一種桑黃多糖及其制備方法與應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了一種桑黃多糖及其制備方法與應(yīng)用，包括將桑黃子實(shí)體進(jìn)行熱水浸提法提取，得到桑黃水溶性粗多糖，對(duì)獲得的桑黃水溶性粗多糖進(jìn)行初步純化，將經(jīng)初步純化后得到的多糖組分進(jìn)行精氨酸酶活性的篩選，并對(duì)抑制效果較好的多糖組分SSP

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種桑黃多糖及其制備方法與應(yīng)用


[0001]本專利技術(shù)屬于食藥用菌多糖
，具體涉及一種桑黃多糖及其制備方法與應(yīng)用。

技術(shù)介紹

[0002]桑黃，又被稱為桑耳、桑臣、胡孫眼等，是一種珍貴的藥食兩用菌，其營(yíng)養(yǎng)豐富且具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性，而這些功效主要由桑黃所含有的活性成分在起作用。研究表明在桑黃子實(shí)體和菌絲體中發(fā)現(xiàn)多種生物活性物質(zhì)包括多糖、黃酮類和有機(jī)酸等，多糖是其研究的主要活性成分。
[0003]先前的研究證明多糖具有良好的抗腫瘤與免疫調(diào)節(jié)效果。桑黃多糖主要來(lái)源于其子實(shí)體、菌絲體和發(fā)酵液。熱水浸提法是從真菌中提取多糖最常用的方法，操作簡(jiǎn)單且成本低。
[0004]然而，桑黃多糖成分較為復(fù)雜，對(duì)其成分組成及功效仍有待進(jìn)一步研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

[0005]本部分的目的在于概述本專利技術(shù)的實(shí)施例的一些方面以及簡(jiǎn)要介紹一些較佳實(shí)施例。
[0006]作為本專利技術(shù)其中一個(gè)方面，本專利技術(shù)提供一種一種桑黃多糖的制備方法，其由以下步驟組成，
[0007](1)桑黃水溶性粗多糖的制備：將桑黃子實(shí)體粉碎后，脫脂，采用水提醇沉法提取粗多糖，得到桑黃水溶性粗多糖SSP；
[0008](2)將步驟(1)得到的桑黃水溶性粗多糖SSP加入水配制成粗多糖溶液，通過(guò)離子交換柱層析，用0.1mol/L NaCl溶液洗脫，收集洗脫液，透析，濃縮，冷凍干燥得到桑黃多糖SSP
?
1；
[0009](3)將步驟(2)得到的桑黃多糖SSP
?
1使用凝膠柱層析純化，用去離子水洗脫，濃縮，冷凍干燥，得到桑黃多糖SSP
?1?
A。
[0010]作為本專利技術(shù)所述的桑黃多糖的制備方法的一種優(yōu)選方案：步驟(1)中，所述脫脂，是將桑黃子實(shí)體粉碎后，按料液比1∶3～6g/mL加入到乙醇溶液中，混合均勻后浸泡12～24h，過(guò)濾，收集殘?jiān)瑢堅(jiān)L(fēng)干，去除乙醇，得到脫脂后的粉末。
[0011]作為本專利技術(shù)所述的桑黃多糖的制備方法的一種優(yōu)選方案：步驟(1)中，所述采用水提醇沉法提取粗多糖，是將脫脂后的桑黃子實(shí)體粉末按照料液比1∶30～50g/mL加入水，加熱提取1～3h，離心收集上清液，減壓濃縮得到多糖濃縮液，向所述多糖濃縮液中加入乙醇溶液，靜置12～24h，離心收集沉淀，將沉淀加水溶解后旋蒸除去乙醇，冷凍干燥，得到桑黃水溶性粗多糖SSP。
[0012]作為本專利技術(shù)所述的桑黃多糖的制備方法的一種優(yōu)選方案：所述乙醇溶液的體積濃度為95％；所述離心收集上清液，是8000rpm離心15min。
[0013]作為本專利技術(shù)所述的桑黃多糖的制備方法的一種優(yōu)選方案：步驟(2)中，所述粗多糖溶液濃度為10.0mg/mL；所述透析，截流分子量為10000Da，透析時(shí)間為48h；步驟(2)中，采用DEAE離子交換柱層析。
[0014]作為本專利技術(shù)所述的桑黃多糖的制備方法的一種優(yōu)選方案：步驟(3)中，所述使用凝膠柱層析純化，是將步驟(2)得到的桑黃多糖SSP
?
1加入水配制成5.0mg/mL的粗多糖溶液，使用Sephacryl S
?
300凝膠填料。
[0015]作為本專利技術(shù)所述的桑黃多糖的制備方法的一種優(yōu)選方案：步驟(3)得到的桑黃多糖SSP
?1?
A，由葡萄糖、半乳糖、巖藻糖、甘露糖、木糖、鹽酸氨基葡萄糖組成，葡萄糖、半乳糖、巖藻糖、甘露糖、木糖、鹽酸氨基葡萄糖的摩爾比為0.360∶0.305∶0.130∶0.168∶0.034∶0.004，所述桑黃多糖重均分子量為2.700
×
104Da，數(shù)均分子量為2.356
×
104Da。
[0016]作為本專利技術(shù)的另一個(gè)方面，本專利技術(shù)提供一種桑黃多糖：所述桑黃多糖由葡萄糖、半乳糖、巖藻糖、甘露糖、木糖、鹽酸氨基葡萄糖組成，葡萄糖、半乳糖、巖藻糖、甘露糖、木糖、鹽酸氨基葡萄糖的摩爾比為0.360∶0.305∶0.130∶O.168∶0.034∶0.004，所述桑黃多糖重均分子量為2.700
×
104Da，數(shù)均分子量為2.356
×
104Da。
[0017]作為本專利技術(shù)的另一個(gè)方面，本專利技術(shù)提供所述的方法得到的桑黃多糖在制備精氨酸酶抑制劑中的應(yīng)用。
[0018]作為本專利技術(shù)的另一個(gè)方面，本專利技術(shù)提供所述的方法得到的桑黃多糖在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0019]本專利技術(shù)的有益效果：本專利技術(shù)提供的制備方法獲得的桑黃水溶性均一多糖組分SSP
?1?
A分子量小、分布寬度較窄，且對(duì)精氨酸酶活性具有良好的抑制效果，在天然藥物精氨酸酶抑制劑和開(kāi)發(fā)桑黃多糖新型藥物方面提供了方向和參考依據(jù)，有良好的應(yīng)用前景。
附圖說(shuō)明
[0020]為了更清楚地說(shuō)明本專利技術(shù)實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，其中：
[0021]圖1為桑黃水溶性粗多糖SSP的離子交換柱洗脫曲線。
[0022]圖2為SSP
?
1的激光光散射圖。
[0023]圖3為桑黃水溶性多糖組分SSP
?
1的Sephacryl S
?
300HR凝膠洗脫曲線。
[0024]圖4為桑黃水溶性均一多糖組分SSP
?1?
A的分子量及純度分布圖。
[0025]圖5為SSP
?1?
A的紫外全掃描光譜圖。
[0026]圖6為為混合標(biāo)準(zhǔn)品的IC色譜圖。
[0027]圖7為SSP
?1?
A的IC色譜圖。
[0028]圖8為SSP
?1?
A的掃描電鏡圖。
[0029]圖9為SSP
?1?
A的FT
?
IR光譜圖。
[0030]圖10為桑黃水溶性均一多糖組分SSP
?1?
A濃度對(duì)精氨酸酶抑制活性的曲線關(guān)系圖。
[0031]圖11為桑黃水溶性均一多糖組分SSP
?1?
A對(duì)精氨酸酶的抑制作用曲線關(guān)系圖。
[0032]圖12為SSP
?1?
A抑制精氨酸酶的雙倒數(shù)圖。
[0033]圖13為SSP
?1?
A對(duì)精氨酸酶抑制常數(shù)的測(cè)定。
具體實(shí)施方式
[0034]為使本專利技術(shù)的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)的具體實(shí)施方式做詳細(xì)的說(shuō)明。
[0035]實(shí)施例1：
[0036]桑黃粗多糖SSP提取：
[0037](1)稱取桑黃子實(shí)體200g(本實(shí)施例以Sanghuangporus vaninii，QJF
?
3菌種為例)，粉碎，80目篩網(wǎng)過(guò)篩，用樣品4倍體積的95％乙醇浸泡過(guò)夜，過(guò)濾收集殘?jiān)匀伙L(fēng)干，稱取風(fēng)干后的藥渣粉末100g，按料液比1∶40g/mL加入去離子水置于沸水浴中提取2h，且期間間斷性攪拌，8000rpm離心15m本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

