防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的生物農(nóng)藥制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種生物農(nóng)藥，其由膏A、丸B和巴布C組成，其中膏A和丸B所用凝膠由羧甲基纖維素鈉、甘油、瓊脂和葡萄糖制備而成，丸B的凝膠中還添加有一定濃度的殼寡糖并保存有產(chǎn)黃青霉菌活菌及代謝產(chǎn)物。本發(fā)明專利技術(shù)還涉及一種使用所述生物農(nóng)藥防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的方法。

Biological pesticide for controlling canker of apple tree

The present invention relates to a biological pesticide, which is composed of A, B and Babu paste pill C, wherein A and B are used to paste pill gel by sodium carboxymethyl cellulose, glycerol, glucose agar and prepared B gel pill added chitosan oligosaccharide with certain concentration and the preservation of property Huang Qing fungi live bacteria and metabolites. The invention also relates to a method for using the biological pesticide to prevent canker disease of apple trees.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的生物農(nóng)藥
本專利技術(shù)屬于農(nóng)藥，特別是涉及一種防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的生物農(nóng)藥。
技術(shù)介紹
蘋(píng)果腐爛病(ValsamaliMiyabeetYamadao)又稱爛皮病，英文名appletreecanker。蘋(píng)果園一旦有腐爛病發(fā)生或有病害潛伏，則全園都處于病害威脅下，隨時(shí)都可能會(huì)發(fā)病，特別是當(dāng)果樹(shù)樹(shù)勢(shì)衰弱，環(huán)境條件不利或是果園管理不當(dāng)?shù)惹闆r下，極易爆發(fā)病害。腐爛病一旦發(fā)病則極難根治，因此，該病形象地被國(guó)內(nèi)外稱為：“樹(shù)木癌癥”。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病是一種由真菌侵染樹(shù)體引起的病害，在我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)危害嚴(yán)重。防治腐爛病的措施有很多種。蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的防治方法一般為刮病皮后上藥處理，結(jié)合科學(xué)的果園管理進(jìn)行綜合防治。現(xiàn)階段，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病使用的藥物多為化學(xué)農(nóng)藥。如福美砷、腐殖酸鈉、代森銨(施納寧)、黃腐酸、甲基托布津，多菌靈和石硫合劑等。農(nóng)藥防治腐爛病的同時(shí)，也引起了化學(xué)殘留和環(huán)境污染等危害，直接或間接的威脅到人們的健康和安全。在民間人們嘗試用食鹽水、大蔥等一些“偏方”，甚至是糊泥對(duì)該病進(jìn)行防治，方法生態(tài)環(huán)保，防治效果卻不夠理想。隨著農(nóng)業(yè)科技的發(fā)展，防治該病的方法、藥劑也在不斷改進(jìn)，傳統(tǒng)的方法在逐步被代替，生物防治的概念被大家廣泛接受。生物防治因其生態(tài)環(huán)保，防治穩(wěn)定和藥效持久的優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)成為腐爛病防治的研究趨勢(shì)。青霉素防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病是最接近本專利技術(shù)的方案。