白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法和質(zhì)量檢測方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及中藥檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及白術(shù)的特征圖譜構(gòu)建方法和質(zhì)量檢測方法；本發(fā)明專利技術(shù)所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法通過高效液相色譜分析對白術(shù)藥材、白術(shù)飲片和麩炒白術(shù)飲片有效成分白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和蒼術(shù)酮的特征圖譜進(jìn)行分析，該特征圖譜色譜峰完全呈現(xiàn)，均勻性佳，特征色譜峰完全分離，雜質(zhì)少，并據(jù)此建立對照特征圖譜，同時測定白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量，結(jié)合薄層色譜法鑒別、重金屬和有害元素測定，提供了一種針對有效性和安全性的全面白術(shù)質(zhì)量檢測方法，進(jìn)一步實現(xiàn)了對白術(shù)、白術(shù)炮制品及相關(guān)制品質(zhì)量的檢測，且該質(zhì)量檢測方法具有簡單快速、穩(wěn)定可靠、精密度高、重現(xiàn)性好、易于掌握等優(yōu)點(diǎn)。

Construction Method and Quality Detection Method of Atractylodes macrocephala Characteristic Atlas

The invention relates to the technical field of traditional Chinese medicine detection, in particular to the construction method of characteristic atlas and the quality detection method of Atractylodes macrocephala. The construction method of characteristic Atlas of Atractylodes macrocephala, Atractylodes macrocephala decoction pieces and bran-fried Atractylodes macrocephala decoction pieces is analyzed by high performance liquid chromatography, and the characteristic Atlas of Atractylodes I, Atractylodes II, Atractylodes III and atractylone are analyzed. The chromatographic peaks of characteristic atlas are completely presented, uniformity is good, characteristic peaks are completely separated and impurities are few. Based on this, a comparative characteristic atlas is established. The contents of Atractylodes macrocephala lactone I and Atractylodes macrocephala III are simultaneously determined. A comprehensive quality detection method for Atractylodes macrocephala AICA is provided, which aims at validity and safety, and further realizes the determination of Atractylodes macrocephala macrocephala and atract The quality detection of processed and related products of Atractylodes macrocephala and Atractylodes macrocephala has the advantages of simplicity, rapidity, stability, reliability, high precision, good reproducibility and easy to master.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法和質(zhì)量檢測方法
本專利技術(shù)屬于中藥檢測
，具體涉及白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法和質(zhì)量檢測方法。
技術(shù)介紹
