本發明專利技術涉及一種用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，特別涉及一種用蘆筍雄性兩性株自交制備純合親本與超雄進行雜交育種的方法，屬雜交育種技術領域。本發明專利技術的方法包括：蘆筍兩性株的選取與開花觀察及雜交育種的實施步驟；其中：雜交育種的實施步驟包括：(1)兩性花選擇與自交、(2)兩性花自交種播種與自交純化、(3)雜交與雜交種的獲得、(4)雜交后的管理、(5)收獲管理。本發明專利技術的有益效果在于：1、提供的用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，是用于蘆筍雜交育種的一種新技術，為我國蘆筍種質資源的利用與改良提供有效的方法；2、本方法易操作、蘆筍雜交育種效果佳。
【技術實現步驟摘要】
：本專利技術涉及一種用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，特別涉及一種用蘆筍雄性兩性株自交制備純合親本與超雄進行雜交育種的方法，屬雜交育種
技術介紹
：蘆筍(Asparagusofficinalis)是雌雄異株的單子葉植物，一般蘆筍雌株只開雌花，雄株只開雄花，主要是因為花在發育過程中由兩性部分敗育轉變為單性，即雌株(mm)中的雄蕊發生了退化，雄株(Mm)中的子房和柱頭停止了生長和分化。因此，雌株結果實產生種子，雄株不結果實。自然界中有些雄株的雌蕊退化不完全而雌性恢復育性，會結出少量的果實，形成種子，這樣的植株稱為雄性兩性株(基因型亦為Mm)，俗稱兩性株。兩性株通過自交可獲得理論上1/4基因型為MM的雄株，稱為超雄株，一般情況，雄株應不產生果實和種子，其產量在三年后要比雌株的產量高，因而將超雄(MM)作為父本進行蘆筍全雄育種(mm×MM→Mm，后代全部為雄株)能夠顯著提高蘆筍的產量。雖然國內外目前對于蘆筍性別分化、開花習性等方面進行過研究，但國內外均沒有利用蘆筍兩性株特性進行雜交育種的方法。本專利技術提供的用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，經文獻檢索，未見與本專利技術相同的公開報道。
技術實現思路
：本專利技術的目的在于提供一種用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，為我國蘆筍種質資源的利用與改良提供有效的方法。本專利技術選擇蘆筍雄株兩性株，在兩性株的兩性花開花前強行進行人工自交，待自交的種子成熟后收獲，播種后，再次選取雄株兩性株，對兩性株上的兩性花進行人工自交，并收獲自交種子。如此將兩性株自交3～4代，獲得純合的雌株與超雄株。將純合的超雄株與純合的雌株進行人工雜交，獲得雜交種。同時，將純合的超雄株與純合的雌株通過組織培養的方式進行性狀固定。將雜交種子播種，最終獲得雜交蘆筍品種。為我國蘆筍種質資源的利用與改良提供了一條有效的途徑。本專利技術的用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，其具體步驟如下：1、蘆筍兩性株的選取與開花觀察在蘆筍大棚中，待蘆筍開始開花時，選取出現花朵中雌蕊退化不完全的雄性植株，掛牌標記；將雌蕊退化不完全的雄性植株花朵摘下，在解剖鏡下觀察其雌蕊結構，判定其雌性育性是否恢復，若恢復則繼續觀察，若未恢復則不予選取；對于初步鑒定的植株，繼續觀察其后續開花情況，如果仍然會出現部分花朵中雌蕊退化不完全，恢復其雌性育性時，則將該植株標記為兩性株；2.雜交育種的實施(1)兩性花選擇與自交選擇生長健壯、無病無害的雄性兩性株，做好標識；根據所選擇的兩性株及其開花習性，選擇兩性花進行自交并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子保存；(2)兩性花自交種播種與自交純化將通過自交獲得的兩性株種子播種，經苗期和成株期，在成株期現蕾或開花時，找到雄株兩性株(該世代兩性株的比例理論上高于上一個世代)，對兩性花進行自交，避免其他花的傳粉，并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子，再次進行上述方式的播種與自交，如此自交3個世代后，得到純合的自交種子；(3)雜交與雜交種的獲得將獲得的自交3個世代后的純合的自交種子播種，待其長至成株期；在成株期現蕾或開花時，在田間找到雌株與超雄株；在上午的7:30，將超雄株的剛開放的花摘下，用鑷子輕輕敲打花藥，將花藥收集在一個玻璃杯內；隨即用毛筆蘸刷花藥在純合雌株的雌花柱頭上，由于蘆筍開花是按照蘆筍枝條自上而下的特點，枝條上花朵不會在同一天開花，因此授粉工作需要做6天，以滿足雜交量的需要；完成人工輔助授粉后，將授粉后的花朵標記并套上牛皮紙袋子直到種子成熟；(4)雜交后的管理雜交之后，為防止授粉枝條上還有其他花長出，影響雜交種子坐果和收獲，每隔兩天將新長出的花立即摘除，共檢查5次。在雜交期間，為保證授粉花朵正常發育，需經常檢查；(5)收獲管理在雜交種子成熟(果實變紅)時，將雜交的果實摘下，放在牛皮紙袋中，置于陽光下曬2天，后取出果實中的種子，置于干燥的牛皮紙袋中。本專利技術的有益效果在于：1、提供的用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，是用于蘆筍雜交育種的一種新技術，為我國蘆筍種質資源的利用與改良提供有效的方法。2、本方法易操作、蘆筍雜交育種效果佳。具體的實施例：下面結合實施例對本專利技術作進一步的詳述。實施例所用方法同
