白蛋白、白細胞介素、免疫抑制劑、抗體或抗原多肽。
[0010]更進一步地，所述錳基蛋白納米藥物的制備方法具體包括以下步驟：
[0011]將血清白蛋白溶解于水中，加入錳鹽溶液，充分混勻后，調節(jié)pH值為10～11，攪拌
使納米晶體生長，所得反應混合物透析除雜(多余的前驅體和雜質)，即得。
[0012]優(yōu)選地，所述錳鹽選自氯化錳、醋酸錳、硫酸錳中的一種或多種。
[0013]優(yōu)選地，所述血清白蛋白與錳鹽中錳的質量比為(1～10)：1.1。
[0014]優(yōu)選地，所述攪拌使納米晶體生長溫度為室溫。
[0015]優(yōu)選地，所述透析的透析袋分子量為1000～5000Da，透析時間為8～24h。
[0016]氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺高分子可以與多數蛋白藥物復合形成納米藥物遞送體系，可以更好地保護蛋白藥物的穩(wěn)定性和生物活性。以生物礦化形成的二氧化錳白蛋白(錳基蛋白納米藥物)為例，該納米遞送體系可以發(fā)揮相較于單獨錳基蛋白更強的腫瘤殺傷效果，并通過磁響應靶向到病灶局部實現治療作用。
[0017]進一步地，所述羧基氮氧自由基選自3
?
羧基
?
2,2,5,5
?
四甲基吡咯烷
?1?
氧基自由基、4
?
羧基
?
2,2,6,6
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四甲基哌啶
?1?
氧基自由基、2,2,6,6
?
四甲基哌啶
?1?
氧基
?4?
氨基
?4?
羧基、7
?
氮氧自由基硬脂酸中的一種或多種。
[0018]更進一步地，所述賴氨酸基聚酯酰胺聚合物由二元羧酸二對硝基苯基酯單體與二賴氨酸二對甲苯磺酸鹽酯單體聚合得到。
[0019]另外的，本專利技術還提供了所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系的制備方法，具體包括以下步驟：
[0020]S1、將賴氨酸基聚酯酰胺聚合物與羧基氮氧自由基混合制成水溶液，加入羧基活化劑和偶聯(lián)劑，混勻反應完全，透析，干燥，得羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物；
[0021]S2、將步驟S1所得羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物與蛋白藥物混合均勻，使蛋白藥物充分負載在羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物上，即得。
[0022]進一步地，步驟S2中，所述羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物與蛋白藥物的質量比為(10～1000)：1。
[0023]更進一步地，步驟S1中，所述賴氨酸基聚酯酰胺聚合物與羧基氮氧自由基的質量比為(3～10):1。
[0024]進一步地，步驟S1中，所述羧基活化劑為1
?
(3
?
二甲氨基丙基)
?3?
乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N,N
?
二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、1
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乙基
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(3
?
二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)或O
?
苯并三氮唑
?
四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)。
[0025]更進一步地，步驟S1中，所述偶聯(lián)劑為N
?
羥基琥珀酰亞胺(NHS)、4
?
二甲胺基吡啶(DMAP)、1
?
羥基苯并三唑(HOBT)。
[0026]進一步地，步驟S1中，所述羧基活化劑和偶聯(lián)劑與羧基氮氧自由基摩爾比為(1～2)：(1～2)：1。
[0027]更進一步地，步驟S1中，所述透析的透析袋分子量為1000～5000Da。透析時間為24～36h，每隔2～4h更換一次透析袋外的水。
[0028]進一步地，步驟S1中，所述反應的溫度為20～30℃。優(yōu)選地，所述反應的時間為16～48h。
[0029]優(yōu)選地，步驟S1中，所述干燥為冷凍干燥。
[0030]另外的，本專利技術還要求保護所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0031]優(yōu)選地，所述腫瘤為黑色素瘤、乳腺癌、結直腸癌。
[0032]本專利技術具有以下有益效果：
[0033]本專利技術中羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物具有良好的生物相容性，并且其氨基在正常生理環(huán)境下帶有一定的電正性，可用于負載包括核酸、多肽和蛋白類帶負電的藥物，實現炎癥、癌癥等疾病的治療；通過簡單易操作的靜電相互作用自組裝法，可通過簡單的一步法制備形成，本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.一種負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，其特征在于，所述高分子納米遞送體系為羧基氮氧自由基修飾的賴氨酸基聚酯酰胺聚合物，其上負載蛋白藥物。2.根據權利要求1所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，其特征在于，所述蛋白藥物為錳基蛋白納米藥物、胰島素、牛血清白蛋白、白細胞介素、免疫抑制劑、抗體或抗原多肽中的一種或多種。3.根據權利要求2所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，其特征在于，所述錳基蛋白納米藥物的制備方法具體包括以下步驟：將血清白蛋白溶解于水中，加入錳鹽溶液，充分混勻后，調節(jié)pH值為10～11，攪拌使納米晶體生長，所得反應混合物透析除雜，即得。4.根據權利要求3所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，其特征在于，所述錳鹽選自氯化錳、醋酸錳、硫酸錳中的一種或多種。5.根據權利要求3所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，其特征在于，所述血清白蛋白與錳鹽中錳的質量比為(1～10)：1.1。6.根據權利要求1所述負載蛋白藥物的氮氧自由基修飾的高分子納米遞送體系，其特征在于，所述羧基氮氧自由基選自3
?
羧基
?
2,2,5,5
?
四甲基吡咯烷
?1?
氧基自由基、4
?
羧基
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...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：吳鈞，韓書彥，
申請(專利權)人：中山大學，
類型：發(fā)明
國別省市：