白術(shù)為菊科植物白術(shù)(AtractylodesmacrocephalaKoidz)的干燥根莖，是我國傳統(tǒng)常用補(bǔ)益類中藥，具有健脾益氣、燥濕利水、止汗和安胎等功效。隨著人民群眾健康保健意識的增強(qiáng)，人們對中藥產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性等有了更高的要求。目前，白術(shù)藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括簡單的性狀、鑒別、常規(guī)檢查和浸出物測定等方面，還包括高效液相指紋圖譜的測定。中藥指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段，是當(dāng)前符合中藥特色的、評價中藥真實性、穩(wěn)定性和一致性的質(zhì)量控制模式之一。中國專利文獻(xiàn)CN102680631B公開了一種白術(shù)藥材的檢測方法，采用高效液相色譜法對白術(shù)藥材的水煎液進(jìn)行指紋圖譜的檢測，由于水煎液中取得的化學(xué)成分比純有機(jī)溶劑提取時更加完全檢測的成分更加完全，因此可以得到理想的指紋圖譜，對白術(shù)進(jìn)行盡可能全面的成分質(zhì)量監(jiān)控。指紋圖譜的作用主要是反映復(fù)雜成分的中藥及其制劑內(nèi)在質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性。色譜專家認(rèn)為應(yīng)該分離度越高越好，分出的峰越多越好；信息處理專家也認(rèn)為給出的數(shù)據(jù)越多越好。但國際協(xié)調(diào)會議關(guān)于定量分析的精密度和準(zhǔn)確度的問題說“分析的結(jié)果并非越精密越準(zhǔn)確越好，而是達(dá)到分析對象的要求即可”，即指紋圖譜的峰不是越多越好，而是達(dá)到構(gòu)成指紋特征的目的即可。據(jù)報道，白術(shù)主要有效成分集中在揮發(fā)油及白術(shù)內(nèi)酯兩大類成分上，其中蒼術(shù)酮占揮發(fā)油類成分的31％～60％，可作為揮發(fā)油的代表物質(zhì)；內(nèi)酯類成分中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量較高，且具有良好的藥理作用。如果以有效成分為指標(biāo)，將有效成分的指紋圖譜技術(shù)作為中藥的檢測手段，這將使以復(fù)方配伍為主要特點(diǎn)的中醫(yī)用藥療效更為可靠、質(zhì)量更為可控，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)更為明確，同時，重金屬及有害元素、農(nóng)藥殘留量等安全性指標(biāo)在實際應(yīng)用過程中具有重要的影響，影響用藥安全，現(xiàn)有技術(shù)并沒有針對白術(shù)有效性和安全性的全面的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
因此，本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的白術(shù)的指紋圖譜沒有對有效成分進(jìn)行針對性檢測和有效性檢測的缺陷，從而提供一種針對白術(shù)有效成分的特征圖譜構(gòu)建方法，。本專利技術(shù)要解決的另一個技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的白術(shù)質(zhì)量檢測針對性和全面性差的缺陷，從而提供一種全面白術(shù)質(zhì)量控制方法，從安全性和有效性兩個方面來評價白術(shù)藥材的質(zhì)量。因此，本專利技術(shù)公開了一種白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，包括以下步驟，供試品溶液的制備：取白術(shù)供試樣品制備供試品溶液；參照物溶液的制備：取白術(shù)藥材制備對照藥材參照物溶液；取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品制備對照品參照物溶液；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按照以下程序進(jìn)行梯度洗脫：0-13min，流動相A：流動相B的體積比為45％-55％：55％-45％→45％-55％：55％-45％；13-14min，流動相A：流動相B的體積比為45％-55％：55％-45％→60-70％：40％-30％；14-20min，流動相A：流動相B的體積比為60-70％：40％-30％：60-70％：40％-30％；20-21min，流動相A：流動相B的體積比為60-70％：40％-30％→78％-82％：22％-18％；21-25min，流動相A：流動相B的體積比為78％-82％：22％-18％→83％-87％：17％-13％；25-26min，流動相A：流動相B的體積比為83％-87％：17％-13％→88％-92％：12％-8％；26-40min，流動相A：流動相B的體積比為88％-92％：12％-8％→88％-92％：12％-8％；柱溫為25-35℃；流速為0.8-1.2ml/min；檢測波長為233-243nm；測定法：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。優(yōu)選的，還包括白術(shù)對照特征圖譜的構(gòu)建，包括對至少15批白術(shù)供試樣品檢測得到的特征圖譜，利用國家藥典委員會的中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)生成白術(shù)對照特征圖譜，并標(biāo)記共有特征峰。優(yōu)選的，所述白術(shù)特征圖譜包括5個共有特征峰，共有特征峰為：1號峰為白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ，2號峰為共有特征峰，3號峰為白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ，4號峰為白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ，5號峰為蒼術(shù)酮；以1號峰白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ為參照峰，各峰號相對保留時間分別為：1號峰：1.00，2號峰：1.74，3號峰：1.84，4號峰：2.16，5號峰：3.07。