一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非檢測方法技術

本發明專利技術提供一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非檢測卡，該方法通過兩個部分實現，即樣品前處理工藝和他達拉非快速檢測卡，本發明專利技術檢測瑞格列奈對樣本要求低，常規的丸劑、片劑、茶劑、膠囊劑等保健品均可檢測；檢測操作簡單，無需專業的人員和儀器，適合于現場檢測。檢測周期短，20min內出結果。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于食品保健品非法添加物質檢測領域，特別是涉及一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非的檢測方法。專利技術背景隨著經濟的快速發展，人們食用食品已不是單純為了攝取營養、維持生命，還要求它具有調節人體生理機能的作用。保健食品的出現，對食品提出了新的挑戰，是人們追求高質量生活的要求，也是經濟快速發展的產物。我國從1996年至今，衛生行政部門共批準保健食品達9600余種，市場規模價值近千億元，每年新增批準的保健食品有數百種之多。保健食品的快速發展帶來了巨大的經濟效益，同時也帶來一系列的安全問題。盡管國家陸續頒布了一系列的法律法規進行監管，但保健食品質量良莠不齊、摻雜、摻假現象時有發生。這不但損害了消費者的利益，而且使人們對保健食品逐漸喪失信心，嚴重影響保健食品行業的正常、快速發展。他達拉非是一種壯陽類西藥處方藥，現經常被非法添加到提神類和壯陽類保健品中。由于他達拉非為處方藥，具有一定的副作用，必須在醫生的指導下使用方可。非法添加的保健品中的他達拉非，會對使用者造成嚴重的健康危害。常規檢測非法添加他達拉非的方法為化學法、HPLC法、薄層層析法等?；瘜W法和薄層層析法檢測非法添加他達拉非有靈敏度低，特異性差的缺點，HPLC法檢測非法添加他達拉非操作復雜，需要專業的人員和專門的儀器，不適合現場的檢測。膠體金檢測試劑是一種基于免疫技術和層析技術的快速檢測試劑，該試劑一般在20min內給出檢測結果，靈敏度高，特異性好，無需專業人員和專門儀器，是一種非常適合現場快速檢測保健品中非法添加他達拉非的方法。
技術實現思路
本專利技術的目的在于解決現有技術的缺陷，提供一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非的檢測方法。解決了傳統的檢測方法的步驟繁瑣、檢測時間長也檢測準確性低的問題。有鑒于此，本專利技術提供一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非的檢測方法，該方法通過兩個部分實現，即樣品前處理工藝和他達拉非快速檢測卡。所述的樣品前處理工藝包括甲醇水樣品提取液和基于該樣品提取液的前處理方法。本專利技術提供了一種甲醇水混合液樣品提取液，該提取液可以處理丸劑、片劑、茶劑和膠囊劑等劑型保健品，并且通過簡單的前處理步驟即可提取出非法添加的他達拉非。所述甲醇水混合液樣品提取液，甲醇水的體積為1∶(1～10).所述基于該樣品處理液的前處理方法，包括如下步驟：步驟1，將丸劑、片劑碾碎，膠囊劑打開膠囊殼。步驟2，稱取粉末或內容物1g，加入5ml提取液，震蕩1min。靜置5min待溶液澄清。步驟3，取上層清液用45um濾膜過濾得澄清液體即為檢測液。