SOAT1蛋白靶向抑制劑及應用制造技術

本發明專利技術公開了SOAT1蛋白靶向抑制劑及應用，屬于醫藥技術領域。所述抑制劑包括包括化合物A或/和化合物B，包括化合物A或/和化合物B，所述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。本發明專利技術發現化合物A和化合物B對SOAT1蛋白高表達的Hep3B和PLC/PRF/5肝癌細胞活力的抑制作用顯著。此外，這兩個化合物還能抑制肝癌細胞遷移及克隆形成，并降低肝癌細胞中SOAT1蛋白表達。在SOAT1沉默的肝癌細胞中，兩個化合物對肝癌細胞活力的抑制作用均顯著減弱。因此，化合物A和化合物B在細胞水平上能通過抑制SOAT1蛋白表達發揮抗肝癌作用，可應用于制備預防和治療肝癌藥物中。可應用于制備預防和治療肝癌藥物中。可應用于制備預防和治療肝癌藥物中。

【技術實現步驟摘要】
SOAT1蛋白靶向抑制劑及應用


[0001]本專利技術屬于醫藥
，具體涉及SOAT1蛋白靶向抑制劑及應用。

技術介紹

[0002]肝癌是一種高發的，危害極大的疾病，全球每年新增確診病例約90萬。我國是肝癌大國，每年新發病例約40萬。肝癌的常見治療方案包括手術切除、肝移植、射頻消融、化療和靶向藥物治療等。手術或射頻消融療法適用于早期原位癌患者，然而大部分病人在疾病中晚期才被確診，因此不適合手術或射頻消融治療。中、晚期肝癌治療的原則是以化療、靶向治療等為主的綜合治療，但肝癌對于化療的敏感性并不高，目前常用靶向藥物包括侖伐替尼和索拉非尼等，但毒副作用和耐藥性的發生限制了現有靶向藥物的應用，亟需開發新型靶向藥物治療肝癌。
[0003]甾醇O
?
酰基轉移酶1(SOAT1)蛋白已被證明是肝癌特異性表達分子，肝癌組織中SOAT1蛋白的含量明顯高于正常組織，是潛在的肝癌治療新靶點。抑制SOAT1蛋白表達能有效抑制癌細胞的增殖和遷移能力，從而發揮抗肝癌作用，但目前針對該靶點的抑制劑研發尚不成熟。近年來，天然產物及其衍生物在抗腫瘤藥物的開發中發揮著越來越重要的作用。為找到可能靶向到SOAT1蛋白的苗頭化合物，本專利技術采用基于蛋白結構的虛擬篩選與體外實驗驗證相結合的研究策略，從天然產物中找到兩個有顯著抗肝癌效果的化合物，以期為新型SOAT1蛋白抑制劑的開發提供先導化合物。