優(yōu)選的，所述供試品溶液的制備方法包括以下步驟：取白術(shù)供試樣品制成粉末，過篩，稱定0.3-0.8g，加入溶劑15-25ml，超聲或冷浸20-60min，靜置，補(bǔ)足減失的溶劑，取上清液濾過，取續(xù)濾液；優(yōu)選的，所述白術(shù)供試樣品包括白術(shù)中藥材、白術(shù)飲片或麩炒白術(shù)飲片；優(yōu)選的，所述溶劑選自正己烷或者甲醇；所述溶劑體積分?jǐn)?shù)不小于60％；優(yōu)選的，在所述超聲處理步驟中，功率為200-300W，頻率為30-50KHZ；優(yōu)選的，在所述上清液濾過步驟中所采用的濾膜的微孔大小為0.22-0.45μm。優(yōu)選的，所述對照藥材參照物溶液的制備方法如下：取白術(shù)對照藥材制成粉末，過篩，精密稱定0.3-0.8g，加入溶劑15-25ml，超聲或冷浸20-60min，靜置，補(bǔ)足減失的溶劑，取上清液濾過，取續(xù)濾液；所述對照品參照物溶液的制備方法如下：分別取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ，精密稱定，加溶劑制成每lml含白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ4-6μg、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ8-12μg的混合對照品溶液，即得；優(yōu)選的，所述溶劑選自正己烷或者甲醇；所述溶劑體積分?jǐn)?shù)不小于60％；優(yōu)選的，在所述超聲處理步驟中，功率為200-300W，頻率為30-50KHZ；優(yōu)選的，在所述上清液濾過步驟中所采用的濾膜的微孔大小為0.22-0.45μm。優(yōu)選的，所述色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗步驟中使用的C18色譜柱選自WatersXBridge-C18色譜柱、AgilentZORBAXSB-C18色譜柱或Kromasil100-5-C18色譜柱。本專利技術(shù)還公開了上述白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法在白術(shù)藥材、白術(shù)炮制品或白術(shù)相關(guān)制品的質(zhì)量檢測中的用途。本專利技術(shù)還公開了一種白術(shù)質(zhì)量檢測方法，包括采用上述白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法對白術(shù)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量檢測，所述白術(shù)產(chǎn)品包括白術(shù)藥材、白術(shù)炮制品或白術(shù)相關(guān)制品。優(yōu)選的，按照權(quán)利要求1-6任一項所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法同法操作檢測待測白術(shù)產(chǎn)品及白術(shù)對照藥材、對照品，得到相應(yīng)的特征圖譜，將待測白術(shù)產(chǎn)品特征圖譜與白術(shù)對照藥材特征圖譜、對照品特征圖譜相對比，評價其質(zhì)量。優(yōu)選的，還包括對白術(shù)進(jìn)行薄層色譜法鑒別的步驟，包括如下步驟：待測溶液和參照藥材溶液：取待測白術(shù)產(chǎn)品和白術(shù)對照藥材制成粉末各取0.3-0.8g，加溶劑1-4ml，超聲5-40min，濾過，補(bǔ)足溶劑，取濾液，為待測溶液和參照藥材溶液；對照品溶液：取白術(shù)內(nèi)酯I對照品、白術(shù)內(nèi)酯II對照品和白術(shù)內(nèi)酯III對照品，加溶劑制成濃度為0.5-3mg/ml白術(shù)內(nèi)酯I對照品溶液、0.5-3mg/ml白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ?qū)φ掌啡芤汉?.5-3mg/ml白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品溶液；鑒別：吸取待測溶液3-10μl、參照藥材溶液3-10μl、白術(shù)內(nèi)酯I對照品溶液1-5ul、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ?qū)φ毡疚臋n來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟，供試品溶液的制備：取白術(shù)供試樣品制備供試品溶液；參照物溶液的制備：取白術(shù)藥材制備對照藥材參照物溶液；取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品制備對照品參照物溶液；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按照以下程序進(jìn)行梯度洗脫：0?13min，流動相A：流動相B的體積比為45％?55％：55％?45％→45％?55％：55％?45％；13?14min，流動相A：流動相B的體積比為45％?55％：55％?45％→60?70％：40％?30％；14?20min，流動相A：流動相B的體積比為60?70％：40％?30％：60?70％：40％?30％；20?21min，流動相A：流動相B的體積比為60?70％：40％?30％→78％?82％：22％?18％；21?25min，流動相A：流動相B的體積比為78％?82％：22％?18％→83％?87％：17％?13％；25?26min，流動相A：流動相B的體積比為83％?87％：17％?13％→88％?92％：12％?8％；26?40min，流動相A：流動相B的體積比為88％?92％：12％?8％→88％?92％：12％?8％；柱溫為25?35℃；流速為0.8?1.2ml/min；檢測波長為233?243nm；測定法：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。...

