杞菊地黃丸的使用于視網(wǎng)膜缺血及其相關(guān)疾病、病況或病狀的治療制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)是關(guān)于一種組合物用于制備治療視網(wǎng)膜缺血或其相關(guān)疾病、病況或病癥的藥物的用途，其中所述組合物包含一杞菊地黃丸，其中所述杞菊地黃丸包括一熟地黃、一山茱萸、一山藥、一茯苓、一牡丹皮、一澤瀉、一枸杞及一菊花。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
杞菊地黃丸的使用于視網(wǎng)膜缺血及其相關(guān)疾病、病況或病狀的治療
本專利技術(shù)是關(guān)于杞菊地黃丸(一種傳統(tǒng)中國處方用藥，其是由熟地黃、山茱萸、山藥、茯苓、牡丹皮、澤瀉、枸杞及菊花所組成)的使用于視網(wǎng)膜缺血的治療上。本專利技術(shù)更具體地涉及一包含杞菊地黃丸的組合物的使用用于視網(wǎng)膜缺血及其相關(guān)疾病、病況或病狀的治療及/或預(yù)防。
技術(shù)介紹
視網(wǎng)膜血管阻塞(retinalvascularocclusion)、青光眼(glaucoma)、糖尿病性視網(wǎng)膜病(diabeticretinopathy)和老年性黃斑部病變(agerelatedmaculardegeneration；AMD)都與視網(wǎng)膜缺血相關(guān)。而視網(wǎng)膜血管阻塞包括如中心或分支視網(wǎng)膜動脈阻塞(centralorbranchretinalarteryocclusion；CRAO或BRAO)。該定義的眼部病癥經(jīng)常導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥。所以，視網(wǎng)膜缺血性損傷的治療是非常重要的。無軸突細(xì)胞(Amacrines)及其神經(jīng)元突起(neuronalprocesses)易受缺血再灌注(ischemiaplusreperfusion；I/R)的影響。在缺血再灌注(I/R)后，米勒細(xì)胞(Müllercell)內(nèi)的中間絲蛋白(vimentin)/膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein；GFAP)的免疫標(biāo)記會增強?；|(zhì)金屬蛋白酶9(Matrixmetalloproteinase-9；MMP-9)是蛋白水解酶并能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)。缺血也已顯示會導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglioncell；RGC)的死亡，其與MMP-9的量增加有關(guān)。另一方面，第一型血紅素氧化酶(hemeoxygenase-1；HO-1)是一參與對氧化壓力(oxidativestress)及缺氧(hypoxia)的進行反應(yīng)的誘導(dǎo)型異構(gòu)物。HO-1的表達增加似乎能夠藉由抗氧化活性提供一對視網(wǎng)膜缺血及/或老年性黃斑部病變的保護作用。有絲分裂活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinases；MAPKs)是訊息傳遞路徑上關(guān)鍵性蛋白激酶。此外，MAPK亞科的主要成員(如JNK、p38及ERK1/2)與神經(jīng)損傷及疾病有關(guān)。因MAPK蛋白(p38)會被各種壓力(包括缺血和氧化壓力)所刺激，故已顯示與細(xì)胞凋亡過程有關(guān)?！拌骄盏攸S丸”(Chi-Ju-Di-Huang-Wan；CJDHW；臺灣臺北的順天堂藥廠股份有限公司)是中國傳統(tǒng)的中草藥配方，其由“六味地黃丸”配方(熟地黃(RehmanniaeRadixPreparata)、山茱萸(CorniFructus)、山藥(RhizomaDiocoreae)、茯苓(Poria)、牡丹皮(CortexMoutanRedicis)及澤瀉(AlismatisRhizoma))加上枸杞(FructusLycii)及菊花(ChrysanthemiFlos)所組成。有時，將蜂蜜額外添加于配方中以加強風(fēng)味，并讓老人和小孩容易吞服(ChangYH,LinHJ,LiWC:ClinicalevaluationofthetraditionalchineseprescriptionChi-Ju-Di-Huang-Wanfordryeye.PhytotherRes2005,19:349-354)?！拌骄盏攸S丸”據(jù)報導(dǎo)能有效治療干眼癥?！拌骄盏攸S丸”是淚膜(tearfilm)的有效穩(wěn)定劑，并降低角膜上皮的異常情況。然而，杞菊地黃丸作用的相關(guān)治療機制仍然未知。配方中已知活性化合物包括抗氧化劑玉米黃素(zeaxanthin)和葉黃素(lutein)(其存在于枸杞和菊花中)、和海藻糖(trehalose)(其出現(xiàn)于熟地黃)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)探討杞菊地黃丸(Chi-Ju-Di-Huang-Wan；CJDHW)是否能夠減輕視網(wǎng)膜缺血性損傷，以及藉由電生理、視網(wǎng)膜厚度、膽堿乙酰基轉(zhuǎn)移酶(Cholineacetyltransferase；ChAT)免疫組織化學(xué)染色、中間絲蛋白(vimentin)/膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(Glialfibrillaryacidicprotein；GFAP)免疫組織化學(xué)染色(以米勒細(xì)胞(Müllercell)為指標(biāo))、熒光金逆行視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGC)的標(biāo)記、TUNEL染色(針對凋亡細(xì)胞)、Bcl-2/HO-1/磷酸化-p38(P-p38)/MMP-9蛋白表達量分析及以酶譜(zymography)計算MMP-9的活性、以及測量Thy-1和MMP-9的mRNA表達量以評估其功效。