桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法技術

本發明專利技術提供了一種桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，屬于植物有效成分提取技術領域，包括粉碎、微波提取、離心分離、水提醇沉、濃縮干燥、膜分離、干燥等步驟。通過微波萃取技術提高了桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取效率并且保證1-脫氧野尻霉素的分子結構不受破壞，使得提取出的1-脫氧野尻霉素藥用價值更高。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及植物有效成分提取
，具體而言，涉及桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法。
技術介紹
桑葉為桑科(Moraceae)桑屬植物(MorusL.)的葉，是國家衛生部公布的藥食兩用植物，全國大部分地區均有栽培生產，以南方蠶桑主產區產量最多，如江蘇、廣西、浙江、安徽、四川等。我國桑屬植物有15個種4個變種，其中入藥者多為白桑(Morusalba)。桑葉在我國資源豐富，又是古代醫方中的一種常用中藥。桑在《詩經》中已有記載，桑葉入藥首見于《神農本草經》。桑葉味苦、甘，性寒，歸肺、肝經，具有疏散風熱、清肺潤燥、平肝明目、涼血止血之功效。歷代中醫藥書籍中記載桑葉能夠治療消渴癥。現代醫學在研究桑葉化學成分和動物實驗基礎上，發現桑葉具有降血壓、降血糖、降低膽固醇、抗腫瘤、抗過敏、抗氧化、抗毛細管滲透及利尿等功能。1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)是一種哌啶類多羥基生物堿，英文名稱為1-Deoxynojirimycin，簡稱1-DNJ，化學名稱為3，4，5-三羥基-2-羥甲基四氫吡啶，分子式為C6H13NO4，分子量為163，具有降血糖、抗病毒、抗腫瘤轉移等多種生物活性。截至目前的研究結果，自然界中以桑葉中含量最高。1-DNJ作為一種糖苷酶抑制劑，可以防止血糖濃度升高，具有降血糖、抗病毒和抗腫瘤轉移等作用，具有良好的開發前景和應用價值，因而由桑葉中提取1-DNJ已成為國內外學者研究的焦點，現有技術中的提取方法由于在提取過程中破壞了大部分1-脫氧野尻霉素的分子結構，且最終產物中的雜質含量大，產品的藥用價值不高。
技術實現思路
本專利技術提供了一種桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，旨在改善上述技術問題。本專利技術是這樣實現的：桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，包括以下步驟：(1)選取桑葉，粉碎至直徑為40～60目，將粉碎后的桑葉置于50℃～80℃的水中進行微波提取；(2)離心分離去除桑葉殘渣，收集水溶液，向水溶液中加入乙醇，攪拌10min～20min；(3)離心分離，減壓濃縮離心分離后的溶液、干燥得中間產物；(4)將中間產物溶解于水中，通過超濾膜除去大分子雜質，然后通過納濾膜除去小分子雜質，最后通過反滲透膜濃縮干燥得產物。微波提取是利用電磁場的作用使固體或半固體物質中的某些有機物成分與基體有效的分離，并能保持分析對象的原本化合物狀態的一種分離方法。微波萃取的機理可從以下3個方面來分析:1)微波輻射過程是高頻電磁波穿透萃取介質到達物料內部的微管束和腺胞系統的過程。由于吸收了微波能，細胞內部的溫度將迅速上升，從而使細胞內部的壓力超過細胞壁膨脹所能承受的能力，結果細胞破裂，其內的有效成分自由流出，并在較低的溫度下溶解于萃取介質中。通過進一步的過濾和分離，即可獲得所需的萃取物。2)微波所產生的電磁場可加速被萃取組分的分子由固體內部向固液界面擴散的速率。例如，本專利技術中，以水作溶劑，在微波場的作用下，水分子由高速轉動狀態轉變為激發態，這是一種高能量的不穩定狀態。此時水分子或者汽化以加強萃取組分的驅動力，或者釋放出自身多余的能量回到基態，所釋放出的能量將傳遞給其他物質的分子，以加速其熱運動，從而縮短萃取組分的分子由固體內部擴散至固液界面的時間，結果使萃取速率提高數倍，并能降低萃取溫度，最大限度地保證萃取物的質量。3)由于微波的頻率與分子轉動的頻率相關連，因此微波能是一種由離子遷移和偶極子轉動而引起分子運動的非離子化輻射能，當它作用于分子時，可促進分子的轉動運動，若分子具有一定的極性，即可在微波場的作用下產生瞬時極化，并以24.5億次/s的速度作極性變換運動，從而產生鍵的振動、撕裂和粒子間的摩擦和碰撞，并迅速生成大量的熱能，促使細胞破裂，使細胞液溢出并擴散至溶劑中。在微波萃取中，吸收微波能力的差異可使基體物質的某些區域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使被萃取物質從基體或體系中分離，進入到具有較小介電常數、微波吸收能力相對較差的萃取溶劑中。通過微波提取技術使桑葉中的有效藥用成分溶解在水中，并且不會對這些有效成分的分子結構產生破壞，相比于現有技術中的提取方式，提取得到的1-脫氧野尻霉素的藥用價值更高。并且無需對桑葉進行干燥等預處理，簡化了生產工藝，不需要額外的化學試劑，降低成本且更加環保。微波提取后，加入乙醇，利用桑葉中溶解萃取在水中的不同成分在乙醇中的溶解度的不同，析出部分雜質沉淀，精制1-脫氧野尻霉素溶液，然后將析出的沉淀濾去，乙醇可以回收循環利用，濃縮得到1-脫氧野尻霉素的中間產物，中間產物中還含有一定量的雜質。再次溶解中間產物后，通過膜技術去除不同分子量的雜質，進一步精制1-脫氧野尻霉素。整個提取過程中除乙醇外，不使用其他化學試劑，保證提取過程中不再進入新的雜質，同時不破壞1-脫氧野尻霉素的分子結構，提取得到的1-脫氧野尻霉素含量高，藥用價值更好。在使用膜技術進行1-脫氧野尻霉素的濃縮精制時，先使用透過分子量大的超濾膜進行過濾，這樣大分子雜質被濾去，在使用透過分子量更小的納濾膜進行過濾，使得分子量更小的雜質被濾去，最終1-脫氧野尻霉素的純度和收率都顯著提高。相對于直接使用納濾膜除去小分子和大分子雜質，避免了1-脫氧野尻霉素被大分子雜質裹挾，無法通過透過分子量較小的納濾膜的情形，1-脫氧野尻霉素的收率明顯較直接使用納濾膜過濾更高。進一步地，所述微波提取按以下方式進行：在5Bv～15Bv的水中，微波頻率為2300MHz～2600MHz條件下提取至少兩次，每次20min～40min。微波提取是在微波容器中不斷加入水進行的，由于桑葉中不同成分在水中的溶解度不同以及受微波影響的效果不同，通過控制加水的流量以及微波頻率，使得桑葉中的1-脫氧野尻霉素能完全溶解出來，而部分其他雜質成分不會都進入水溶液中，方便后續對1-脫氧野尻霉素的精制。水的體積用量與桑葉的質量比例為5ml～15ml：1g。作為優選，當微波頻率為2450MHz時，微波提取效果最好。進一步地，所述步驟(2)中，離心分離在臥式螺旋離心機中以轉速3000rpm～3500rpm進行。臥式螺旋離心機主要用于將步驟(1)中的桑葉殘渣離心出去。進一步地，所述步驟(3)中，離心分離在碟片離心機中以轉速8000rpm～10000rpm進行。碟片式離心機的主要作用是將步驟(2)<本文檔來自技高網...