【技術(shù)特征摘要】
1.一種白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟，供試品溶液的制備：取白術(shù)供試樣品制備供試品溶液；參照物溶液的制備：取白術(shù)藥材制備對照藥材參照物溶液；取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品制備對照品參照物溶液；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按照以下程序進(jìn)行梯度洗脫：0-13min，流動相A：流動相B的體積比為45％-55％：55％-45％→45％-55％：55％-45％；13-14min，流動相A：流動相B的體積比為45％-55％：55％-45％→60-70％：40％-30％；14-20min，流動相A：流動相B的體積比為60-70％：40％-30％：60-70％：40％-30％；20-21min，流動相A：流動相B的體積比為60-70％：40％-30％→78％-82％：22％-18％；21-25min，流動相A：流動相B的體積比為78％-82％：22％-18％→83％-87％：17％-13％；25-26min，流動相A：流動相B的體積比為83％-87％：17％-13％→88％-92％：12％-8％；26-40min，流動相A：流動相B的體積比為88％-92％：12％-8％→88％-92％：12％-8％；柱溫為25-35℃；流速為0.8-1.2ml/min；檢測波長為233-243nm；測定法：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，還包括白術(shù)對照特征圖譜的構(gòu)建，對至少15批白術(shù)供試樣品檢測得到的特征圖譜，利用國家藥典委員會的中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)生成白術(shù)對照特征圖譜，并標(biāo)記共有特征峰。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，所述白術(shù)特征圖譜包括5個共有特征峰，共有特征峰為：1號峰為白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ，2號峰為共有特征峰，3號峰為白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ，4號峰為白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ，5號峰為蒼術(shù)酮。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的白術(shù)的特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備方法包括以下步驟：取白術(shù)供試樣品制成粉末，過篩，稱定0.3-0.8g，加入溶劑15-25ml，超聲或冷浸20-60min，靜置，補(bǔ)足減失的溶劑，取上清液濾過，取續(xù)濾液；優(yōu)選的，所述白術(shù)供試樣品包括白術(shù)中藥材、白術(shù)飲片或麩炒白術(shù)飲片；優(yōu)選的，所述溶劑選自正己烷或者甲醇；所述溶劑體積分?jǐn)?shù)不小于60％；優(yōu)選的，在所述超聲處理步驟中，功率為200-300W，頻率為30-50KHZ；優(yōu)選的，在所述上清液濾過步驟中所采用的濾膜的微孔大小為0.22-0.45μm。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，所述對照藥材參照物溶液的制備方法如下：取白術(shù)對照藥材制成粉末，過篩，精密稱定0.3-0.8g，加入溶劑15-25ml，超聲或冷浸20-60min，靜置，補(bǔ)足減失的溶劑，取上清液濾過，取續(xù)濾液；所述對照品參照物溶液的制備方法如下：分別取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ，精密稱定，加溶劑制成每1ml含白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ4-6μg、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ8-12μg的混合對照品溶液，即得；優(yōu)選的，所述溶劑選自正己烷或者甲醇；所述溶劑體積分?jǐn)?shù)不小于60％；優(yōu)選的，在所述超聲處理步驟中，功率為200-300W，頻率為30-50KHZ；優(yōu)選的，在所述上清液濾過步驟中所采用的濾膜的微孔大小為0.22-0.45μm。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法，其特征在于，所述色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗步驟中使用的C18色譜柱選自WatersXBridge-C18色譜柱、AgilentZORBAXSB-C18色譜柱或Kromasil100-5-C18色譜柱。7.權(quán)利要求1-6任一項所述的白術(shù)特征圖譜構(gòu)建方法在白術(shù)藥材、白術(shù)炮制品或白術(shù)相關(guān)制品的質(zhì)量檢測中的用途。8.一種白術(shù)質(zhì)量檢測方法，其特征在于，包括采用權(quán)...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：姚璐，王淑英，王海，張潤，李晩婧，顏士華，
申請(專利權(quán))人：北京中研同仁堂醫(yī)藥研發(fā)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：北京,11