【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種外生菌根真菌分離培養(yǎng)基及其制備方法
[0001]本專利技術(shù)涉及真菌培養(yǎng)
，具體涉及一種外生菌根真菌分離培養(yǎng)基及其制備方法。
技術(shù)介紹
[0002]外生菌根真菌是一類與宿主植物根系共生并有益于植物生長發(fā)育的高等真菌，具有較強的生態(tài)適應(yīng)性和可塑性，可以提高宿主植物的抗病性和抗逆性。外生菌根菌是真菌與高等植物的根部形成的菌根合體，宿主和菌根菌的代謝產(chǎn)物經(jīng)過哈氏網(wǎng)的網(wǎng)絡(luò)作雙向運轉(zhuǎn)。我國有外生菌根的主要樹木有櫟、松、柳、椴、楓、胡桃及樺科等；外生菌根真菌中有許多是珍貴的食用菌，如：牛肝菌、松茸(松口蘑)、松乳菇等經(jīng)常出現(xiàn)于松林及櫟林。這種具有共生共棲作用的菌根菌，具有明顯的經(jīng)濟效益和環(huán)境效益。不僅木材的產(chǎn)量提高40％，而且還能提供大量美味可口的蘑菇。
[0003]有些外生菌根真菌有藥用價值，且難分離，如有硬皮地星，花臉香蘑，小笠原須腹菌等；目前外生菌根真菌最常用的分離培養(yǎng)基為MMN培養(yǎng)基，但是對少數(shù)外生菌根真菌分離有難度，菌絲生長慢，生物量小，分離難度大。
技術(shù)實現(xiàn)思路
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本專利技術(shù)提供了一種外生菌根真菌分離培養(yǎng)基及其制備方法，制備得到的分離培養(yǎng)基能夠促進外生菌根真菌的菌絲體生長，提高了分離效率。
[0005]本專利技術(shù)的第一個目的是提供一種外生菌根真菌分離培養(yǎng)基，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：
[0006]馬鈴薯汁300
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500mL、葡萄糖10
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20g、酵母粉3
?>5g、蛋白胨3
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5g、氯化鐵0.01
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0.03g、維生素B
1 1
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2mg、氨芐青霉素50
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100μg、硫酸鏈霉1
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4mg、孟加拉紅2
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3mg、瓊脂15
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20g，余量為蒸餾水。
[0007]進一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：
[0008]馬鈴薯汁400mL、葡萄糖18g、酵母粉4g、蛋白胨4g、氯化鐵0.02g、維生素B
1 1.8mg、氨芐青霉素60μg、硫酸鏈霉2mg、孟加拉紅3mg、瓊脂18g，余量為蒸餾水。
[0009]進一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：
[0010]馬鈴薯汁300mL、葡萄糖20g、酵母粉5g、蛋白胨5g、氯化鐵0.01g、維生素B
1 2mg、氨芐青霉素50μg、硫酸鏈霉4mg、孟加拉紅2mg、瓊脂20g，余量為蒸餾水。
[0011]進一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：
[0012]馬鈴薯汁500mL、葡萄糖10g、酵母粉3g、蛋白胨3g、氯化鐵0.03g、維生素B
1 1mg、氨芐青霉素100μg、硫酸鏈霉1mg、孟加拉紅2.5mg、瓊脂15g，余量為蒸餾水。
[0013]進一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：
[0014]馬鈴薯汁450mL、葡萄糖15g、酵母粉3.5g、蛋白胨3.5g、氯化鐵0.02g、維生素B
1 1.4mg、氨芐青霉素80μg、硫酸鏈霉1mg、孟加拉紅2mg、瓊脂16g，余量為蒸餾水。
[0015]進一步地，所述馬鈴薯汁的制備過程為：將馬鈴薯削皮切成塊加蒸餾水，馬鈴薯蒸餾水的用量比為200
?
300g:800
?
900mL，煮至馬鈴薯將爛時過濾，獲得濾液即為馬鈴薯汁。
[0016]本專利技術(shù)的第二個目的是提供上述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟：
[0017]S1，馬鈴薯汁的制備：將馬鈴薯削皮切成塊加蒸餾水，馬鈴薯和蒸餾水的用量比為200
?
300g:800
?
