化合物10058?F4的新用途制造技術

本發明專利技術涉及一種化合物10058?F4的新用途。試驗表明，該化合物10058?F4具有明顯的保護神經細胞，促進神經細胞在各種神經系統疾病損害情況下的存活作用。因此，可以用于制備治療神經系統疾病的藥物。所制備的藥物可以是以該化合物為活性成分，且含有藥學上可以接受的載體的組合物，活性成分的重量含量為0.1?99.95％。藥物劑型可以是片劑、粉劑、粒劑和注射劑等。

New use of compound 10058 F4

The invention relates to a new application of compound 10058 F4. Experiments show that the compound 10058 F4 has neuroprotective significantly, promote nerve cell survival in a variety of diseases of the nervous system damage case. Therefore, it can be used in the preparation of drugs for the treatment of nervous system diseases. The prepared drug can be used as the active component and composition containing a pharmaceutically acceptable carrier, the active component content is 0.1 99.95%. The dosage forms can be tablets, powders, granules, injections, etc..

【技術實現步驟摘要】
化合物10058-F4的新用途
本專利技術涉及一種化合物10058-F4新用途。
技術介紹
神經系統的結構復雜性及神經元死亡后的不可替代性決定了在所有神經系統疾病治療的終極目標都是盡可能的挽救神經元的存活，其直接關系到臨床療效和病人長期生存的質量。目前，缺血性中風，神經退行性病的發病率很高，常會嚴重剝奪患者的勞動和生活自理能力，已成為困擾國民生活和國家醫療財政的重大健康問題。在這些神經系統疾病的發生和進展中神經元死亡無疑是重要的病理改變。因此目前對于神經元死亡的分子機制的研究是國內外研究的一個熱點，同時研究如何阻止神經元的死亡也是治療上述疾病的重要手段。缺血性中風和神經退行性疾病是兩大類主要致死和致殘性神經系統疾病，前者治療的關鍵是挽救缺血-再灌注損傷區域的神經元，后者亦是阻止新病灶的發展并以挽救神經元為最終目的。目前發現腦缺血再灌注損傷,谷氨酸興奮性毒性及各種炎性反應導致的神經死亡的主要原因之一是由聚腺苷酸二磷酸核糖轉移酶-1（PARP-1）過度激活介導的區別于凋亡和壞死的細胞死亡，又稱Parthanatos（PARP-1依賴性細胞死亡）。發生在神經細胞的parthanatos，可以用DNA烷化劑甲基硝基亞硝基胍（N-Methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine，MNNG)處理腫瘤細胞Hela細胞得到相同的結果，所有的細胞都通過PARP-1的過度激活而造成parthanatos死亡。我們利用這個細胞模型篩選化合物庫發現化合物10058-F4可以阻止MNNG處理的Hela的死亡,化合物10058-F4的分子式及英文描述分別為C12H11NOS2，(Z,E)-5-(4-Ethylbenzylidine)-2-thioxothiazolidin-4-one。進而我們發現其同樣能阻止神經細胞的死亡，因為NMDA（N-methyl-D-asparticacid，N-甲基-D-天冬氨酸）處理神經細胞可以在培養細胞水平上模擬缺血性中風及神經退行性病神經細胞死亡的過程，而500uM的NMDA處理不能殺死加了化合物10058-F4的神經細胞。因此化合物10058-F4可以通過阻止缺血性中風、神經退行性疾病等疾病中的parthanatos細胞死亡來治療這些神經系統疾病。
技術實現思路
