一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物及其制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，由以下中藥原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊，甘青青蘭，甘草，黃芩和敗醬草。本發(fā)明專利技術(shù)還公開(kāi)了其制備方法，包括將柳葉菜風(fēng)毛菊和甘青青蘭的醇提物和甘草，黃芩和敗醬草的水提物混合制成藥物學(xué)上常用的劑型。本發(fā)明專利技術(shù)所述的中藥組合物抗呼吸道合胞病毒活性強(qiáng)，并且經(jīng)毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明專利技術(shù)提供的有效劑量較小，毒性小，無(wú)不良反應(yīng)，使用更安全，并且原材料易得，成本較低，可持續(xù)開(kāi)發(fā)，應(yīng)用前景廣泛。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及中藥組合物及其制造
，特別是涉及一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物及其制備方法。
技術(shù)介紹
呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus，RSV)為副粘病毒科、肺炎病毒屬的負(fù)鏈RNA病毒，其感染遍及全世界。RSV是嬰幼兒病毒性肺炎和毛細(xì)支氣管炎的主要病原體之一，感染后易遺留長(zhǎng)期肺功能異常，可誘發(fā)過(guò)敏癥和哮喘。目前，對(duì)RSV感染尚無(wú)特效治療和預(yù)防方案(實(shí)用兒科臨床雜志,2001,16(13)；176.)，臨床上多采用特異性抗體進(jìn)行支持療法，或是被動(dòng)免疫治療如采用干擾素(IFN)等，也有采用廣譜抗病毒藥如利巴韋林進(jìn)行治療。利巴韋林雖被證明可以用于治療RSV感染，但由于其毒性較大，近年來(lái)對(duì)其療效存在較大爭(zhēng)議。中藥是中國(guó)乃至世界的醫(yī)學(xué)寶庫(kù)，中藥治療病毒性感染的疾病已經(jīng)有幾千年的歷史。中藥抗病毒療效顯著，抗病毒譜廣，全身用藥無(wú)明顯組織細(xì)胞毒性、致畸、致突變、免疫抑制或骨髓抑制，一般無(wú)耐藥性產(chǎn)生，對(duì)持續(xù)性和整和性感染有效。因此，很有必要在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)之上，尋找開(kāi)發(fā)一種抗呼吸道合胞病毒作用強(qiáng)、不良反應(yīng)小的本專利技術(shù)提供的中藥組合物及其制備方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物及其制備方法。本專利技術(shù)的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，由以下中藥原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊，甘青青蘭，甘草，黃芩和敗醬草。進(jìn)一步，所述抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，由以下重量配比的原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊10-30份，甘青青蘭10-30份，甘草10-20份，黃芩5-15份，敗醬草5-15份。進(jìn)一步，所述抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，其最佳配比為按以下重量份的原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊20份，甘青青蘭20份，甘草15份，黃芩10份，敗醬草10份。一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)按重量份配比取所述原藥材中的柳葉菜風(fēng)毛菊和甘青青蘭，粉碎至60-120目，加入10倍體積的95％的乙醇，在60℃的水浴中回流提取2小時(shí)，濾渣重復(fù)處理兩次，合并濾液，將濾液濃縮、干燥得醇提物；(2)按重量份配比取所述原藥材中的甘草，黃芩和敗醬草，粉碎至60-120目，加人10倍體積的水浸泡10小時(shí)，煎煮1小時(shí)后再用8倍水煎煮30分鐘，負(fù)壓抽濾后合并濾液，減壓蒸發(fā)濃縮、干燥得水提物；(3)將步驟(1)所得醇提物和步驟(2)所得水提物粉碎并混合均勻制成藥物學(xué)上常用劑型。所述藥物學(xué)上常用劑型為顆粒、片劑或者膠囊。本專利技術(shù)提供的抗呼吸道合胞病毒中藥組合物具有以下優(yōu)點(diǎn)：抗呼吸道合胞病毒活性強(qiáng)，并且經(jīng)毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本專利技術(shù)提供的有效劑量較小，毒性小，無(wú)不良反應(yīng)，使用更安全，并且原材料易得，成本較低，可持續(xù)開(kāi)發(fā)，應(yīng)用前景廣泛。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本專利技術(shù)的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本專利技術(shù)保護(hù)范圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本專利技術(shù)的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本專利技術(shù)技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。