【技術實現步驟摘要】
：本專利技術屬于天然有機化學領域，涉及一種從大興安嶺野生榛蘑里提取純化紫杉醇的方法，特別是涉及一種利用超高壓提取、生物酶解、逆流色譜純化野生榛蘑紫杉醇的新方法。
技術介紹
：國內均從紅豆杉科植物短葉紅豆杉和中間紅豆杉的針葉和樹皮及云南紅豆杉等植物中提取紫杉醇，原料資源單一，價格昂貴，國內提取紫杉醇工藝主要是采用甲醇、丙酮、乙酸乙酯等作為提取溶劑，采用液液萃取、固液萃取法，提取時間16-48小時，近年也有采用超聲波、微波提取技術的，用柱色譜純化，其純化效果遠遠不如運用超高壓提取、生物酶解、色譜純化野生榛蘑紫杉醇的效果。
技術實現思路
：本專利技術方法采用超高壓提取技術、生物酶解、高速逆流色譜技術，紫杉醇有效成分含量較高，高達99.7％。本專利技術優點：超高壓提取在常溫進行，營養成分破壞少；生物酶解溫度低，且采用等離子液體做為溶劑，紫杉醇有效成分提取率大大加強；同時采用高速逆流色譜技術純化，克服了常規技術獲得紫杉醇時間較長、得率較低的缺點。本專利技術的目的在于克服常規技術提取時間較長、產品純度低等缺點，提供一種利用超高壓提取、生物酶解、逆流色譜純化野生榛蘑紫杉醇的新方法。為實現上述目的，本專利技術采用的技術方案是：一種采用超高壓提取、生物酶解、逆流色譜純化野生榛蘑紫杉醇的新方法，其步驟如下：(1)超高壓提取：干燥野生榛蘑粉碎至20-40目，加入適量倍數的提取溶劑，將混合物放入耐壓袋，在一定超高壓力下處理3-5分鐘...
【技術保護點】
一種采用超高壓提取、生物酶解、逆流色譜純化野生榛蘑紫杉醇的新方法，其步驟如下：(1)超高壓提取：干燥野生榛蘑粉碎至20?40目，加入適量倍數的提取溶劑，將混合物放入耐壓袋，在一定超高壓力下處理3?5分鐘，回收溶劑；(2)生物酶解：稱重提取液，加入提取液質量5?8倍數的等離子液體及適量復合酶，在45?50℃下酶解2?4h；(3)收集：回收液體，薄層層析檢測分析，收集紫杉醇部分；(4)粗過濾：過濾，合并兩次濾液，得紫杉醇粗提液；(5)濃縮噴粉：將紫杉醇粗提液濃縮至22°Bé，并噴成粉；(6)柱層析：將所得粗品粉末，溶于有機溶劑，加適量柱填料攪拌，烘干過60?80目篩，干法上樣，上工業級柱進行柱層析；(7)洗脫：以2?4BV/h流速，先用水，再用不同體積濃度溶劑進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤監測；(8)干燥：真空冷凍干燥：收集紫杉醇溶液，在適當溫度、干燥壓力下冷凍干燥；(9)分相：稱取一定克數紫杉醇，選擇適當的HSCCC溶劑系統，按比例將各種溶劑加入分液漏斗中，震蕩使溶液充分混合，放置過夜，分相平衡后分出上相和下相；(10)HSCCC分離純化：以溶劑系統的上相為固定相，下相為流動相，調整轉速，...
【技術特征摘要】
1.一種采用超高壓提取、生物酶解、逆流色譜純化野生榛蘑紫杉醇的新方法，其步驟如下：
(1)超高壓提取：干燥野生榛蘑粉碎至20-40目，加入適量倍數的提取溶劑，將混合物放入耐壓袋，在
一定超高壓力下處理3-5分鐘，回收溶劑；
(2)生物酶解：稱重提取液，加入提取液質量5-8倍數的等離子液體及適量復合酶，在45-50℃下酶解
2-4h；
(3)收集：回收液體，薄層層析檢測分析，收集紫杉醇部分；
(4)粗過濾：過濾，合并兩次濾液，得紫杉醇粗提液；
(5)濃縮噴粉：將紫杉醇粗提液濃縮至22°Bé，并噴成粉；
(6)柱層析：將所得粗品粉末，溶于有機溶劑，加適量柱填料攪拌，烘干過60-80目篩，干法上樣，上
工業級柱進行柱層析；
(7)洗脫：以2-4BV/h流速，先用水，再用不同體積濃度溶劑進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤監測；
(8)干燥：真空冷凍干燥：收集紫杉醇溶液，在適當溫度、干燥壓力下冷凍干燥；
(9)分相：稱取一定克數紫杉醇，選擇適當的HSCCC溶劑系統，按比例將各種溶劑加入分液漏斗中，
震蕩使溶液充分混合，放置過夜，分相平衡后分出上相和下相；
(10)HSCCC分離純化：以溶劑系統的上相為固定相，下相為流動相，調整轉速，以一定流速泵入HSCCC
螺旋管，分離純化紫杉醇提取物，得到含量為99.5％以上的成品。
2.根據權利要求1所述的一種采用生物酶解、超高壓提取、逆流色譜純化野生榛蘑紫杉醇的新方法，
其特征是：在所述的步驟(1)中，提取...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張亞紅，張永富，
申請(專利權)人：大興安嶺富林山野珍品科技開發有限責任公司，
類型：發明
國別省市：黑龍江;23
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