污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法及其菌劑的用途技術(shù)

一種污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法及其菌劑的用途，所述方法具有將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，菌株接種是將該弧菌試管種接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為20℃?40℃、振蕩速度為120?180轉(zhuǎn)/分鐘，搖瓶振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；弧菌保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏編號為CGMCC?No.12311。污海水脫氮弧菌菌劑的用途為用弧菌菌株制成微生物凈污菌劑用于海水養(yǎng)殖廢水處理，其產(chǎn)業(yè)應(yīng)用前景良好。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及污海水的處理
，特別是涉及一種具有污海水脫氮能力的弧菌，以及該弧菌的用，以及用該污海水脫氮弧菌制備生物脫氮菌劑的方法及其菌劑的用途。
技術(shù)介紹
目前，在高密度的養(yǎng)殖體系中，飼料中約75％～80％的氮會進入養(yǎng)殖水體中，并以氨氮、硝酸鹽氮、亞硝酸鹽氮的形式出現(xiàn)不同程度的累積，對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物造成危害，從而限制了海水養(yǎng)殖的單位產(chǎn)量，并且其排放的廢水中也含有豐富的含氮化合物，會加快海水富營養(yǎng)化，造成赤潮災(zāi)害，給近岸海洋生態(tài)環(huán)境帶來危害。污海水脫氮菌簡單的說是一類能在好氧條件下進行反硝化的細(xì)菌。它的存在使得硝化過程和反硝化過程得以在同一個反應(yīng)器中同步進行，硝化反應(yīng)的產(chǎn)物可成為反硝化反應(yīng)的底物，加快了反應(yīng)速度，降低了運行成本，同時反硝化反應(yīng)釋放的OH-會補償硝化反應(yīng)消耗的堿，避免酸性物質(zhì)的積累，維持系統(tǒng)pH值的穩(wěn)定。已知技術(shù)，如已公開的中國專利申請201210152921.0一株耐冷假單胞菌Den-05及其篩選方法和應(yīng)用，采用微生物純培養(yǎng)技術(shù)從自然生境中篩選出低溫好氧反硝化菌PseudomonaspsychrophiliaDen-05，實現(xiàn)了生物脫氮菌劑的制備，為生物強化體系提供了高效脫氮菌種，并通過縮短厭氧周期進而縮短曝氣周期的調(diào)控方式，提高了城市污水廠冬季脫氮效果，實現(xiàn)了好氧條件下硝酸鹽氮的去除。還有，中國專利201410397855.2一株高效脫氮不動桿菌新種及其應(yīng)用，不動桿菌AcinetobacterguangzhouensisYZS-X1-1具有較好的脫氮能力，能夠有效去除氨氮及亞硝酸鹽氮，從而保護環(huán)境。還有，中國專利200910213798.7一種同時脫硫、脫氮、脫色的廢水生物處理方法，公開了一種同時脫硫、脫氮、脫色的廢水生物處理方法。還有，中國專利201210171297.9一株高鹽生物脫氮的鹽弧菌菌株及其在廢水處理中的應(yīng)用。還有，中國專利申請201110288612.1海洋異養(yǎng)脫氮細(xì)菌的混養(yǎng)富集篩選方法。業(yè)界亟待更多樣化的具有污海水脫氮能力的弧菌，以解決污海水生物強化處理中存在的問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)所要解決的問題在于，提供一種具有污海水脫氮能力的弧菌及其用途，及應(yīng)用該弧菌制備的污海水脫氮弧菌菌劑以及菌劑的用途，及該菌劑的制備方法。本案目的之一是提供一種污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法。一種污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，該方法具有將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，菌株接種是將該弧菌試管種接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為20℃-40℃、振蕩速度為120-180轉(zhuǎn)/分鐘，搖瓶振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；所述的污海水脫氮弧菌，也稱具有污海水脫氮能力的弧菌，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏編號為CGMCCNo.12311。前述的菌劑的制備方法，還有，將培養(yǎng)好的菌種接入到發(fā)酵罐培養(yǎng)基的步驟：將培養(yǎng)好的菌種，按培養(yǎng)基重量的0.5％-1％或1％-2％的接種量接入到預(yù)設(shè)容積的發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐中有預(yù)設(shè)量的發(fā)酵罐培養(yǎng)基，培養(yǎng)至對數(shù)生長期。