青霉素不能直接殺死有細(xì)胞壁的真菌，但青霉素作為促進(jìn)型生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可以通過(guò)增加果樹(shù)生理抗性和促進(jìn)傷口愈合來(lái)防治腐爛病。科研工作者用醫(yī)用青霉素來(lái)防治該病，防治效果好，治愈率高，其安全性和生態(tài)性也非常理想。但是藥物易分解，噴施容易造成浪費(fèi)，且藥效不夠持久。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為解決現(xiàn)有技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題，本專利技術(shù)提供一種新型生物農(nóng)藥。該新型生物農(nóng)藥由膏A、丸B和巴布C組成，其中膏A和丸B所含膏體狀凝膠由羧甲基纖維素鈉、甘油、瓊脂和葡萄糖制備而成，且丸B的凝膠中還添加有一定濃度的殼寡糖。膏A作為營(yíng)養(yǎng)成分及載體，丸B用于保存產(chǎn)黃青霉菌活菌及代謝產(chǎn)物，巴布C提供青霉菌生長(zhǎng)繁育的小環(huán)境。如上所述的新型生物農(nóng)藥，其中膏A和丸B所用膏體狀凝膠中，在1000ml的凝膠中羧甲基纖維素鈉的用量為大約20-40g，甘油的用量為大約10-30ml，瓊脂的用量為大約2-6g，葡萄糖的用量為大約10-20g。如上所述的新型生物農(nóng)藥，其中膏A和丸B所用膏體狀凝膠中，在1000ml的凝膠中羧甲基纖維素鈉的用量為大約40g，甘油的用量為大約20ml，瓊脂的用量為大約2g，葡萄糖的用量為大約15g。如上所述的新型生物農(nóng)藥，丸B所用膏體狀凝膠中殼聚糖的濃度為大約0.005％-0.04％。本專利技術(shù)還提供使用前述新型生物農(nóng)藥防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的方法，包括：(1)在刮治腐爛病斑前4-6天，打開(kāi)膏A，將藥膏按病斑個(gè)數(shù)和形狀均勻擠涂到巴布C上，厚度為10-20mm。(2)打開(kāi)丸B，將丸藥均勻涂抹到藥膏上，對(duì)折巴布，粘貼四邊，使巴布內(nèi)部密封。(3)使用時(shí)，刮凈病皮，將巴布展開(kāi)，貼于刮皮部位，使膏藥完全覆蓋，并與樹(shù)體組織完全緊密接觸。本專利技術(shù)合理借鑒了青霉素對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病防治的優(yōu)點(diǎn)，并且利用產(chǎn)黃青霉菌分泌大量青霉素的特點(diǎn)，將產(chǎn)黃青霉菌接菌于凝膠上并持續(xù)分泌青霉素，并利用凝膠載體的粘附性，靶向?yàn)椴“坛掷m(xù)提供藥物。附圖說(shuō)明圖1不同濃度青霉素液處理對(duì)果樹(shù)爛皮中果膠酶活性的影響。圖2青霉素液處理后PAL活性的變化。圖3青霉素液處理后木質(zhì)素含量的變化。圖4青霉素液處理后POD活性的變化。圖5青霉素液處理后PPO活性的變化。圖6青霉素液處理后HRGP含量的變化。圖7新型生物農(nóng)藥各劑型。圖8兩種糖源培養(yǎng)基對(duì)產(chǎn)黃青霉菌的形態(tài)影響(左：葡萄糖右：殼聚糖)。圖9殼寡糖對(duì)活性菌孢子濃度的影響。圖10新型生物農(nóng)藥準(zhǔn)備過(guò)程。圖11病斑愈合度對(duì)比。圖12平均愈合效果對(duì)比。具體實(shí)施方式實(shí)施例1青霉素對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的防治作用1.1青霉素對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病抗性誘導(dǎo)將提取分離蘋(píng)果樹(shù)腐爛病病原菌，回接到六組4年生健康蘋(píng)果樹(shù)樹(shù)體，每隔7d測(cè)定其果膠酶活性和幾種抗病物質(zhì)的變化。樹(shù)體的枝干上接種病原菌20d后，樹(shù)體用五種不同濃度青霉素液處理(整個(gè)樹(shù)體用青霉素液噴施)，一組作為對(duì)照。6個(gè)處理分別為：0.8、1.2、1.6、2.0、3.0萬(wàn)單位·L-1、清水對(duì)照采用樹(shù)干涂抹法用藥。施藥前將病部的樹(shù)皮用刀刮剝到韌皮部，然后將藥液涂抹于其上。每個(gè)處理重復(fù)5次。1.2青霉素對(duì)病源菌分泌果膠酶活性的影響果膠酶在病原菌的致病性中具有重要的作用。因?yàn)樵谔O(píng)果腐爛病菌腐爛分解的爛皮中有果膠酶的存在。