本發明專利技術涉及醫藥領域，具體涉及一種中藥制劑在制備抗71型腸道病毒藥物中的用途。所述九味羌活制劑包括如下重量份的原料藥：羌活20?40份，防風20?40份，蒼術20?40份，細辛5?15份，川芎10?30份，白芷10?30份，黃芩10?30份，甘草10?30份，地黃10?30份。本發明專利技術所涉及的九味羌活制劑對71型腸道病毒具有明顯的抑制作用，具有毒性小、作用強、安全有效等優點，為由71型腸道病毒引起的疾病的預防和治療開辟了新的途徑，具有重要的社會價值、經濟價值。
Application of Jiuweiqianghuo preparation in preparation of anti-enterovirus 71 drugs
The invention relates to the field of medicine, in particular to the use of a Chinese medicine preparation in the preparation of anti-71 enterovirus drugs. The Jiuweiqianghuo preparation includes the following raw materials: Qianghuo 20 820, Fangfeng 20 820, Atractylodes Atractylodes 20 820, Asarum 5 820, Chuanxiong 10 820, Baizhi 10 820, Huangqin 10 820, licorice 10 820, Dihuang 10 820. The Jiuweiqianghuo preparation has obvious inhibitory effect on enterovirus 71, has the advantages of low toxicity, strong effect, safety and effectiveness, opens up a new way for the prevention and treatment of diseases caused by enterovirus 71, and has important social and economic value.
【技術實現步驟摘要】
九味羌活制劑在制備抗71型腸道病毒藥物中的用途
本專利技術涉及醫藥領域，具體涉及一種中藥制劑在制備抗71型腸道病毒藥物中的用途。
技術介紹
1969年，美國在中樞神經系統疾病嬰兒的糞便標本中分離出71型腸道病毒。根據國際病毒分類委員會(ICTV)的最新分類，人腸道病毒被分為A、B、C、D和新腸道病毒(未分型)五類)，其中71型腸道病毒(EV71)被歸為人腸道病毒A型。EV71病毒主要引起手足口病，還可引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質炎樣的麻痹等多種神經系統疾病。手足口病和中樞神經系統感染是EV71感染而引起的兩大常見臨床癥狀。EV71是手足口病的主要病原。手足口病病傳染性強，患者以4～5歲以下小兒多見，大多數患者癥狀輕微，以發熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹為主要特征，大多數為良性過程，多自愈，但可復發，有時伴發無菌性腦膜炎、心肌炎等，目前缺乏有效治療藥物主要對癥治療。EV71累及神經系統主要表現為無菌性腦膜炎、腦炎及癱瘓性疾病，多發生于5歲以下幼兒，1歲以下嬰兒發病率最高。臨床表現變化多樣，病情輕重不一，一般表現為陣攣、嘔吐、共濟失調、意向性震顫、眼球震顫及情感淡漠等。頭顱MRI及腦電圖檢查有助于明確疾病的嚴重性。九味羌活制劑是由羌活、防風、蒼術、細辛、川芎、白芷、黃芩、甘草、地黃等九味中藥制成的制劑，具有疏風解表，散寒除濕的功效，用于外感風寒挾濕所致的感冒，癥見惡寒、發熱、無汗、頭痛、口干、肢體酸痛等。但目前尚未有九味羌活制劑抗71型腸道病毒的報道。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題是提供九味羌活制劑在制藥中的新用途。九味羌活制劑在制藥中的新用途是：九味羌活制劑在制備抗71型腸道病毒藥物中的用途。所述九味羌活制劑包括如下重量份的原料藥：羌活20-40份，防風20-40份，蒼術20-40份，細辛5-15份，川芎10-30份，白芷10-30份，黃芩10-30份，甘草10-30份，地黃10-30份。優選的，所述九味羌活制劑包括如下重量份的原料藥：羌活30份，防風30份，蒼術30份，細辛10份，川芎20份，白芷20份，黃芩20份，甘草20份，地黃20份。所述九味羌活制劑的劑型包括丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、口服液劑、噴霧劑。所述九味羌活制劑的劑型優選為噴霧劑。本專利技術所涉及的九味羌活制劑對71型腸道病毒具有明顯的抑制作用，具有毒性小、作用強、安全有效等優點，為由71型腸道病毒引起的疾病的預防和治療開辟了新的途徑，具有重要的社會價值、經濟價值。為了公眾能更好的理解本專利技術的有益效果，下面將通過實施例和體外細胞實驗進一步闡明。附圖說明圖1是九味羌活噴霧劑對細胞產生毒性作用前后的顯微照片對比。圖2是藥物對EV71病毒體外抑制作用顯微照片對比。