所述基于樣品處理液的前處理方法，所述步驟1中丸劑、茶劑和片劑可以在研缽中研碎，也可以用稱量紙包裹住藥丸或藥片碾碎，根據檢測現場的條件而定。所述基于樣品處理液的前處理方法，步驟3也可以通過離心方法完成，離心參數為3000rpm，5min。本專利技術的他達拉非快速檢測卡是基于膠體金免疫層析技術，通過以下技術方案實現：一種股體金免疫層析他達拉非檢測卡，包括底板以及依次搭接地黏貼與底板上的樣品墊、結合墊、層析膜和吸水墊從而形成多層膜結構，各層膜結構之間部分重疊；所述結合墊上包被有膠體金標記的他達拉非特異性抗體；所述層析膜上有一條包被他達拉非抗原(他達拉非-BSA復合物)的檢測線、一條包被羊抗鼠IgG抗體的質控線。所述他達拉非特異性抗體可以為單克隆抗體或多克隆抗體。所述底板為PVC板；所述樣品墊為一種玻璃纖維膜或聚酯纖維膜，為待檢樣品收集區，其前端搭接粘貼于底板前端上；所述結合墊的基體為玻璃纖維膜或聚酯纖維膜，結合墊位于樣品墊與底板之間，其前端搭接粘貼于底板上，后端自樣品墊后端下方延伸出一定長度；所述層析膜為硝酸纖維素膜，其前端插設于結合墊與底板之間且搭接粘貼于底板上，并平鋪直底板的后端；所述吸水墊為吸水濾紙，其搭接與底板后端覆蓋于層析膜后端上一定長度。所述他達拉非快速檢測卡基于膠體金免疫層析競爭法，具體如下：本專利技術膠體金檢測卡均采用競爭法原理檢測他達拉非，金結合墊為鼠源性金標他達拉非抗體，硝酸纖維素膜上檢測線包被他達拉非抗原，質控線包被羊抗鼠IgG多克隆抗體。當樣本滴加到樣品墊上，在毛細管作用下液體向吸水墊方向層析。如果樣本中含有他達拉非，樣本達到金結合墊位置與相應的金標抗體結合，然后層析到硝酸纖維素膜上檢測線時，則無法與包被的他達拉非抗原結合，檢測線區域不出現紅色條帶，這樣得到陽性結果。當樣本中不含他達拉非時，樣本與金標抗體不能發生反應，當層析到硝酸纖維素膜上時與包被的他達拉非抗原結合，紅色的金顆粒被檢測線捕捉到，從而在該區域顯示出紅色條帶，這樣得到陰性結果。無論陰性還是陽性樣本金結合墊上的金標抗體都會與硝酸纖維素膜上質控線的羊抗鼠多抗結合產生紅色條帶，如果質控線不顯示說明檢測結果無效。上述方案至少有下述幾個優點：本專利技術檢測他達拉非對樣本要求低，常規的丸劑、片劑、茶劑、膠囊劑等保健品均可檢測；檢測操作簡單，無需專業的人員和儀器，適合于現場檢測。檢測周期短，20min內出結果。附圖說明圖1本專利技術實施的檢測卡的正面結構示意圖。圖2本專利技術實施的檢測試劑盒側面剖視圖。圖3本專利技術實施的檢測試劑盒正面結構示意圖。圖4本專利技術實施的檢測試劑盒的陰陽性判定示意圖。具體實施方式下面結合實施例對本專利技術做進一步詳細說明，但本專利技術不僅限于下述實施例。實施例1檢測卡制備方法請參照圖1-圖3，本專利技術提供一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非的檢測卡10，由檢測試紙條11和卡殼12組成。所述試紙11包括底板1以及依次搭接粘貼其上的樣品墊2、結合墊3、層析膜4、和吸水墊5等多層膜結構，且各層膜結構之間部分重疊。其中，結合墊3上包被有膠體金標記他達拉非特異性抗體。層析膜4上有一條包被有他達拉非抗原檢測線7和一條包被有羊抗鼠IgG抗體的質控線6.底板1為單面粘有雙面膠的PVC板，承載前述各層膜結構，其根據檢測卡10的形狀對應裁剪而成，如本實施例為長方形。