前述的菌劑的制備方法，還有，發(fā)酵培養(yǎng)的步驟：菌種接入到發(fā)酵罐后，無菌空氣的通氣量為10-30升/分鐘；前述的菌劑的制備方法，攪拌速度為120轉(zhuǎn)/分鐘-200轉(zhuǎn)/分鐘，或/和，培養(yǎng)溫度為25℃-40℃；前述的菌劑的制備方法，全流程培養(yǎng)時間為24-48小時；前述的菌劑的制備方法，發(fā)酵完成后培養(yǎng)液分裝，或采用無菌附著物吸附、干燥，制成固體菌劑。前述的菌劑的制備方法，其中，將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，所述的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基具有：蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化鈉0.5％，pH7.0，余量為添加劑。前述的菌劑的制備方法，其中，將培養(yǎng)好的菌種接入到發(fā)酵罐培養(yǎng)基的步驟：所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基成分具有：Na2HPO4、KH2PO4、KNO3、葡萄糖和海水；當(dāng)海水量為1000毫升時，Na2HPO4為7.9克，KH2PO4為1.5克，KNO3為1.0克，葡萄糖為9.4克，發(fā)酵罐培養(yǎng)基pH值為7.0-7.5。前述的菌劑的制備方法，其中，將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，培養(yǎng)溫度為20℃-25℃或26℃-30℃或31℃-35℃或36℃-37℃或38-40℃的任一范圍值。前述的菌劑的制備方法，其中，將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，振蕩速度為120-150轉(zhuǎn)/分鐘或151-160轉(zhuǎn)/分鐘或161-170轉(zhuǎn)/分鐘或171-180轉(zhuǎn)/分鐘的任一范圍值。前述的菌劑的制備方法，其中，發(fā)酵培養(yǎng)的步驟：菌種接入到發(fā)酵罐后發(fā)酵培養(yǎng)，無菌空氣通氣量優(yōu)選為10升/分鐘或20升/分鐘或30升/分鐘的任一值；前述的菌劑的制備方法，攪拌速度優(yōu)選為60-90轉(zhuǎn)/分鐘或91-120轉(zhuǎn)/分鐘的任一范圍值；前述的菌劑的制備方法，培養(yǎng)溫度優(yōu)選為25℃-30℃或31℃-35℃或36℃-40℃的任一范圍值；前述的菌劑的制備方法，所述全流程培養(yǎng)時間優(yōu)選為24-30小時或31-36小時或36-42小時或43-48小時任一范圍值；前述的菌劑的制備方法，所述污海水脫氮凈污菌，適合pH值在5.0-6.0或6.1-7.0或7.1-8.0或8.1-9.0任一范圍值；前述的菌劑的制備方法，所述污海水脫氮菌菌株的適合碳源為葡萄糖或乙酸鈉或丁二酸鈉或草酸鈉或檸檬酸鈉任一種。本案又一目的是提供一種具有污海水脫氮能力的弧菌的菌劑，也稱污海水脫氮弧菌菌劑，可以用前述的方法制備。一種具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑，其中，所述具有污海水脫氮能力的弧菌保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏編號為CGMCCNo.12311。前述具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑，其中，所述具有污海水脫氮能力的弧菌，適合碳源為葡萄糖或乙酸鈉或丁二酸鈉或草酸鈉或檸檬酸鈉任一種；前述的具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑，其中，所述具有污海水脫氮能力的弧菌DNA的G+C含量為44.3mol％；所述“G+C含量”是指“DNA分子中鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)所占的摩爾百分比值”；前述的具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑，其中，適宜生長的溫度為20℃-25℃或26℃-30℃或31℃-35℃或36℃-37℃或38-40℃的任一范圍值；前述具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑，其中，所述具有污海水脫氮能力的弧菌，適合pH值在5.0-6.0或6.1-7.0或7.1-8.0或8.1-9.0任一范圍值。本案又一目的是提供一種前述弧菌菌劑的用途。前述的具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑的用途，用于海水利用后的廢水處理，所述海水利用后的廢水為含有氮源污染物的海水養(yǎng)殖廢水。前述的具有污海水脫氮能力的弧菌菌劑的用途，用于海水利用后的廢水處理，所述海水利用后的廢水，其中的氮源污染物，以硝酸鹽氮(NO3--N)計，初始濃度為150毫克/升。本案又一目的是提供一種具有污海水脫氮能力的弧菌，本案又稱污海水脫氮弧菌。本專利技術(shù)具有污海水脫氮能力的弧菌采取以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：一株具有污海水脫氮能力的弧菌，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏編號為CGMCCNo.12311。