一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用，涉及土壤酸化修復(fù)技術(shù)領(lǐng)域以及土壤重金屬污染治理領(lǐng)域。生物土壤修復(fù)劑由微生物菌群、土壤團(tuán)粒材料和天然培養(yǎng)基組成。微生物菌群主要是熒光假單胞菌H4活體，它在土壤酸化退化修復(fù)中破壞土壤病原菌，控制土壤中有益菌與有害菌之間的比例，天然培養(yǎng)基向熒光假單胞菌H4提供養(yǎng)分，維持熒光假單胞菌H4的活性，土壤團(tuán)粒材料改善土壤板結(jié)現(xiàn)象，將粉體狀土壤結(jié)構(gòu)改變成“蜂窩”結(jié)構(gòu)，提高修復(fù)后土壤的透氣性和保濕性，形成新的土壤生態(tài)環(huán)境，有利于土壤有益微生物菌群生存，促進(jìn)作物根系在土壤中的物質(zhì)交換，形成根系發(fā)達(dá)，降低土壤酸性，短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)耕地土壤的自然狀態(tài)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用
本專利技術(shù)涉及土壤酸化修復(fù)技術(shù)和重金屬污染治理
，具體而言，涉及一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
土壤酸化退化是指長(zhǎng)期大量施用化肥、化學(xué)農(nóng)藥和其他化學(xué)農(nóng)資產(chǎn)品造成的土壤退化現(xiàn)象，包括土壤板結(jié)、土壤酸值增大和作物病害加劇。近十年來，這種土壤現(xiàn)象已由點(diǎn)發(fā)展到面、由北向南、由平原向高海拔土壤快速發(fā)展，造成農(nóng)業(yè)作物欠收或絕收。土壤酸化退化的本質(zhì)是土壤微生物體系發(fā)生了徹底改變。這種土壤微生物體系的改變，造成了作物病害微生物增多且易于存活在土壤中，產(chǎn)生大量的有機(jī)酸，疊加了土壤pH降低。農(nóng)業(yè)部制定了“土壤調(diào)理劑”產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，旨在改變土壤物理性質(zhì)；也曾經(jīng)有人利用氯化苦進(jìn)行化學(xué)修復(fù)，均見效甚微。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的之一在于提供熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于位于中國(guó)武漢大學(xué)的中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，分類命名為PseudomonasfluorescensH4，保藏號(hào)為CCTCCNO:M2017052。熒光假單胞菌H4能破壞作物致病微生物平衡、分解出作物生長(zhǎng)所需的礦物質(zhì)和生物質(zhì)，改變土壤中的微生物體系，起到修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的作用，并且不對(duì)土壤造成二次污染。本專利技術(shù)的目的之二在于提供上述熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用。將熒光假單胞菌H4應(yīng)用于生物土壤修復(fù)劑的制備中，使制備得到的生物土壤修復(fù)劑保持熒光假單胞菌H4修復(fù)土壤的作用，同時(shí)加入有協(xié)同作用的土壤團(tuán)粒成分，可制備治理土壤板結(jié)的生物土壤修復(fù)劑。本專利技術(shù)的目的之三在于提供一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法。該方法制備的生物土壤修復(fù)劑菌體活性高，易于在水稻、煙葉、茶葉、魔芋、蔬菜、中藥材、小麥和水果種植土壤中培養(yǎng)，存活時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)上述田塊中的致病微生物進(jìn)行撲食或拮抗，具有效果明顯，適用區(qū)域廣，使用方便和適用作物品種諸多特點(diǎn)。本專利技術(shù)的目的之四在于提供一種生物土壤修復(fù)劑，其由上述生物土壤修復(fù)劑的制備方法制備而成。該生物土壤修復(fù)劑中土壤團(tuán)粒材料與菌體混合在一起，形成穩(wěn)定的微循環(huán)體系，更好地發(fā)揮修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的作用。