由圖1可知：病皮組織中果膠酶活性高于PA培養(yǎng)液，可達(dá)135.1u/g.min，不同濃度青霉素液處理后的病組織，其果膠酶活性與CK有差異，1.2萬(wàn)單位·L-1處理的差異最明顯(P＜0.01)；這說(shuō)明青霉素液在感病樹(shù)體上對(duì)病原菌分泌的果膠酶有抑制作用，尤其是1.2萬(wàn)單位·L-1的青霉素液，處理35d時(shí)，感病樹(shù)體的果膠酶活性是CK的0.18倍。1.3不同濃度青霉素液處理發(fā)病樹(shù)體后幾種抗病性物質(zhì)的變化情況由圖2-6可知，樹(shù)體感病后PAL活性、木質(zhì)素的含量、POD的活性、PPO的活性、HRGP的含量相對(duì)于感病前都明顯升高，樹(shù)體發(fā)病20-30d后都達(dá)到最高含量。這說(shuō)明感病寄主被侵染后，也能表現(xiàn)出一定的抗病性，但是這種抗病性是有限的，不足以抵抗病菌的浸染，通過(guò)激素或其它方式對(duì)寄主的誘導(dǎo)，使其產(chǎn)生大量的抗病物質(zhì)，這樣可以有效地抵抗病菌的侵染。0.8、1.0、1.2萬(wàn)單位·L-1的青霉素液處理樹(shù)體后，PAL活性、木質(zhì)素的含量、POD的活性、PPO的活性、HRGP的含量相對(duì)CK有顯著的提高(P＜0.01)；尤其是1.2萬(wàn)單位·L-1青霉素液可以明顯提高PAL活性、POD活性、HRGP的含量。2.0、3.0萬(wàn)單位·L-1的青霉素液的處理效果相對(duì)于CK沒(méi)有顯著的差異(P＞0.05)或有負(fù)效應(yīng)。實(shí)施例2新型生物農(nóng)藥2.1新型生物農(nóng)藥劑型新型生物農(nóng)藥藥物成分為產(chǎn)黃青霉菌及代謝產(chǎn)物。新藥劑型上，由膏A、丸B和巴布C組成。其中膏A作為營(yíng)養(yǎng)成分及載體；丸B保存活菌；巴布C提供青霉菌生長(zhǎng)繁育的小環(huán)境。新型生物農(nóng)藥組成如圖7所示。巴布C采用防水無(wú)紡布，由廠家定制生產(chǎn)。膏A、丸B則由膏體狀凝膠組成，其中丸B中的凝膠中，添加一定濃度殼寡糖(殼寡糖可以降低產(chǎn)黃青霉菌繁殖速率，增加丸B的保質(zhì)時(shí)間)。2.2凝膠制備將一定量的羧甲基纖維素鈉和甘油放入燒杯，加蒸餾水補(bǔ)足50ml，使其有效溶脹(約1天，不能攪拌)。將洗凈后去皮的馬鈴薯(200g)切成1cm見(jiàn)方，加水1000ml煮沸半小時(shí)，用紗布濾去馬鈴薯后，將濾液過(guò)濾到燒杯中，然后加葡萄糖15g和一定量的瓊脂(丸B中還要加入一定濃度的殼寡糖)，加水補(bǔ)足1000ml，水浴加熱使各藥品完全溶化并攪拌均勻，最后分裝到已準(zhǔn)備好的膏藥筒(丸藥殼)中。將其放置高壓鍋中滅菌(121℃，25min)。其中羧甲基纖維素鈉、甘油和瓊脂的用量按表1試驗(yàn)水平確定。表1凝膠各成分含量試驗(yàn)因素與水平表作為產(chǎn)黃青霉菌的載體，凝膠提供菌所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí)，也需粘附于樹(shù)體表面較長(zhǎng)時(shí)間。通過(guò)觀察和測(cè)定凝膠粘稠度、涂展性和潤(rùn)濕性，來(lái)判斷凝膠的優(yōu)劣，選擇最佳凝膠成分配比。凝膠藥物成分選擇和物理性質(zhì)優(yōu)劣評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)可參考本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種生物農(nóng)藥，其由膏A、丸B和巴布C組成，其中膏A和丸B所用凝膠由羧甲基纖維素鈉、甘油、瓊脂和葡萄糖制備而成，丸B的凝膠中還添加有一定濃度的殼寡糖并保存有產(chǎn)黃青霉菌活菌及代謝產(chǎn)物。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種生物農(nóng)藥，其由膏A、丸B和巴布C組成，其中膏A和丸B所用凝膠由羧甲基纖維素鈉、甘油、瓊脂和葡萄糖制備而成，丸B的凝膠中還添加有一定濃度的殼寡糖并保存有產(chǎn)黃青霉菌活菌及代謝產(chǎn)物。2.如權(quán)利要求1所述的生物農(nóng)藥，其中膏A和丸B所用凝膠在1000ml凝膠中羧甲基纖維素鈉的用量為20-40g，甘油的用量為10-30ml，瓊脂的用量為2-6g，葡萄糖的用量為10-20g。3.如權(quán)利要求2所述的生物農(nóng)藥，其中膏A和丸B所用凝膠在1000ml凝膠中羧甲基纖維素鈉的用量為40g，甘油的用量為20...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：馬強(qiáng)，張文鑫，喬國(guó)彪，董程明，莊霞，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：內(nèi)蒙古,15