本專利技術目的之一在于提供一種化合物10058-F4在制備治療神經系統疾病藥物中的應用。本專利技術的目的之二在于提供化合物10058-F4在制備阻止神經細胞的PARP-1依賴性細胞死亡藥物中的應用。本專利技術的目的之三在于提供化合物10058-F4作為神經細胞保護劑在制備治療缺血性中風藥物中的應用。本專利技術的目的之四在于提供化合物10058-F4作為神經細胞保護劑在制備治療神經退行性疾病藥物中的應用。化合物10058-F4的結構式為：。試驗表明，該化合物10058-F4具有明顯的保護神經細胞，促進神經細胞在各種神經系統疾病損害情況下的存活作用。因此，可以用于制備治療神經系統疾病的藥物。所制備的藥物可以是以該化合物為活性成分，且含有藥學上可以接受的載體的組合物，活性成分的重量含量為0.1-99.95％。藥物劑型可以是片劑、粉劑、粒劑和注射劑等。附圖說明圖1，MNNG處理Hela細胞（10倍相差顯微鏡）。左側為二甲基亞砜（DMSO）對照組，細胞正常存活。中間為Hela細胞經50uMMNNG處理15分鐘再培養24小時后，100%的細胞都已經死亡并懸浮在培養基中。圖2，MNNG處理不能殺死加了化合物10058-F4的Hela細胞。(A)20倍相差顯微鏡下典型圖片顯示加了10uM的化合物10058-F4的Hela細胞經50uMMNNG處理15分鐘再培養24小時后細胞基本不死（右上圖），對照組的Hela細胞經同樣條件處理后細胞完全死亡（右下圖）。（B）柱狀統計圖說明經4次重復實驗后統計經50uMMNNG處理15分鐘再培養24小時后，加了100uM的化合物10058-F4的Hela細胞與對照組的存活率，差異極其顯著，Mean±SEM,P<0.001。圖3，500uM的NMDA（N-methyl-D-asparticacid，N-甲基-D-天冬氨酸）處理不能殺死加了化合物10058-F4的神經細胞。(A)PI/Hochest活細胞染色典型圖片顯示加了100uM的化合物10058-F4的神經細胞經500uMNMDA處理15分鐘再培養24小時后細胞基本不死，對照組（加DMSO組）的神經細胞經同樣條件處理后細胞大部分完全死亡，顯示為PI染色細胞增多。（B）柱狀統計圖說明經4次重復實驗后統計經500uMNMDA處理15分鐘再培養24小時后，加了100uM的化合物10058-F4的神經細胞與對照組的存活率，差異極其顯著，Mean±SEM,P<0.001。具體實時方式下面的實施例可以使本專業技術人員更全面地理解本專利技術，但不以任何方式限制本專利技術。實施例1：Hela細胞的培養及MNNG的處理Hela細胞用含10%胎牛血清的DMEM正常傳代培養，待其長到90%融合度時，用50uMMNNG37度細胞培養箱中處理15分鐘（對照組加等體積二甲基亞砜DMSO，篩選組或處理組加溶于DMSO的化合物），換回正常培養基再培養24小時后，對照組100%的細胞都已經死亡并懸浮在培養基中。實施例2：神經細胞的培養C57BL6小鼠，胎鼠（E12-14）取出大腦皮層組織，在解剖液中先剪碎，用0.125%胰蛋白酶在37℃孵育30min，移入接種液（MEM含1%谷氨酰胺，另加入10%馬血清），停止消化，并洗去胰蛋白酶液，用細口吸管吹打細胞懸液，使其充分分散，如此多次，待沉淀后吸出上層細胞懸液，計數，預置細胞密度，移入接種液接種于預先涂有多聚賴氨酸的康寧12孔培養板，隔夜換維持培養液（MEM中含5%馬血清，1%谷氨酰胺）每周換液兩次，每次換1/2。培養3-5天后，用阿糖胞苷，或5-FU抑制神經膠質細胞的生長。實施例3：神經細胞存活實驗具體實驗過程為：取實施例2中的小鼠神經細胞，培養兩周后，用500uMNMDA37度細胞培養箱中處理15分鐘（對照組加等體積二甲基亞砜DMSO，處理組加溶于DMSO的化合物），換回正常培養基再培養24-48小時。實施例3：Hoechst/PI雙染檢測神經細胞壞死因為壞死細胞細胞膜的完整性被破壞，細胞膜的通透性增強，因此進入壞死細胞中的Hoechst33342與PI染料比正常細胞的多。而PI等染料是不能進入細胞膜完整的活細胞中，即正常細胞在不經固定的情況下對這些染料是拒染，壞死細胞由于膜完整性在早期即已破損，可被這些染料染色。根據這些特性，用Hoechst33342結合PI等染料對壞死細胞進行雙染色，就可在熒光顯微鏡上將正常細胞和壞死細胞區別開來，并可以標定細胞總數目與壞死細胞數目。正常細胞為高藍色/低紅色（Hoechst33342+/PI-），壞死細胞為高藍色/高紅色（Hoechst33342+/PI++）。通過這種方法對壞死神經細胞進行檢測，并統計存活率。具體實驗過程為：取實施例3中的小鼠神經細胞，使用凱基生物的“KGA-212熒光Hoechst33342/PI雙染檢測試劑盒。終止培養后吸除培養液，用冷BufferA洗滌細胞二次，滴加150μl本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種化合物10058?F4在制備治療神經系統疾病藥物中的應用。

【技術特征摘要】
1.一種化合物10058-F4在制備治療神經系統疾病藥物中的應用。2.一種10058-F4在制備阻止神經細胞的PARP-1依賴性細胞死亡藥物中的應用。3.一種...

【專利技術屬性】
技術研發人員：徐曉輝，趙偉乾，崔曉軒，馬凡斐，
申請(專利權)人：上海大學，
類型：發明
國別省市：上海,31