【技術保護點】
桑葉中1?脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)選取桑葉，粉碎至直徑為40～60目，將粉碎后的桑葉置于50℃～80℃的水中進行微波提取；(2)離心分離去除桑葉殘渣，收集水溶液，向水溶液中加入乙醇，攪拌10min～20min；(3)離心分離，減壓濃縮離心分離后的溶液、干燥得中間產物；(4)將中間產物溶解于水中，通過超濾膜除去大分子雜質，然后通過納濾膜除去小分子雜質，最后通過反滲透膜濃縮干燥得產物。

【技術特征摘要】
1.桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，包括以下
步驟：(1)選取桑葉，粉碎至直徑為40～60目，將粉碎后的桑葉置
于50℃～80℃的水中進行微波提取；
(2)離心分離去除桑葉殘渣，收集水溶液，向水溶液中加入乙
醇，攪拌10min～20min；
(3)離心分離，減壓濃縮離心分離后的溶液、干燥得中間產物；
(4)將中間產物溶解于水中，通過超濾膜除去大分子雜質，然
后通過納濾膜除去小分子雜質，最后通過反滲透膜濃縮干燥得產物。
2.根據權利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，
其特征在于，所述微波提取按以下方式進行：在5Bv～15Bv的水中，
微波頻率為2300MHz～2600MHz條件下提取至少兩次，每次
20min～40min。
3.根據權利要求2所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，
其特征在于，所述微波頻率為2450MHz。
4.根據權利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，
其特征在于，所述步驟(2)中，離心分離在臥式螺旋...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊剛柱，徐小琴，張衛剛，楊立琛，
申請(專利權)人：重慶驕王天然產物股份有限公司，
類型：發明
國別省市：重慶;50