Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的應用制造技術

本發明專利技術提供Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的應用。經實驗研究結果表明Friedolanostanes對尿酸鹽致人血管內皮細胞損傷的急性痛風模型具有保護作用，并抑制ICAM?1表達，本發明專利技術涉及的Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的用途屬于首次公開，而且其對于急性痛風的防治活性強，具備突出的實質性特點，同時用于急性痛風的防治顯然具有顯著的進步。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及化合物Friedolanostanes的新用途，尤其涉及Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的應用。
技術介紹
痛風(gouty)，又稱痛風性關節炎(goutyarthritis)，是體內嘌呤代謝紊亂所致的疾病，表現為血中尿酸過多，易于使尿酸鹽(MSU)在關節等組織析出結晶。痛風的急性發作是由于沉積在關節的MSU引起中性粒細胞局部浸潤和炎性反應。本專利技術涉及的化合物Friedolanostanes是一個2013年發表(SaranyooKlaiklay，etal.,FriedolanostanesandxanthonesfromthetwigsofGarciniahombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166.)的新化合物，該化合物擁有全新的骨架類型，目前的用途僅僅涉及抗結核菌，(SaranyooKlaiklay，etal.,FriedolanostanesandxanthonesfromthetwigsofGarciniahombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166.)，本專利技術涉及的Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的用途屬于首次公開。
技術實現思路
本專利技術用MSU致人血管內皮細胞(HUVEC)損傷的急性痛風模型評價顯示，對MSU致HUVEC損傷具有保護作用，并抑制ICAM-1表達，可用于制備治療急性痛風炎癥藥物。本專利技術的目的在于提供Friedolanostanes在醫學中的新用途，具體地說是涉及Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的應用。本專利技術的目的是通過以下的技術方案來實現的：本專利技術提出Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的應用。從藥理實驗看出，Friedolanostanes有較好的治療急性痛風的作用。由于本專利技術首次公開Friedolanostanes在治療急性痛風方面的藥理作用。所述化合物Friedolanostanes結構如式(Ⅰ)所示：研究結果表明，用MSU致HUVEC損傷的急性痛風模型評價顯示，Friedolanostanes可保護MSU致HUVEC損傷，減少細胞凋亡，提高細胞活性，抑制ICAM-1表達，具有抗急性痛風炎癥的活性，Friedolanostanes可用于制備治療急性痛風炎癥藥物。本專利技術涉及的Friedolanostanes在制備治療急性痛風藥物中的用途屬于首次公開，由于骨架類型屬于全新的骨架類型，而且其對于急性痛風的防治活性強，具備突出的實質性特點，同時用于急性痛風的防治顯然具有顯著的進步。具體實施方式本專利技術所涉及化合物Friedolanostanes的制備方法參見文獻(SaranyooKlaiklay，etal.,FriedolanostanesandxanthonesfromthetwigsofGarciniahombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166.)以下通過實施例對本專利技術作進一步詳細的說明，但本專利技術的保護范圍不受具體實施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。實施例1：本專利技術所涉及化合物Friedolanostanes片劑的制備：取5克化合物Friedolanostanes，加入糊精195克，混勻，常規壓片制成1000片。實施例2：本專利技術所涉及化合物Friedolanostanes膠囊劑的制備：取5克化合物Friedolanostanes，加入淀粉195克，混勻，裝膠囊制成1000粒。下面通過藥效學實驗來進一步說明其藥物活性。實驗例1：Friedolanostanes抗急性痛風炎癥實驗：1:方法①溶液配制5g尿酸加1000ml蒸餾水煮沸，加5％NaOH溶液調PH7.4，攪拌，冷卻析晶制成尿酸鈉結晶(MSU)。將制好的MSU10mg高壓滅菌，加不含血清的DMEM培養液10ml，研磨配成1mg/ml的DMEM溶液。實驗時，此溶液再加DMEM培養液配成不同濃度DMEM的MSU溶液。Friedolanostanes2.5mg，用二甲基亞砜(DMSO)溶解，DMSO終濃度<0.02％，再加無血清的DMEM培養液，配制成濃度2.5ug/ml、25ug/ml、250ug/ml。陽性藥吲哚美辛2.0mg，方法同Friedolanostanes，配制濃度20ug/ml。②血管內皮細胞的體外培養人臍靜脈血管內皮細胞HUVEC株，由南京中醫藥大學基礎醫學院提供，細胞經支原體檢測，無支原體污染，細胞經0.25％胰蛋白酶消化，含10％小牛血清的DMEM培養液中和，離心(1000r/min×6min)，去上清液，加含10％小牛血清的DMEM培養液，移入細胞培養瓶中，放37℃、5％CO2培養箱中傳代培養。③對MSU刺激HUVEC活力的影響HUVEC在培養瓶中培養，待生長至70％～80％融合時，以0.25％胰蛋白酶消化、離心，10％小牛血清DMEM培養液洗滌3次，用10％小牛血清DMEM培養液調成4×104/ml細胞懸液，植入96孔板(每孔200ul)，培養24小時后輕吸出原培養液，進行以下實驗，每組各8孔，具體分組及加液如下：對照組(200ulDMEM培養液)、模型組(100ug/mlMSU溶液)、干預A組(100ug/mlMSU溶液+2.5ug/mlFriedolanostanes)、干預B組(100ug/mlMSU溶液+25ug/mlFriedolanostanes)、干預C組(100ug/mlMSU溶液+250ug/mlFriedolanostanes)，加液后繼續放37℃、5％CO2培養箱中培養24小時，收集上清液，剩余的HUVEC用于測定細胞活性，每孔再加5mg/mlMTT液20ul，繼續放37℃、5％CO2培養箱中培養4小時后，棄MTT液，加入二甲基亞砜200ul溶解，震蕩，于酶標儀讀取吸光度值，波長490nm。陽性藥組加液(100ug/mlMSU溶液+20ug/ml吲哚美辛)，其他方法同上。數據統計學處理，細胞活力(％)＝實驗組吸光度值/對照組吸光度值×100％，結果見表1。與對照組相比，模型組細胞活力顯著減小(P<0.01，P<0.05)，陽性藥吲哚美辛及Friedolanostanes干預后細胞活力顯著提高(P<0.01，P<0.05)，并強于對照組，其中，Friedolanostanes各濃度組的細胞活力強于陽性藥吲哚美辛。表1Friedolanostanes對MSU刺激的血管內皮細胞活力的影響(X±s)與模型組比較，**P<0.01*P<0.05，與對照組比較，##P<0.01#P<0.05④對ICAM-1表達影響將處于對數生長期的HUVEC用0.25％的胰蛋白酶消化，輕輕吹打，制成細胞懸液，調整細胞密度為5×109/L，接種于細胞培養瓶中。待細胞長滿后(約24h)，棄去上清液，分為下列組：對照組、模型組(100ug/mlMSU溶液)、Friedolanostanes組(100ug/mlMSU溶液+25ug/mlFriedolanostanes)，繼續培養24本文檔來自技高網...

【技術保護點】
Friedolanostanes在治療急性痛風藥物中的應用，所述化合物Friedolanostanes結構如式(Ⅰ)所示：

【技術特征摘要】
1.Friedolanostanes在治療急性痛風藥物中的應用...

【專利技術屬性】
技術研發人員：田麗華，
申請(專利權)人：淄博齊鼎立專利信息咨詢有限公司，
類型：發明
國別省市：山東;37