實(shí)施例1分別取原藥材柳葉菜風(fēng)毛菊20克，甘青青蘭20克，甘草15克，黃芩10克，敗醬草10克；(1)將所取得原藥材柳葉菜風(fēng)毛菊20克和甘青青蘭克混合，粉碎至60-120目，加入10倍體積的95％的乙醇，在60℃的水浴中回流提取2小時(shí)，濾渣重復(fù)處理兩次，合并濾液，將濾液濃縮、干燥得醇提物；(2)將所取得原藥材甘草15克，黃芩10克和敗醬草10克混合，粉碎至60-120目，加人10倍體積的水浸泡10小時(shí)，煎煮1小時(shí)后再用8倍水煎煮30分鐘，負(fù)壓抽濾后合并濾液，減壓蒸發(fā)濃縮、干燥得水提物；(3)將步驟(1)所得醇提物和步驟(2)所得水提物粉碎并混合均勻制成顆粒。實(shí)驗(yàn)例11、試劑和儀器DMEM培養(yǎng)基，除菌過(guò)濾后用碳酸氫鈉調(diào)pH至7.0～7.2；新生牛血清，杭州四季青，經(jīng)56℃，30min滅活補(bǔ)體，除菌分裝；維持液為含2％小牛血清的DMEM培養(yǎng)基；96孔培養(yǎng)板；CO2培養(yǎng)箱；超凈工作臺(tái)；倒置顯微鏡。人喉表皮癌細(xì)胞Hep－2細(xì)胞；呼吸道合胞病毒(RSV，Long株)分離株。2、實(shí)驗(yàn)藥物將實(shí)驗(yàn)例1中得到的中藥組合物用DMSO稀釋為100μg/μL貯存液備用。3、病毒滴度測(cè)定將活化好的毒株作10倍系列稀釋，10-1～10-9，常規(guī)方法感染致密單層Hep－2細(xì)胞，每孔100μl，設(shè)8個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照，34.5℃，5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4d，每天觀察細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)情況，CPE程度可分為從“+”～“++++”。4、藥物對(duì)Hep－2細(xì)胞毒性測(cè)定將胰酶消化后的Hep－2細(xì)胞，以5×103個(gè)/孔密度接種到96孔培養(yǎng)板中，37℃，5％CO2培養(yǎng)24h后，棄液，用含雞血清2.5％的DMEM培養(yǎng)基將藥物倍比稀釋成6個(gè)系列濃度(起始濃度為500μg/ml)加入96孔板，100μl/孔，每個(gè)稀釋度設(shè)3個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照組，繼續(xù)培養(yǎng)48h后，觀察并記錄藥物作用于細(xì)胞的最大無(wú)毒濃度TC0。5、藥物抗病毒的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果將100TCID50的RSV病毒液接種于已長(zhǎng)成單層的Hep－2細(xì)胞中，每孔50μl，并在藥物無(wú)毒濃度范圍內(nèi)加入含不同濃度的藏藥提取物及利巴韋林的維持液，每孔50μl，每個(gè)劑量組重復(fù)3孔，于34.5℃、5％CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照、病毒對(duì)照。每天在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，以病毒對(duì)照組CPE達(dá)到75％，且細(xì)胞對(duì)照正常時(shí)為實(shí)驗(yàn)觀察終點(diǎn)，記錄各孔CPE程度。結(jié)果如下表所示：表1利巴韋林抗RSV藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品μg·ml-150025012562.531.2515.625利巴韋林----++“－”表示沒(méi)有病變，0％～25％為“+”表2中藥組合物抗RSV藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品μg·ml-150025012562.531.2515.625中藥組合物---++++++“－”表示沒(méi)有病變；0％～25％為“+”；26％～50％為“++”；51％～75％為“+++”；76％～100％為“++++”；RSV對(duì)照組為“+++”；細(xì)胞對(duì)照組為“－”在抗病毒活性實(shí)驗(yàn)中，Hep－2細(xì)胞對(duì)照未出現(xiàn)病變，本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，由以下中藥原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊，甘青青蘭，甘草，黃芩和敗醬草。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，由以下中藥原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)
毛菊，甘青青蘭，甘草，黃芩和敗醬草。
2.如權(quán)利要求1所述的一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，由以下重量配比的
原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊10-30份，甘青青蘭10-30份，甘草10-20份，黃芩5-15份，
敗醬草5-15份。
3.如權(quán)利要求2所述的一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物，其特征在于，其最佳配比為按以
下重量份的原藥材制備而成：柳葉菜風(fēng)毛菊20份，甘青青蘭20份，甘草15份，黃芩10份，
敗醬草10份。
4.如權(quán)利要求1-3中任一所述的一種抗呼吸道合胞病毒中藥組合物的制備方法，其特征在于，
包括以下步驟：

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：楊輝，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：西寧意格知識(shí)產(chǎn)權(quán)咨詢服務(wù)有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：青海;63