本專利技術(shù)采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，該熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于位于中國(guó)武漢大學(xué)的中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，分類命名為PseudomonasfluorescensH4，保藏號(hào)為CCTCCNO:M2017052。上述熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用。一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法，其包括：將上述熒光假單胞菌H4進(jìn)行發(fā)酵，得到發(fā)酵液。用發(fā)酵液與土壤團(tuán)粒材料以及腐熟牦牛糞混合，得到生物土壤修復(fù)劑。本專利技術(shù)實(shí)施例的一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用的有益效果是：(1)本專利技術(shù)提供的熒光假單胞菌H4通過破壞作物致病微生物平衡、供應(yīng)有機(jī)物質(zhì)改善土壤的理化性質(zhì)、改善土壤生態(tài)系統(tǒng)的循環(huán)從而達(dá)到修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的目的，不對(duì)土壤造成二次污染，是一種修復(fù)土壤的主要微生物。(2)本專利技術(shù)提供的生物土壤修復(fù)劑的制備方法，通過該方法得到含有土壤團(tuán)粒材料和提供微生物養(yǎng)分天然培養(yǎng)基的生物土壤修復(fù)劑。(3)本專利技術(shù)提供的生物土壤修復(fù)劑包括土壤團(tuán)粒材料，這種材料與熒光假單胞菌H4能夠混合，形成穩(wěn)定的體系，促進(jìn)作物增產(chǎn)和提高作物品質(zhì)。具體實(shí)施方式為使本專利技術(shù)實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本專利技術(shù)實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行操作。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購(gòu)買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。下面對(duì)本專利技術(shù)實(shí)施例的一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用進(jìn)行具體說明。熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，該熒光假單胞菌H4于2017年2月20日在位于湖北省武漢市武昌區(qū)八一路299號(hào)武漢大學(xué)校內(nèi)的中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號(hào)為CCTCCNO:M2017052，分類命名為PseudomonasfluorescensH4。優(yōu)選地，上述耕地土壤為水稻種植土壤、煙葉種植土壤、茶葉種植土壤、魔芋種植土壤，蔬菜種植土壤、中藥材、小麥種植土壤或水果種植土壤中的任意一種。熒光假單胞菌H4為革蘭陰性菌，細(xì)胞呈桿狀。熒光假單胞菌H4通過破壞作物致病微生物平衡、供應(yīng)有機(jī)物質(zhì)改善土壤的理化性質(zhì)、土壤生態(tài)系統(tǒng)的循環(huán)，從而達(dá)到修復(fù)土壤的作用，不對(duì)土壤造成二次污染。并且其具有分解出水稻、煙葉、茶葉、魔芋、蔬菜、中藥材、小麥和水果等作物生長(zhǎng)所需礦物質(zhì)和生物質(zhì)的功能，能夠提高上述作物產(chǎn)量和改善品質(zhì)。上述熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用。將熒光假單胞菌H4應(yīng)用于生物土壤修復(fù)劑的制備中，使制備得到的生物土壤修復(fù)劑既保持熒光假單胞菌H4修復(fù)土壤的作用，同時(shí)加入有協(xié)同作用的土壤團(tuán)粒材料和培養(yǎng)微生物的天然培養(yǎng)基材料，得到效果明顯的生物土壤修復(fù)劑。一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法，其包括：將上述熒光假單胞菌H4進(jìn)行發(fā)酵，得到發(fā)酵液。用發(fā)酵液與土壤團(tuán)粒材料及腐熟牦牛糞混合，得到生物土壤修復(fù)劑。優(yōu)選地，上述發(fā)酵液的OD600值為1.0-2.0，并且發(fā)酵液采用四級(jí)培養(yǎng)得到。