本發明專利技術提供了一種適用于病理組織高效染色流程方法,涉及醫學檢測技術領域。一種適用于病理組織高效染色流程方法,包括以下步驟:S1:對病理組織切片進行分段脫蠟處理;S2:使用不同濃度乙醇對脫蠟處理后的病理組織切片進行分段處理;S3:將S2處理后的病理組織切片依次使用蘇木素染液、返藍液和伊紅染液進行染色處理;S4:使用不同濃度乙醇對染色處理后的病理組織切片進行分段處理;S5:對S4處理后的病理組織切片進行分段透明處理;S6:將透明處理后的病理組織切片進行封片固定。本發明專利技術可以在穩定染色質量的基礎上,減少染色操作時間,提高染色效率。高染色效率。高染色效率。
【技術實現步驟摘要】
一種適用于病理組織高效染色流程方法
[0001]本專利技術涉及醫學檢測
,具體而言,涉及一種適用于病理組織高效染色流程方法。
技術介紹
[0002]對病理組織進行觀察和鑒別之前需要對病理組織進行染色;現在最常用的染色的方法為HE染色法,又稱蘇木素
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伊紅染色法,其中蘇木素是Hematoxylin,簡稱H,伊紅是Eosin,簡稱E,這是普通光學顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。經過HE染色,細胞核被蘇木素染成藍紫色,細胞質被伊紅染色呈粉紅色。
[0003]目前,一般的HE染色操作方法需要時間較長,染色效率較低。
技術實現思路
[0004]本專利技術的目的在于提供一種適用于病理組織高效染色流程方法,其可以在穩定染色質量的基礎上,減少染色操作時間,提高染色效率。
[0005]本專利技術的實施例通過以下技術方案實現:
[0006]一種適用于病理組織高效染色流程方法,包括以下步驟:
[0007]S1:對病理組織切片進行分段脫蠟處理;
[0008]S2:使用不同濃度乙醇對脫蠟處理后的病理組織切片進行分段處理;
[0009]S3:將S2處理后的病理組織切片依次使用蘇木素染液、返藍液和伊紅染液進行染色處理;
[0010]S4:使用不同濃度乙醇對染色處理后的病理組織切片進行分段處理;
[0011]S5:對S4處理后的病理組織切片進行分段透明處理;
[0012]S6:將透明處理后的病理組織切片進行封片固定。
[0013]進一步地,所述步驟S1中分三階段進行脫蠟處理,每一階段于60~65℃處理2~3min。
[0014]進一步地,所述步驟S1中第一階段脫蠟和第二階段脫蠟處理使用二甲苯試劑,第三階段脫蠟處理使用按體積比二甲苯:無水乙醇=1:(0.5~0.8)的混合試劑。
[0015]進一步地,所述步驟S2包括以下依次處理方法:(1)無水乙醇處理12~17s,(2)無水乙醇處理12~17s,(3)95%乙醇處理12~17s,(4)95%乙醇處理12~17s,(5)85%乙醇處理12~17s,(6)75%乙醇處理12~17s。
[0016]進一步地,所述步驟S3包括以下依次處理方法:(1)水洗55~65s,(2)蘇木素染液處理6~7min,(3)水洗55~65s,(4)分化處理3~4S,(5)水洗30~35S,(6)返藍液處理10~15S,(7)水洗30~35S,(8)75%乙醇處理10~15S,(9)伊紅染液處理5~8S。
[0017]進一步地,所述步驟S3中蘇木素染液的制備方法為:(1)A液:將32~36g硫酸鋁鉀
溶于1400~1500ml蒸餾水配置A液,(2)B液:將5~8g蘇木精溶于450~550ml無水乙醇配置B液,(3)將A液與B液混勻,再加入0.4~0.8g碘酸鈉,10~20ml冰醋酸配置得蘇木素染液。
[0018]進一步地,所述步驟S3中分化處理使用1%鹽酸酒精分化液處理;1%鹽酸酒精分化液由1ml濃鹽酸加入99ml的70%酒精中混合制得;所述返藍液使用氨水。
[0019]進一步地,所述步驟S3中伊紅染液中加入1~2ml冰醋酸。
[0020]進一步地,所述步驟S4包括以下依次處理方法:(1)75%乙醇處理5~10s,(2)85%乙醇處理15~20s,(3)95%乙醇處理15~20s,(4)95%乙醇處理15~20s,(5)無水乙醇處理15~20s,(6)無水乙醇處理20~25s。
[0021]進一步地,所述步驟S5中包括以下依次處理方法:(1)二甲苯透明處理10~15s,(2)二甲苯透明處理15~20s。
[0022]本專利技術實施例的技術方案至少具有如下優點和有益效果:
[0023]本專利技術通過對病理組織切片進行分段脫蠟處理,并配合不同濃度乙醇進行分段處理,分段透明處理;同時采用不同配比的硫酸鋁鉀、蘇木精、碘酸鈉和冰醋酸配置的蘇木素染液,并采用添加冰醋酸的伊紅染液進行染色;可以在保證穩定的染色質量的基礎上,盡可能減少操作時間,有效提高染色效率。
附圖說明
[0024]圖1為實施例1提供的染色圖片;
[0025]圖2為實施例2提供的染色圖片;
[0026]圖3為實施例3提供的染色圖片;
[0027]圖4為實施例4提供的染色圖片;
[0028]圖5為實施例5提供的染色圖片;
[0029]圖6為對比例1提供的染色圖片;
[0030]圖7為對比例2提供的染色圖片。
具體實施方式
[0031]為使本專利技術實施例的目的、技術方案和優點更加清楚,下面將對本專利技術實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規產品。
[0032]下面對本專利技術實施例提供的一種適用于病理組織高效染色流程方法進行具體說明。
[0033]實施例1
[0034]本實施例提供了一種適用于病理組織高效染色流程方法,包括以下步驟:
[0035]S1:對病理組織切片分三階段進行脫蠟處理;第一階段和第二階段脫蠟使用二甲苯試劑于60℃處理2min,第三階段使用按體積比二甲苯:無水乙醇=1:0.5的混合試劑于60℃處理3min;
[0036]S2:使用不同濃度乙醇對脫蠟處理后的病理組織切片依次進行以下處理:(1)無水乙醇處理12s,(2)無水乙醇處理15s,(3)95%乙醇處理12s,(4)95%乙醇處理15s,(5)85%
乙醇處理12s,(6)75%乙醇處理15s;
[0037]S3:將S2處理后的病理組織切片依次使用蘇木素染液、返藍液和伊紅染液依次進行以下染色處理:(1)水洗55s,(2)蘇木素染液處理6min,(3)水洗55s,(4)1%鹽酸酒精分化液分化處理3S,(5)水洗30S,(6)氨水返藍液處理10S,(7)水洗30S,(8)75%乙醇處理10S,(9)伊紅染液中加入1ml冰醋酸處理5S;其中蘇木素染液的制備方法為:(1)A液:將32g硫酸鋁鉀溶于1400ml蒸餾水配置A液,(2)B液:將5g蘇木精溶于450ml無水乙醇配置B液,(3)將A液與B液混勻,再加入0.4g碘酸鈉,10ml冰醋酸配置得蘇木素染液;1%鹽酸酒精分化液由1ml濃鹽酸加入99ml的70%酒精中混合制得;
[0038]S4:使用不同濃度乙醇對染色處理后的病理組織切片依次進行以下處理:(1)75%乙醇處理5s,(2)85%乙醇處理15s,(3)95%乙醇處理15s,(4)95%乙醇處理15s,(5)無水乙醇處理15s,(6)無水乙醇處理20s;
[0039]S5:對S2處理后的病理組織切片依次進行以下透明處理:(1)二甲苯透明處理10s,本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一種適用于病理組織高效染色流程方法,其特征在于,包括以下步驟:S1:對病理組織切片進行分段脫蠟處理;S2:使用不同濃度乙醇對脫蠟處理后的病理組織切片進行分段處理;S3:將S2處理后的病理組織切片依次使用蘇木素染液、返藍液和伊紅染液進行染色處理;S4:使用不同濃度乙醇對染色處理后的病理組織切片進行分段處理;S5:對S4處理后的病理組織切片進行分段透明處理;S6:將透明處理后的病理組織切片進行封片固定。2.根據權利要求1所述的適用于病理組織高效染色流程方法,其特征在于,所述步驟S1中分三階段進行脫蠟處理,每一階段于60~65℃處理2~3min。3.根據權利要求2所述的適用于病理組織高效染色流程方法,其特征在于,所述步驟S1中第一階段脫蠟和第二階段脫蠟處理使用二甲苯試劑,第三階段脫蠟處理使用按體積比二甲苯:無水乙醇=1:(0.5~0.8)的混合試劑。4.根據權利要求1所述的適用于病理組織高效染色流程方法,其特征在于,所述步驟S2包括以下依次處理方法:(1)無水乙醇處理12~17s,(2)無水乙醇處理12~17s,(3)95%乙醇處理12~17s,(4)95%乙醇處理12~17s,(5)85%乙醇處理12~17s,(6)75%乙醇處理12~17s。5.根據權利要求1所述的適用于病理組織高效染色流程方法,其特征在于,所述步驟S3包括以下依次處理方法:(1)水洗55~65s,(2)蘇木素染液處理6~7min,(3)水洗55~65s,(4)分化處理3~4S,(5)水洗...
【專利技術屬性】
技術研發人員:毛家麗,吳正均,唐梅,黃林林,譚鴻文,
申請(專利權)人:四川金域醫學檢驗中心有限公司,
類型:發明
國別省市:
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