技術實現思路

[0004]本專利技術的目的在于克服現有技術的缺點，提供涉及SOAT1蛋白靶向抑制劑及應用。
[0005]本專利技術的目的通過以下技術方案來實現：SOAT1蛋白靶向抑制劑，所述抑制劑包括化合物A或/和化合物B，化合物A的結構式為：
[0006][0007]化合物B的結構式為：
[0008][0009]上述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。
[0010]上述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在抑制肝癌細胞活力中的應用。
[0011]上述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在抑制肝癌細胞遷移和克隆中的應用。
[0012]進一步地，所述的肝癌細胞為Hep3B或PLC/PRF/5。
[0013]進一步地，化合物A對肝癌細胞Hep3B和PLC/PRF/5的IC
50
分別為2.633
±
0.445μM，8.605
±
0.579μM；
[0014]化合物B對肝癌細胞Hep3B和PLC/PRF/5的IC
50
分別為4.246
±
0.594μM，6.245
±
0.613μM。
[0015]本專利技術具有以下優點：本專利技術發現化合物A和化合物B對SOAT1蛋白高表達的Hep3B和PLC/PRF/5肝癌細胞活力的抑制作用顯著。此外，這兩個化合物還能抑制肝癌細胞遷移及克隆形成，并降低肝癌細胞中SOAT1蛋白表達。在SOAT1沉默的肝癌細胞中，兩個化合物對肝癌細胞活力的抑制作用均顯著減弱。因此，化合物A和化合物B在細胞水平上能通過抑制SOAT1蛋白表達發揮抗肝癌作用，可應用于制備預防和治療肝癌藥物中。
附圖說明
[0016]圖1為SOAT1三維結構及空腔及Docking box的示意圖，其中，A
?
SOAT1三維結構及空腔；B
?
Docking box展示；邊框為Docking box，框中標記為6L47結構中的CI
?
976。
[0017]圖2為化合物A和化合物B的化學結構及與SOAT1蛋白的相互作用圖，其中，A
?
化合物A的化學結構式；B
?
化合物B的化學結構式；C
?
SOAT1蛋白與化合物A的相互作用圖；D
?
SOAT1蛋白與化合物B的相互作用圖。
[0018]圖3為化合物A和化合物B對細胞遷移的影響(n＝3)，其中，化合物A對A
?
Hep3B和C
?
PLC/PRF/5細胞遷移的影響；化合物B對B
?
Hep3B和D
?
PLC/PRF/5細胞遷移的影響；左側為代表性圖片，右側為定量結果；*P<0.05與對照組相比。
[0019]圖4為化合物A和化合物B對細胞克隆形成的影響(n＝3)，A
?
化合物A和B
?
化合物B對Hep3B和C
?
PLC/PRF/5細胞克隆形成的影響；左側為代表性圖片，右側為定量結果；*P<0.05與對照組相比。
[0020]圖5為化合物A和化合物B對SOAT1蛋白水平的影響(n＝3)，A
?
化合物A及B
?
化合物B對Hep3B和PLC/PRF/5細胞SOAT1蛋白水平的影響；上側為代表性印跡，下側為定量結果；*P<0.05與對照組相比。CI
?
976為陽性對照，在Hep3B中濃度為20μM，在PLC/PRF/5中濃度為60μM。
[0021]圖6為化合物A和化合物B對細胞活力的影響(n＝3)，A
?
轉染NC或SOAT1 siRNA后PLC/PRF/5細胞中SOAT1蛋白的表；左側為代表性圖片，右側為定量結果；B
?
化合物A和化合物B對SOAT1沉默的PLC/PRF/5細胞活力的影響；*P<0.05。
具體實施方式
[0022]下面結合附圖及實施例對本專利技術做進一步的描述，本專利技術的保護范圍不局限于以下所述：
[0023]1材料和方法
[0024]1.1細胞
[0025]人肝癌細胞株Hep3B和PLC/PRF/5購于ATCC細胞庫。
[0026]1.2試劑與儀器
[0027]化合物A(貨號：STOCK1N
?
11730)，化合物B(貨號：STOCK1N
?
98880)純度≥98％)購于Interbioscreen；RPMI1640培養基(貨號：11875101)、MEM培養基(貨號：41500034)、胎牛血清(貨號：10099141C)均購于Gibco公司；SOAT1抗體(貨號：DF7778)購于Affinity；GAPDH抗體(貨號：ab181602)購于Abcam；Lipofectamine 2000轉染試劑購于ThermoFisher；SOAT1 siRNA2條SOAT1特異性siRNA均由北京擎科生物科技有限公司合成，靶序列為：CUCUUCAUGUUCUUUGGAA。酶標儀(BioRad iMark)，凝膠成像儀(Bio
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Rad Gel Doc XR+)。
[0028]1.3方法
[0029]1.3.1分子對接
[0030]從蛋白質數據庫(Protein Data Bank，PDB)中下載SOA本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.SOAT1蛋白靶向抑制劑，其特征在于，所述抑制劑包括化合物A或/和化合物B，化合物A的結構式為：化合物B的結構式為：2.如權利要求1所述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。3.如權利要求1所述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在抑制肝癌細胞活力中的應用。4.如權利要求1所述的SOAT1蛋白靶向抑制劑在抑制肝癌細胞遷移和克隆中的應用。5.根據權利要求3或4所述的應用，其特征在于，所述的肝癌細胞為Hep3B或PLC/PRF/5。6.根據...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉雨溪，張紅，李曄，劉洋，陳志永，
申請(專利權)人：陜西省中醫藥研究院，
類型：發明
國別省市：