一種抗結核桿菌化合物及其制備方法與應用技術

本發明專利技術公開了本發明專利技術公開了一種抗結核桿菌化合物及其制備方法與應用，一種化合物，其結構式為：

Anti tubercle bacillus compound, preparation method and application thereof

The invention discloses an anti tubercle bacillus compound, a preparation method and an application thereof:

【技術實現步驟摘要】
一種抗結核桿菌化合物及其制備方法與應用
本專利技術涉及一種抗結核桿菌化合物及其制備方法與應用。
技術介紹
結核病(Tuberculosis，TB)是由結核分枝桿菌(MycobacteriumTuberculosis，MTB)引起的一種慢性致死性疾病，是危害人類健康和導致人類死亡的重大傳染性疾病，其致死率僅次于艾滋病(Ac-quiredImmunodeficiencysyndrome，AIDS)。由于抗結核藥物的大量使用和抗結核作用位點的突變，導致耐多藥結核病(multidrug-resistanttuberculosis，MDR-TB)不斷出現，再加上近年來患有艾滋病人口數量的增長，使結核病與人類免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus，HIV)并發發病率急劇增加，這些問題的出現都給結核病的治療帶來巨大的挑戰，這無疑說明結核病已經成為人類健康的重大威脅，亟待解決。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種抗菌化合物及其制備方法與應用。本專利技術所提供的化合物如式Ⅰ所示。所述化合物在制備抗結核桿菌藥物中的應用也屬于本專利技術的保護范圍。本專利技術的再一個目的是提供一種抗菌藥物。本專利技術所提供的抗菌藥物的活性成分為以上式Ⅰ所示的化合物。在本專利技術中，所述抗菌藥物為抗結核桿菌藥物。本專利技術的另一個目的是提供所述化合物的制備方法。本專利技術所提供的所述化合物的制備方法，是對獨山瓜馥木干燥根進行甲醇回流提取，獲得獨山瓜馥木甲醇浸膏，再對所得甲醇浸膏進行分離和純化，從而得到所述化合物。進一步，所述甲醇浸膏是按照如下方法制備得到的:將所述獨山瓜馥木干燥根切塊，加入2倍重量的甲醇，回流提取3次，每次1.5h，去除甲醇(如用旋轉蒸發儀減壓回收)，水浴蒸干，獲得所述獨山瓜馥木甲醇提取物。在上述方法中，所述分離和純化的方法具體可包括如下步驟:(a)向所述甲醇提取物中加水，用可溶解所述化合物的有機溶劑進行萃取，收集有機相，去除有機溶劑，獲得含有權利要求1所述化合物的萃取物；(b)將所述萃取物依次經過所述硅膠柱層析A、硅膠柱層析B、制備薄層色譜，分離得到以上式Ⅰ所示的化合物。在步驟(a)中，所述可溶解所述化合物的溶劑可為乙酸乙酯。步驟(b)中，進行所述硅膠柱層析A時，采用的硅膠粒度為200-300目，洗脫體積為5500mL，洗脫體積的第1-500mL采用的洗脫液由體積比為10:1的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第501-1000mL采用的洗脫液由體積比為10:2的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第1001-1500mL采用的洗脫液由體積比為10:3的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的1501-2000mL采用的洗脫液由體積比為10:4的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的2001-2500mL采用的洗脫液由體積比為10:5的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的2501-3000mL采用的洗脫液由體積比為10:6的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第3011-3500mL采用的洗脫液由體積比為10:7的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第3501-4000mL采用的洗脫液由體積比為10:8的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第4001-4500mL采用的洗脫液由體積比為10:9的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第4501-5000mL采用的洗脫液由體積比為10:10的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第5001-5500mL采用的洗脫液乙酸乙酯洗脫而成。在步驟(b)中，進行所述硅膠柱層析B時，采用的硅膠粒度可為200-300目，洗脫液由體積比為10:9的石油醚和乙酸乙酷混合而成，洗脫體積1000mL。進行所述制備薄層色譜時，采用的吸附劑為硅膠，硅膠粒度可為200-400目，展開劑由體積比為24:1的二氯甲烷和甲醇混合而成。在本專利技術的一個實施例中，進行所述制備薄層色譜時，采用的硅膠為GF254型號的硅膠板(購自青島海洋化工)。在上述方法中，步驟(a)可為:向所述甲醇提取物中加水，用石油醚進行萃取，收集水相；再用乙酸乙酯對所述水相進行萃取，收集有機相，即獲得所述“含有所述化合物的萃取液”。在本專利技術的一個實施例中，步驟(a)更加具體為:向所述甲醇提取物中加入1倍重量的水，攪拌得到水懸液；再向所述水懸液中加入等體積的石油醚，萃取30分鐘，萃取三次，收集水相；再向所述水相中加入等體積的乙酸乙酯，萃取30分鐘，萃取三次，收集有機相，去除有機溶劑，蒸干即獲得所述“含有所述化合物的萃取物”。在上述方法中，步驟(b)具體可為:將所述萃取物進行所述硅膠柱層析A，收集中間產物Fra.I，所述中間產物Fra.I在以體積比為10：9的石油醚和乙酸乙酯混合液作為展開劑，以粒度為100-200目的硅膠作為固定相的薄層層析(操作溫度27℃)中，比移值(Rf)為0.30-0.42；再將所述中間產物Fra.I進行所述硅膠柱層析B，收集中間產物Subfra.I3，所述中間產物Subfra.I3在以體積比為10:9的石油醚和乙酸乙酯的混合液作為展開劑，以粒度為200-300目的硅膠作為固定相的薄層層析(操作溫度27℃)中，比移值(Rf)為0.28-0.35；再將所述中間產物Subfra.I3進行所述制備薄層色譜，收集比移值(Rf)為0.27的樣品，獲得以上式Ⅰ所示的化合物。其中，所述中間產物Fra.I為在進行所述硅膠柱層析A時，以體積比為10:9的石油醚和乙酸乙酯混合液作為洗脫液進行洗脫所得，對應洗脫體積的4001-4500mL。所述中間產物Subfra.I3為在進行所述硅膠柱層析B時，以體積比為10:9的石油醚和乙酸乙酯的混合液作為洗脫液進行洗脫所得，對應洗脫體積的401-600mL。更加具體的，步驟(b)中，在進行所述硅膠柱層析A時，采用的層析柱的規格為60X900mm，柱溫為27℃，所用硅膠為1.8kg，上樣量為36g所述萃取物，流速為*ml/min，在進行所述硅膠柱層析B時，采用的層析柱的規格為20X900mm，柱溫為27℃，所用硅膠為900g，上樣量為1.5g所述中間產物Fra.I，流速為*ml/min。在進行所述制備薄層色譜時，采用的薄層板規格為20X20cm，操作溫度27℃；上樣量0.5ml；展開時間1h。實驗證明，本專利技術提供的化合物結構全新，具有較好的抗結核桿菌活性，適宜于抗菌先導化合物研究或制備抗菌藥物。本專利技術所用的天然產物活性成分制備方法選擇了能產生具有優異抗菌活性化合物的獨山瓜馥木(Fissistigmacavaleriei)，提取方法成熟，工藝簡便，所得產物產率高，經核磁共振檢測，其結構正確。附圖說明圖1為本專利技術所述TLC圖；圖2位本專利技術所述活性測試圖；附圖說明：圖1從左到右依次為乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和萃取后剩余物；圖2從左至右依次為：乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、萃取后剩余物。具體實施方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。獨山瓜馥木干燥根(Fissistigmacavaleriei):采自貴州省黔東南州獨山縣。獨山瓜馥木干燥根(Fissistigmacavaleriei)憑證標本已于2011年0本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種化合物如式Ⅰ

