四氫異喹啉-3-甲酰-K(GRPAK)RGDV,其合成,活性及應用制造技術

本發明專利技術公開下式的N?(3S?6,7?二羥基?1,1?二甲基?1,2,3,4?四氫異喹啉?3?甲酰)?Lys(Gly?Arg?Pro?Ala?Lys)?Arg?Gly?Asp?Val,公開了它的制備方法，公開了它的抗血栓活性，公開了它的溶血栓活性，公開了它治療腦缺血大鼠的作用，因而本發明專利技術公開了它在制備抗血栓藥物,溶血栓藥物和治療缺血性中風藥物中的應用。

-K four (GRPAK) RGDV, -3-, its synthesis, activity and Application

The invention discloses a formula of N (3S 6,7 1,1 two hydroxy two methyl four 1,2,3,4 isoquinoline 3 formyl) Lys (Gly Arg Pro Ala Lys Arg Gly Asp) Val, discloses the preparation method, open its antithrombotic activity, discloses its thrombolytic activity, discloses it for the treatment of cerebral ischemia rats, thus the invention discloses it in preparing antithrombotic drugs, application of thrombolytic drugs and drugs in the treatment of ischemic stroke.

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val,涉及它的制備方法，涉及它的抗血栓活性，涉及它的溶血栓活性，涉及它治療腦缺血大鼠的作用，因而本專利技術涉及它在制備抗血栓藥物,溶血栓藥物和治療缺血性中風藥物中的應用。
技術介紹
缺血性中風是一類較常見且危害嚴重的腦血管疾病，特點是發病率高、病死率高、致殘率高和復發率高。目前臨床治療缺血性中風面臨沒有有效藥物的現實，尤其中風面4h以上的患者非死即殘。專利技術對中風面4h以上的患者有效的藥物是臨床的重要需求。專利技術人曾經公開式II的咪唑啉化合物在中風面24h的大鼠缺血性中風模型上，顯示優秀療效。即連續靜脈注射6天式II的咪唑啉化合物，每天1次，首次劑量為5μmol/kg，后5次的劑量為2μmol/kg具有優秀療效。式中aa1和aa2可為同時存在,aa1存在但aa2不存在,或同時不存在；當aa1和aa2同時存在時,aa1為R(Arg),且aa2為G(Gly),A(Ala)或Q(Gln)；當aa1存在但aa2不存在時,aa1為R(Arg)；aa3可為S(Ser),V(Val)或F(Phe)。由于式II的咪唑啉化合物的2-位是4-氧乙酰-Lys。而該Lys的側鏈氨基和主鏈羧基分別與RGD抗血栓四肽及ARPAK溶栓肽相連接,所以結構比較復雜需要簡化。專利技術人經過3年實驗研究，發現用3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰基代替上式中的1-取代苯基咪唑啉基,用Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val十肽基代替上式中的肽基可以獲得療效好的意想不到的技術效果。按照這個發現，專利技術人提出了本專利技術。
技術實現思路
1.本專利技術的內容之一是提供下式的N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val2.本專利技術的內容之二是提供N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的制備方法,該方法由以下方法構成:(1)按照標準方法制備Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBz；(2)按照標準方法制備Gly-Arg(NO2)-Pro-Als-Lys(Z)-OBz；(3)制備3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸；(4)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-OBzl；(5)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)；(6)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(7)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(8)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys[Gly-Arg(NO2)-Pro-Als-Lys(Z)-OBz]-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(9)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Als-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val。3.本專利技術的內容之三是評價N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的抗血栓活性。4.本專利技術的內容之四是評價N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的溶血栓活性。5.本專利技術的內容之五是評價N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val在腦缺血24h后治療腦缺血的活性。附圖說明圖1是N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的合成路線.i)丙酮,三氟乙酸,MgSO4；ii)DCC,HOBt,NMM；iii)乙醇,Pd/C；iv)氯化氫-乙酸乙酯溶液(4M),冰浴；v)三氟甲磺酸,三氟乙酸。具體實施方式為了進一步闡述本專利技術，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本專利技術進行具體描述，不應當理解為對本專利技術的限制。實施例1液相接肽反應通法將N端保護的原料以無水DMF溶解，向得到的溶液中加入N-羥基苯并三氮唑(HOBt)。冰浴下緩慢加入用無水DMF溶解的N,N-二環己基羰二亞胺(DCC)，0℃攪拌15分鐘得到反應液(I)。羧端保護的原料也用無水DMF溶解，用N-甲基嗎啉(NMM)調pH至9，然后與反應液(I)混合，用N-甲基嗎啉維持pH9，室溫攪拌10小時，TLC監測原料點消失后，反應混合物過濾，濾液減壓濃縮，得到粘稠狀物質用乙酸乙酯溶解，得到的溶液依次用5％NaHCO3水溶液洗，5％KHSO4水溶液洗，飽和NaCl水溶液洗，乙酸乙酯相加無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干,殘留物經柱層析純化(二氯甲烷/甲醇,50/1)，得到目標化合物。實施例2脫Boc通法將Boc保護的肽用少量的無水乙酸乙酯溶解，冰浴攪拌下加入氯化氫的乙酸乙酯溶液(4M)。TLC顯示原料點消失后，反應溶液用水泵反復抽干，除凈氯化氫氣體，殘留物用石油醚或無水乙醚反復研磨，得到目標化合物。實施例3脫芐酯基通法將多肽芐酯用CH3OH溶解，冰浴攪拌下緩慢滴加NaOH的水溶液(2M)，冰浴維持反應液溫度在0℃，TLC顯示原料消失。反應液用1M的鹽酸調至中性，減壓除去甲醇，繼續用1M的鹽酸酸化至pH2，溶液用乙酸乙酯萃取，合并的乙酸乙酯相用飽和NaCl水溶液洗滌至中性，用無水Na2SO4干燥，過濾，濾液減壓濃縮得到目標化合物。實施例4脫芐氧羰基或芐酯基通法將具有芐氧羰基或芐酯保護的肽用適量的乙醇溶解，加入鈀碳(反應物量的10％)，通入氫氣室溫氫解。反應結束后過濾,減壓濃縮，得到目標化合物。實施例5制備Boc-Pro-Ala-OBzl按照實施例1的方法,從4.3g(20.0mmol)Boc-Pro和8.45g(24.0mmol)Tos·Ala-OBzl得到5.19g(68％)標題化合物,為無色粉末。ESI-MS(m/e):377[M+H]+。實施例6制備Boc-Pro-Ala按照實施例4本文檔來自技高網...

【技術保護點】
下式的N?(3S?6,7?二羥基?1,1?二甲基?1,2,3,4?四氫異喹啉?3?甲酰)?Lys(Gly?Arg?Pro?Ala?Lys)?Arg?Gly?Asp?Val

【技術特征摘要】
1.下式的N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val2.權利要求1的N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的制備方法,該方法包括以下步驟:(1)按照標準方法制備Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBz；(2)按照標準方法制備Gly-Arg(NO2)-Pro-Als-Lys(Z)-OBz；(3)制備3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸；(4)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-OBzl；(5)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)；(6)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(7)制備N-(3S-6,7-二羥基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氫...

【專利技術屬性】
技術研發人員：彭師奇，趙明，李姍，彭莉，
申請(專利權)人：彭莉，
類型：發明
國別省市：北京;11