本案具有污海水脫氮能力的弧菌還可采用以下技術(shù)措施來進一步實現(xiàn)：前述的具有污海水脫氮能力的弧菌，其中，所述菌株16SrDNA序列為：本案又一目的本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，該方法具有將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，菌株接種是將該弧菌試管種接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為20℃?40℃、振蕩速度為120?180轉(zhuǎn)/分鐘，搖瓶振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；所述的污海水脫氮弧菌，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏編號為CGMCC?No.12311。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，該方法具有將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，菌株接種是將該弧菌試管種接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為20℃-40℃、振蕩速度為120-180轉(zhuǎn)/分鐘，搖瓶振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；所述的污海水脫氮弧菌，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏編號為CGMCCNo.12311。2.如權(quán)利要求1所述的污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，還有，將培養(yǎng)好的菌種接入到發(fā)酵罐培養(yǎng)基的步驟：將培養(yǎng)好的菌種，按培養(yǎng)基重量的0.5％-1％或1％-2％的接種量接入到預(yù)設(shè)容積的發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐中有預(yù)設(shè)量的發(fā)酵罐培養(yǎng)基，培養(yǎng)至對數(shù)生長期。3.如權(quán)利要求2所述的污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，還有，發(fā)酵培養(yǎng)的步驟：菌種接入到發(fā)酵罐后，無菌空氣的通氣量為10-30升/分鐘，或/和，攪拌速度為120轉(zhuǎn)/分鐘-200轉(zhuǎn)/分鐘，或/和，培養(yǎng)溫度為25℃-40℃，或/和，全流程培養(yǎng)時間為24-48小時，或/和，發(fā)酵完成后培養(yǎng)液分裝，或采用無菌附著物吸附、干燥，制成固體菌劑。4.如權(quán)利要求1-3之一所述的污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，其中，將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，所述的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基具有：蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化鈉0.5％，pH7.0，余量為添加劑。5.如權(quán)利要求2-4之一所述的污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，其中，將培養(yǎng)好的菌種接入到發(fā)酵罐培養(yǎng)基的步驟：所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基成分具有：Na2HPO4、KH2PO4、KNO3、葡萄糖和海水；當(dāng)海水量為1000毫升時，Na2HPO4為7.9克，KH2PO4為1.5克，KNO3為1.0克，葡萄糖為9.4克，發(fā)酵罐培養(yǎng)基pH值為7.0-7.5。6.如權(quán)利要求1-5之一所述的污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，其中，將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中，培養(yǎng)溫度為20℃-25℃或26℃-30℃或31℃-35℃或36℃-37℃或38-40℃的任一范圍值。7.如權(quán)利要求1-6之一所述的污海水脫氮弧菌菌劑的制備方法，其中，將菌株接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)菌種的步驟，其中...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：任華峰，邱金泉，成玉，陳進斌，苗英霞，姜天翔，
申請(專利權(quán))人：國家海洋局天津海水淡化與綜合利用研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：天津;12