樣品墊2是一種玻璃纖維膜或聚酯纖維膜，為待檢樣品收集區，其前端搭接粘貼于底板1前端上，后端搭接與結合墊3前端，且與結合墊3部分重疊。結合墊3的基體為玻璃纖維膜或聚酯纖維膜，結合墊3上包被有膠體金標記的他達拉非特異性抗體。結合墊3位于樣品墊2與底板1之間，其前端搭接粘貼于底板1上，后端自樣品墊2后端下方延伸出一定長度；所述層析膜4為硝酸纖維素膜，層析膜4上有一條包被有他達拉非抗原檢測線7和一條包被有羊抗鼠IgG抗體的質控線6。層析膜4前端插設于結合墊3與底板1之間且搭接粘貼于底板1上，并平鋪直底板1的后端；吸水墊5為吸水濾紙，其搭接于底板后端覆蓋于層析膜4后端上一定長度。其中，樣品墊2、結合墊3、層析膜4、吸水墊5寬度底板1相同，依次搭接粘貼于底板1上，各層之間緊密連接且部分重疊。各膜層的上表面在試紙條11上表面依次平鋪展開一定區域。圖2所示，該試紙11的正面上各膜層平行連接，側面對齊，自試紙11的前端開始，依次為樣品墊2、結合墊3、層析膜4、吸水墊5的正面區域沿底板1的長度方向依次鄰接且相互平行，檢測線7和質控線6平行設置于層析膜4且位于結合墊3和吸水墊5正面區域之間。檢測線7位于質控線6之前。該檢測卡10呈長條狀，相應的，卡殼12也呈長條狀。在一具體實施方式中，所述樣品墊2長度為13mm、結合墊3長度為6mm，寬本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非的檢測方法，其特征在于，該方法通過兩個部分實現，即樣品前處理工藝和他達拉非快速檢測卡，所述樣品前處理工藝包括甲醇水樣品提取液和基于樣品提取液的前處理方法，本專利技術提供了一種甲醇水混合液樣品提取液，該提取液可以處理丸劑、片劑、茶劑和膠囊劑等劑型保健品，并且通過簡單的前處理步驟即可提取出非法添加的他達拉非，所述基于樣品處理液的前處理方法，包括如下步驟：步驟1，將丸劑、片劑、茶劑碾碎，膠囊劑打開膠囊殼；步驟2，稱取粉末或內容物1g，加入5ml提取液，震蕩1min；靜置5min待溶液澄清；步驟3，取上層清液用45um濾膜過濾得澄清液體即為檢測液，所述他達拉非快速檢測卡是基于膠體金免疫層析技術，通過以下技術方案實現：一種膠體金免疫層析他達拉非檢測卡，包括底板以及依次搭接地黏貼與底板上的樣品墊、結合墊、層析膜和吸水墊從而形成多層膜結構，各層膜結構之間部分重疊；所述結合墊上包被有膠體金標記的他達拉非特異性抗體；所述層析膜上有一條包被他達拉非抗原(他達拉非?BSA復合物)的檢測線、一條包被羊抗鼠IgG抗體的質控線。

【技術特征摘要】
1.一種快速檢測保健品中非法添加他達拉非的檢測方法，其特征在于，該方法通過兩個部分實現，即樣品前處理工藝和他達拉非快速檢測卡，所述樣品前處理工藝包括甲醇水樣品提取液和基于樣品提取液的前處理方法，本發明提供了一種甲醇水混合液樣品提取液，該提取液可以處理丸劑、片劑、茶劑和膠囊劑等劑型保健品，并且通過簡單的前處理步驟即可提取出非法添加的他達拉非，所述基于樣品處理液的前處理方法，包括如下步驟：步驟1，將丸劑、片劑、茶劑碾碎，膠囊劑打開膠囊殼；步驟2，稱取粉末或內容物1g，加入5ml提取液，震蕩1min；靜置5min待溶液澄清；步驟3，取上層清液用45um濾膜過濾得澄清液體即為檢測液，所述他達拉非快速檢測卡是基于膠體金免疫層析技術，通過以下技術方案實現：一種膠體金免疫層析他達拉非檢測卡，包括底板以...

【專利技術屬性】
技術研發人員：博格·孫揚，
申請(專利權)人：博格·孫揚，
類型：發明
國別省市：北京;11