【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于酶固定化技術(shù)。酶固定化技術(shù)主要有四種方法吸附法，即將酶吸附于陰離子或陽離子載體上;因?yàn)樵摲椒ㄓ玫妮d體機(jī)械強(qiáng)度高，生產(chǎn)工藝成熟，成本低，抗菌性好，所以在國內(nèi)外大規(guī)模的使用，由于該方法是靠靜電力與載體相結(jié)合的，所以存在極易受環(huán)境PH、溫度、攪拌速度、離子濃度的影響而使酶脫落，造成產(chǎn)品污染，酶使用壽命下降的缺點(diǎn)。共價(jià)法、即通過化學(xué)反應(yīng)將酶與載體相偶聯(lián);該方法通常所用的載體為葡聚糖，瓊脂糖、微晶纖維素、伯氨基聚苯乙烯等，載體和偶聯(lián)劑的成本普遍偏高，抗菌性能差，機(jī)械強(qiáng)度也較差。因此，僅限于實(shí)驗(yàn)室和某些微量催化反應(yīng)中應(yīng)用。交聯(lián)法即加入交聯(lián)劑使酶與載體之間、酶與酶之間發(fā)生交聯(lián)而形成固定化酶，該方法與共價(jià)法存在同樣的缺點(diǎn)，所以目前也不能大規(guī)模使用。包埋法即利用載體分子間的交聯(lián)，將酶包埋于載體內(nèi)，該方法存在機(jī)械強(qiáng)度差，酶易逸出等缺點(diǎn)，另外其生產(chǎn)工藝較復(fù)雜，特別是要制出球型、高強(qiáng)度的固定化酶尤其困難，因而不能大量使用。本專利技術(shù)的目的是研究一種工藝簡單，機(jī)械強(qiáng)度高，易成型、抗菌性好，成本低、不受環(huán)境影響的酶固定化技術(shù)。本專利技術(shù)的內(nèi)容是以三乙醇胺強(qiáng)堿性聚苯乙烯為載體，以溴化氰為活化劑將酶共價(jià)連接于聚苯乙烯載體上。其操作過程為三乙醇胺陰離子聚苯乙烯樹膠1g(0.07～0.1mm直徑)↓2Mk2co3浸泡12小時(shí)濾干后，加入2ml 2Mk2co3↓冰浴下加入0.5mlCNBr(2g/ml)↓冰浴下反應(yīng)15分鐘用冷0.1M NaHCo3洗至PH8.5↓立即加入酶溶液2ml(約70mg蛋白)↓4℃下反應(yīng)24小時(shí)依次用0.1M NaHCO3、1M NaCl、去離子水...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種適用于工業(yè)化生產(chǎn)的共價(jià)固定化酶方法，其特征在于以三乙醇胺強(qiáng)堿性聚苯乙烯為載體共價(jià)連接酶。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：查曉，周慧，李惟，沈家驄，
申請(專利權(quán))人：吉林大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：22[中國|吉林]
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