【技術特征摘要】
1.一種化合物如式Ⅰ2.權利要求1所述化合物在制備抗結核藥物中的應用。3.一種抗結核藥物，其活性成分為權利要求1中式Ⅰ所示的化合物。4.根據權利要求2所述的應用或權利要求3所述的抗結核藥物，其特征在于:所述抗菌藥物為抗結核藥物。5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于:所述細菌為結核分枝桿菌。6.權利要求1所述化合物的制備方法，是對獨山瓜馥木干燥根進行甲醇回流提取，獲得獨山瓜馥木甲醇浸膏，再對所得甲醇浸膏進行分離和純化，從而得到所述化合物。7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于:所述分離和純化的方法包括如下步驟:(a)向所述甲醇浸膏中加5％的甲醇水溶液，用可溶解權利要求1所述化合物的有機溶劑進行萃取收集有機相，去除有機溶劑，獲得含有權利要求1所述化合物的萃取物；(b)將所述萃取物依次經過所述硅膠柱層析A、硅膠柱層析B、制備色譜分離得到權利要求1中式Ⅰ化合物。8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于:步驟(a)中，所述可溶解權利要求1所述化合物的溶劑為乙酸乙酯。9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于:步驟(b)中，進行所述硅膠柱層析A時，采用的硅膠粒度為200-300目，洗脫體積為5500mL，洗脫體積的第1-500mL采用的洗脫液由體積比為10:1的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第501-1000mL采用的洗脫液由體積比為10:2的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的第1001-1500mL采用的洗脫液由體積比為10:3的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的1501-2000mL采用的洗脫液由體積比為10:4的石油醚和乙酸乙酯混合而成，洗脫體積的2001-2500mL采用的洗脫液由體積比為10:5的石油醚和乙酸乙酯混合...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊再昌，
申請(專利權)人：貴州大學，
類型：發明
國別省市：貴州,52