900mL，煮至馬鈴薯將爛時過濾，獲得濾液即為馬鈴薯汁；
[0018]S2，在100mL蒸餾水中按量加入葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、氯化鐵和維生素B1攪拌溶解，溶解完全后再按量加入瓊脂，然后加入馬鈴薯汁混合均勻，再加蒸餾水定容至1000mL，115℃，0.07MPa高溫高壓滅菌20min，冷卻至60℃后按量加入氨芐青霉素、硫酸鏈霉和孟加拉紅，獲得外生菌根真菌分離培養(yǎng)基。
[0019]進一步地，S1中，所述馬鈴薯和蒸餾水的用量比為300g:900mL。
[0020]進一步地，S1中，利用兩層紗布過濾。
[0021]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果在于：
[0022]1、本專利技術(shù)制備得到的外生菌根真菌分離培養(yǎng)基能夠從黃山松共生的柳氏硬皮地星(Astraeus ryoocheoninii)S01，日本冷杉共生的花臉香蘑(Lepista sordida)S02和馬尾松共生的小笠原須腹菌(Rhizopogon boninensis)S2021021分離出外生菌根真菌，且分離能力強，能夠有效抑制雜菌。
附圖說明
[0023]為了更清楚地說明本專利技術(shù)實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本專利技術(shù)的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0024]圖1表示本專利技術(shù)中從柳氏硬皮地星S01子實體分離到的菌株情況；
[0025]其中，圖A為柳氏硬皮地星S01的子實體；
[0026]圖B為從柳氏硬皮地星S01子實體分離到的真菌菌落；
[0027]圖2表示本專利技術(shù)中從花臉香蘑S02子實體分離到的菌株情況；
[0028]其中，圖A為花臉香蘑S02的子實體；
[0029]圖B為從花臉香蘑S02的子實體分離到的真菌菌落；
[0030]圖3表示本專利技術(shù)中從小笠原須腹菌S2021021子實體分離到的菌株情況；
[0031]其中，圖A為小笠原須腹菌S2021021子實體；
[0032]圖B為從小笠原須腹菌S2021021子實體分離獲得的真菌菌落；
[0033]圖4表示本專利技術(shù)中從彩色豆馬勃S2021202子實體分離到的菌株情況；
[0034]其中，圖A為彩色豆馬勃S2021202子實體；
[0035]圖B為從彩色豆馬勃S2021202子實體分離到的菌株菌落。
具體實施方式
[0036]下面對本專利技術(shù)的具體實施方式進行詳細描述，但應(yīng)當理解本專利技術(shù)的保護范圍并不受具體實施方式的限制。基于本專利技術(shù)中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性
勞動的前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術(shù)保護的范圍。本專利技術(shù)各實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0037]實施例1：
[0038]本實施例提供了一種外生菌根真菌分離培養(yǎng)基及其制備方法
[0039]一、材料和方法
[0040本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
【技術(shù)特征摘要】
1.一種外生菌根真菌分離培養(yǎng)基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：馬鈴薯汁300
?
500mL、葡萄糖10
?
20g、酵母粉3
?
5g、蛋白胨3
?
5g、氯化鐵0.01
?
0.03g、維生素B
1 1
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2mg、氨芐青霉素50
?
100μg、硫酸鏈霉1
?
4mg、孟加拉紅2
?
3mg、瓊脂15
?
20g，余量為蒸餾水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的外生菌根真菌分離培養(yǎng)基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：馬鈴薯汁400mL、葡萄糖18g、酵母粉4g、蛋白胨4g、氯化鐵0.02g、維生素B
1 1.8mg、氨芐青霉素60μg、硫酸鏈霉2mg、孟加拉紅3mg、瓊脂18g，余量為蒸餾水。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的外生菌根真菌分離培養(yǎng)基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：馬鈴薯汁300mL、葡萄糖20g、酵母粉5g、蛋白胨5g、氯化鐵0.01g、維生素B
1 2mg、氨芐青霉素50μg、硫酸鏈霉4mg、孟加拉紅2mg、瓊脂20g，余量為蒸餾水。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的外生菌根真菌分離培養(yǎng)基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分離培養(yǎng)基由以下組分制成：馬鈴薯汁500mL、葡萄糖10g、酵母粉3g、蛋白胨3g、氯化鐵0.03g、維生素B
1 1mg、氨芐青霉素100μg、硫酸鏈霉1mg、孟加拉紅2.5mg、...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：孫啟彪，何貞英，歐陽建萍，何剛，季曉紅，陳曄，
申請(專利權(quán))人：九江學院，
類型：發(fā)明
國別省市：
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