四級(jí)培養(yǎng)分別為活化培養(yǎng)、一級(jí)發(fā)酵、二級(jí)發(fā)酵和三級(jí)發(fā)酵。通過該方式培養(yǎng)得到活菌體，既大量擴(kuò)繁了菌體，又使得菌體保持旺盛的生長(zhǎng)活力。優(yōu)選地，上述土壤團(tuán)粒材料為聚丙烯酰胺，并且聚丙烯酰胺的聚合度為1100-1300。優(yōu)選地，聚丙烯酰胺為無菌狀態(tài)，并且混合過程在無菌環(huán)境下進(jìn)行。聚丙烯酰胺采用授權(quán)公告號(hào)為CN204208070U的技術(shù)專利提供的一種有機(jī)肥原料消毒機(jī)處理，以保持無菌狀態(tài)。優(yōu)選地，聚丙烯酰胺與發(fā)酵液的質(zhì)量之比為0.1-0.5:1。聚丙烯酰胺(PAM)由丙烯酰胺/丙烯酸鹽交聯(lián)共聚而成。聚丙烯酰胺可分為陰離子、陽(yáng)離子和非離子等類型。陽(yáng)離子網(wǎng)狀聚丙烯酰胺是一種高吸水性樹脂，可用做農(nóng)田保水劑。陰離子線型聚丙烯酰胺因其分子鏈長(zhǎng)等特征，用作土壤改良劑，在控制土壤侵蝕、防止水土流失方面起到了重要的作用。聚丙烯酰胺可有效的改善土壤結(jié)構(gòu)、將板結(jié)土壤形成團(tuán)粒結(jié)構(gòu)，增加土壤的透氣性和持水量、降低土壤容重、提高滲透率、提高土壤抗蝕能力，進(jìn)而提高作物產(chǎn)量。概括說來，聚丙烯酰胺具有保土、保水、保肥和增產(chǎn)的四大效應(yīng)。優(yōu)選地，對(duì)酸性土壤施用含陽(yáng)離子型聚丙烯酰胺的生物土壤修復(fù)劑，對(duì)堿性土壤施用含陰離子型聚丙烯酰胺的生物土壤修復(fù)劑。優(yōu)選地，腐熟牦牛糞與發(fā)酵液的質(zhì)量之比為10-20:1。優(yōu)選地，生物土壤修復(fù)劑中水的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為35％-40％。優(yōu)選地，上述腐熟牦牛糞為無菌腐熟牦牛糞，并且整個(gè)混合過程在無菌環(huán)境下進(jìn)行。腐熟牦牛糞為熒光假單胞菌的長(zhǎng)期存活提供條件。無菌腐熟牦牛糞以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行混合均是為了保證熒光假單胞菌H4的活力。優(yōu)選地，上述無菌腐熟牦牛糞同過以下方法制備而成：將牦牛糞干餅破碎成2mm以下粉體，然后噴灑水分至牦牛糞粉體中水分的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為50-80％，常溫條件下自然發(fā)酵10-15天即得到腐熟牦牛糞。腐熟牦牛糞采用授權(quán)公告號(hào)為CN204208070U的技術(shù)專利提供的一種有機(jī)肥原料消毒機(jī)處理，得到的無菌腐熟牦牛糞備用。牦牛糞腐熟過程中，牦牛糞成分轉(zhuǎn)化成作物生長(zhǎng)需要小分子糖本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，其特征在于，所述熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCC?NO:M?2017052。

【技術(shù)特征摘要】
1.熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，其特征在于，所述熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCCNO:M2017052。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，其特征在于，所述耕地土壤為水稻種植土壤、煙葉種植土壤、茶葉種植土壤、魔芋種植土壤、蔬菜種植土壤、中藥材種植土壤、小麥種植土壤或水果種植土壤中的任意一種。3.熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCCNO:M2017052。4.一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法，其特征在于，其包括：將熒光假單胞菌H4進(jìn)行發(fā)酵，得到發(fā)酵液；所述熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCCNO:M2017052；用所述發(fā)酵液與土壤團(tuán)粒材料及腐熟牦牛糞混合，得到生物土壤修復(fù)劑。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張艷，高勇，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：成都康巴金生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：四川,51