【技術(shù)特征摘要】
1.一種桑黃多糖的制備方法，其特征在于：由以下步驟組成，(1)桑黃水溶性粗多糖的制備：將桑黃子實(shí)體粉碎后，脫脂，采用水提醇沉法提取粗多糖，得到桑黃水溶性粗多糖SSP；(2)將步驟(1)得到的桑黃水溶性粗多糖SSP加入水配制成粗多糖溶液，通過(guò)離子交換柱層析，用0.1mol/L NaCl溶液洗脫，收集洗脫液，透析，濃縮，冷凍干燥得到桑黃多糖SSP
?
1；(3)將步驟(2)得到的桑黃多糖SSP
?
1使用凝膠柱層析純化，用去離子水洗脫，濃縮，冷凍干燥，得到桑黃多糖SSP
?1?
A。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑黃多糖的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述脫脂，是將桑黃子實(shí)體粉碎后，按料液比1：3～6g/mL加入到乙醇溶液中，混合均勻后浸泡12～24h，過(guò)濾，收集殘?jiān)瑢堅(jiān)L(fēng)干，去除乙醇，得到脫脂后的粉末。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的桑黃多糖的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述采用水提醇沉法提取粗多糖，是將脫脂后的桑黃子實(shí)體粉末按照料液比1：30～50g/mL加入水，加熱提取1～3h，離心收集上清液，減壓濃縮得到多糖濃縮液，向所述多糖濃縮液中加入乙醇溶液，靜置12～24h，離心收集沉淀，將沉淀加水溶解后旋蒸除去乙醇，冷凍干燥，得到桑黃水溶性粗多糖SSP。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的桑黃多糖的制備方法，其特征在于：所述乙醇溶液的體積濃度為95％；所述離心收集上清液，是8000rpm離心15min。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的桑黃多糖的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，所述粗多糖溶液濃度為1...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳曉華，張安強(qiáng)，李彥穎，林庚蘭，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：浙江千濟(jì)方醫(yī)藥科技有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：