具體實施方式下面將進一步的詳細說明本專利技術。需要指出的是，以下說明僅僅是對本專利技術要求保護的技術方案的舉例說明，并非對這些技術方案的任何限制。實施例1九味羌活噴霧劑制備受試藥物：九味羌活噴霧劑(江西普正制藥有限公司，批號：170701)。所述受試藥物的具體制備方法由以下步驟組成：羌活300g、防風300g、蒼術300g、細辛100g、川芎200g、白芷200g提取揮發油，蒸餾后的水溶液另器收集。藥渣與黃芩200g、甘草200g、地黃200g加水煎煮二次，每次1小時；合并上述煎液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至相對密度為1.08～1.13，加乙醇使含醇量達50％，靜置，濾過，濾液回收乙醇，并濃縮至約900ml，加入上述揮發油和藥用輔料，混勻，加水調整總量至1000ml,即得。實施例2九味羌活噴霧劑體外抗病毒實驗RD細胞凍存管從液氮罐取出，立即投入37℃～42℃溫水中融化，超凈工作臺內將凍存管中液體移入離心管中，800r/min，5min，棄凍存液，加入5mL濃度10％的1640細胞培養液輕輕將下層沉淀細胞吹打混勻，用移液管轉移到培養瓶內，在37℃、5％CO2恒溫培養箱中培養。待細胞長成單層后進行傳代。將EV71病毒接種于己經長成單層的RD細胞上，加1640維持液5mL置37℃、5％CO2病毒培養箱中培養，并設細胞對照，逐日觀察。待細胞出現90％以上的病變時，反復凍融3次，用吸管輕輕吹打，1000r/min，5min，離心，取上清液定量分裝于EP管中，封口膜封口，放于-80℃冰箱凍存備用。病毒毒力的測定：將病毒用1640維持液做10倍比系列稀釋不同濃度，縱向重復4孔，依次接種于己長成單層的RD細胞的96孔板中，同時設細胞對照。37℃、5％CO2病毒培養箱中培養，倒置顯微鏡下觀察24h，加5mg/ml的MTT10μl，37℃、5％CO2培養箱中4小時，吸棄染液，加DMSO100μl，室溫脫色l0min，用酶標儀在490nm波長測定OD值。根據Reed-Muench公式計算病毒液的半數感染濃度TCID50。細胞存活率＝各組OD值/正常細胞OD值×100％細胞病變率＝1－細胞存活率細胞比距＝(高于50％病變率－50％)/(高于50％病變率－低于50％病變率)×100％TCID50＝Antilg(Ig高于50％CPE百分率病毒稀釋度+比距×稀釋對數間的差)測定結果顯示EV71病毒TCID50為10-4.31。實驗時用100個TCID50作為病毒液濃度，因此需將病毒原液稀釋200倍用于實驗。藥物對細胞毒性測定：九味羌活噴霧劑用1640維持液按二倍比稀釋10個濃度梯度，依次接種于己經長成單層RD細胞的96孔板中，并設3個復孔及細胞對照孔；37℃、5％CO2培養箱中培養，逐日觀察細胞病變，連續觀察3d，計算藥物的最大無毒濃度。細胞出現病變者判為藥物毒性，MTT染色，用酶標儀在490nm波長測定OD值，應用Reed-Muench公式計算藥物半數中毒濃度(TC50)，并確定最小無毒濃度(TC50)。TC50＝[Antilog(log高于50％CPE百分率病毒稀釋度+比距)]×C抗EV71病毒實驗：九味羌活噴霧劑從無毒濃度起用1640二倍比系列稀釋10個濃度，每孔100μl，接種于已長成單層RD細胞的96孔板中，每孔再加入100μl的EV71病毒液，同時設利巴韋林陽性對照組、病毒對照組及空白細胞對照組，每組3個復孔。5％CO2培養箱中培養，逐日觀察細胞病變，待病毒對照出現90％以上的病變時，MTT染色，用酶標儀在490nm波長測定OD值，應用Reed-Muench公式計算藥物半數有效濃度(EC50)和治療指數(TI)。EC50＝[Antilog(log高于50％CPE百分率藥物稀釋度的值-比距)]×CTI＝半數毒性濃度(TC50)/半數有效濃度(EC50)具體結果如下：病毒感染24小時后病毒組開始出現病變，藥物組也開始顯現病變，細胞在無毒濃度范圍內隨著藥物濃度的降低，EV71感染細胞表現明顯，細胞間變圓、破碎、脫落，24小時病毒對照組90％病變，藥物組幾個濃度梯度孔被完全保護，細胞生長良好。各組藥物的治療指數如下：九味羌活噴霧劑利巴韋林TI指數44.776.6實施例3實驗動物采用SPE級1日齡ICR乳鼠，環境溫度控制為23±2℃，相對濕度為75±10％，照明時間12h/d(7:00-19:00)。實驗動物隨機分為正常組、病毒組、九味羌活噴霧劑低劑量組(病毒+九味羌活噴霧劑，本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.九味羌活制劑在制備抗71型腸道病毒藥物中的用途。
【技術特征摘要】
1.九味羌活制劑在制備抗71型腸道病毒藥物中的用途。2.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述九味羌活制劑包括如下重量份的原料藥：羌活20-40份，防風20-40份，蒼術20-40份，細辛5-15份，川芎10-30份，白芷10-30份，黃芩10-30份，甘草10-30份，地黃10-30份。3.根據權利要求1所述的...
【專利技術屬性】
技術研發人員：康興東，劉厚權，張金良，周朝忠，李小鋒，董艷凱，胡吉忠，
申請(專利權)人：江西普正制藥有限公司，
類型：發明
國別省市：江西,36
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