所定義的視網(wǎng)膜缺血性改變包括以下特征：視網(wǎng)膜電位圖(ERG)的b波振幅的減小，內(nèi)層視網(wǎng)膜厚度變薄，膽堿乙酰基轉(zhuǎn)移酶(Cholineacetyltransferase；ChAT)免疫標(biāo)記減少，中間絲蛋白/膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(Glialfibrillaryacidicprotein；GFAP)的免疫反應(yīng)性增強，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層出現(xiàn)更多的凋亡細(xì)胞，以及少數(shù)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。此外，在缺血性視網(wǎng)膜上分別發(fā)現(xiàn)Thy-1及基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)的mRNA表達量減少和增加。更進一步，當(dāng)?shù)谝恍脱t素氧化酶(hemeoxygenase-1；HO-1)、磷酸化p38(P-p38)、有絲分裂活化蛋白質(zhì)激酶(mitogen-activatedproteinkinase；MAPK)及MMP-9增加時，B細(xì)胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的蛋白表達量降低。重要的是，以4.2g/kg/天的杞菊地黃丸(CJDHW)先處理可顯著地調(diào)節(jié)缺血誘發(fā)的變化。特別是，CJDHW和2nmole的SB203580(p38MAPK抑制劑)兩者一起可減弱與缺血有關(guān)的P-p38和MMP-9的增加。本專利技術(shù)藉由視網(wǎng)膜電位圖(electroretinography)(b波指標(biāo)性米勒細(xì)胞(Müllercell)和雙極細(xì)胞(bipolarcell))、免疫組織化學(xué)染色(ChAT標(biāo)記的無軸突細(xì)胞、中間絲蛋白/GFAP標(biāo)記Müller細(xì)胞、熒光金標(biāo)記的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGC))、組織病理學(xué)(視網(wǎng)膜厚度測量、RGC層中的TUNEL陽性細(xì)胞)、免疫印跡法(Bcl-2、HO-1、P-p38及MMP-9)和實時PCR分析(Thy-1和HO-1)證實大鼠的視網(wǎng)膜各種缺血性改變。重要的是，在缺血再灌注(I/R)前以杞菊地黃丸(CJDHW)處理可明顯調(diào)節(jié)所有這些定義的缺血性相關(guān)特征。CJDHW藉由保留視網(wǎng)膜電生理功能(圖1A至1B)，抵消內(nèi)層視網(wǎng)膜厚度的減少或膽堿神經(jīng)元死亡(圖2A至2J和圖3A至3J；表2和3)，減少米勒細(xì)胞、中間絲蛋白/GFAP神經(jīng)膠細(xì)胞活化(圖4A至4R)，使RGC層的凋亡細(xì)胞數(shù)量下降(表4)以及鈍化Thy-1的mRNA的下調(diào)(圖6和表6)和使通過熒光金標(biāo)記所偵測到RGC死亡下降(圖5A至5J；表5)以保護抵抗視網(wǎng)膜缺血性損傷。如目前免疫印跡法分析結(jié)果(圖7和表7)，CJDHW是能夠保護缺血性損傷的視網(wǎng)膜細(xì)胞，如無軸突細(xì)胞和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(圖3A至3J，圖5A至5J和圖6；表3、5及6)；因此它很可能是，至少在某一部分，因為HO-1過度表達與抗氧化作用有關(guān)(圖7和表7)。最重要的是，通過CJDHW和SB203580(p38本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種組合物用于制備治療視網(wǎng)膜缺血或其相關(guān)疾病、病況或病癥的藥物的用途，其中所述組合物包含一杞菊地黃丸，其中所述杞菊地黃丸包括一熟地黃（Rehmanniae?Radix?Preparata）、一山茱萸（Corni?Fructus）、一山藥（Rhizoma?Diocoreae）、一茯苓（Poria）、一牡丹皮（Cortex?Moutan?Redicis）、一澤瀉（Alismatis?Rhizoma）、一枸杞（Fructus?Lycii）及一菊花（Chrysanthemi?Flos）。

【技術(shù)特征摘要】
2015.11.27 US 14/953,0261.一種組合物用于制備治療視網(wǎng)膜缺血或其相關(guān)疾病、病況或病癥的藥物的用途，其中所述組合物包含一杞菊地黃丸，其中所述杞菊地黃丸包括一熟地黃（RehmanniaeRadixPreparata）、一山茱萸（CorniFructus）、一山藥（RhizomaDiocoreae）、一茯苓（Poria）、一牡丹皮（CortexMoutanRedicis）、一澤瀉（AlismatisRhizoma）、一枸杞（FructusLycii）及一菊花（ChrysanthemiFlos）。2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所述組合物進一步包含一蜂蜜。3.如權(quán)利要求1所述的用途，其中所述視網(wǎng)膜缺血的相關(guān)疾病、病況或病癥包含視網(wǎng)膜血管阻塞（retinalvascularocclusion）、青光眼（glaucoma）、糖尿病性視網(wǎng)膜?。╠iabeticretinopathy）或一老年性黃斑部病變（ager...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：趙效明，
申請(專利權(quán))人：趙效明，
類型：發(fā)明
國別省市：中國臺灣,71