技術實現思路
部分描述。實施例1：1、以Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)自交純合后代進行雜交試驗(1)兩性株的選擇與自交選擇Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)生長健壯、無病無害的雄性兩性株，根據所選擇的兩性株及其開花習性，選擇兩性花進行自交并做好標記。待自交的花朵結出果實并成熟后，分別收獲Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)的自交種子保存。(2)兩性花自交種播種與自交純化將Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)通過自交獲得的兩性株種子播種，在成株期現蕾或開花時，分別找到雄株兩性株的兩性花進行自交，避免其他花的傳粉，并做好標記。待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子，再次進行上述方式的播種與自交，如此自交3個世代后，得到純合的Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)的自交種子。(3)雜交與雜交種的獲得將獲得的自交3個世代后的純合的Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)的自交種子播種，常規田間管理，待其長至成株期。在成株期現蕾或開花時，在田間找到Grande(格蘭德)的雌株與Diego(迪艾格)的超雄株。在上午的7:30，將Diego(迪艾格)超雄株的剛開放的花摘下，收集在一個玻璃杯內。上午8:00～9:30是蘆筍開花較為集中的一個時段，同時也是授粉的最佳時段。授粉時，將剛從Diego(迪艾格)超雄株雄花上取下的花粉，用毛筆蘸刷在Grande(格蘭德)的純合雌株的雌花柱頭上。由于蘆筍開花是按照蘆筍枝條自上而下的特點，枝條上花朵不會在同一天開花，因此授粉工作需要做6天，以滿足雜交量的需要。完成人工輔助授粉后，將授粉后的花朵標記并套上牛皮紙袋子直到種子成熟。(4)雜交后的管理將Grande(格蘭德)和Diego(迪艾格)純合的后代進行雜交之后，為防止授粉枝條上還有其他小花長出，影響雜交種子坐果和收獲，每隔兩天將新長出的小花立即摘除，共檢查5次。在雜交期間，為保證授粉花朵正常發育，需經常檢查。(5)收獲管理本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，其特征在于該方法的具體步驟如下：一、蘆筍兩性株的選取與開花觀察蘆筍大棚中的蘆筍開始開花時，選取出現花朵中雌蕊退化不完全的雄性植株，掛牌標記；將雌蕊退化不完全的雄性植株花朵摘下，在解剖鏡下觀察其雌蕊結構，判定其雌性育性是否恢復，若恢復則繼續觀察，若未恢復則不予選取；對于初步鑒定的植株，繼續觀察其后續開花情況，如仍然會出現部分花朵中雌蕊退化不完全，恢復其雌性育性時，則將該植株標記為兩性株；二.雜交育種的實施(1)兩性花選擇與自交選擇生長健壯、無病無害的雄性兩性株，做好標識；根據所選擇的兩性株及其開花習性，選擇兩性花進行自交并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子保存；(2)兩性花自交種播種與自交純化將通過自交獲得的兩性株種子播種，經苗期和成株期，在成株期現蕾或開花時，找到雄株兩性株，對兩性花進行自交，并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子，再次進行上述方式的播種與自交，如此自交3～4個世代后，得到純合的自交種子；(3)雜交與雜交種的獲得將獲得的自交3～4個世代后的純合的自交種子播種，待其長至成株期；在成株期現蕾或開花時，在田間找到雌株與超雄株；在上午的7:30～8:30，將超雄株的剛開放的花摘下，用鑷子輕輕敲打花藥，將花藥收集在一個玻璃杯內；隨即用毛筆蘸刷花藥在純合雌株的雌花柱頭上，授粉工作需做6～7天；完成人工輔助授粉后，將授粉后的花朵標記并套上牛皮紙袋子直到種子成熟；(4)雜交后的管理雜交之后，每隔兩天將新長出的花立即摘除，共檢查5次；在雜交期間，為保證授粉花朵正常發育，需經常檢查；(5)收獲管理在雜交種子果實變紅成熟時，將雜交的果實摘下，放在牛皮紙袋中，置于陽光下曬2～3天，后取出果實中的種子，置于干燥的牛皮紙袋中。...
【技術特征摘要】
1.一種用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，其特征在于該方
法的具體步驟如下：
一、蘆筍兩性株的選取與開花觀察
蘆筍大棚中的蘆筍開始開花時，選取出現花朵中雌蕊退化不完全的雄性植
株，掛牌標記；將雌蕊退化不完全的雄性植株花朵摘下，在解剖鏡下觀察其雌蕊
結構，判定其雌性育性是否恢復，若恢復則繼續觀察，若未恢復則不予選取；對
于初步鑒定的植株，繼續觀察其后續開花情況，如仍然會出現部分花朵中雌蕊退
化不完全，恢復其雌性育性時，則將該植株標記為兩性株；
二.雜交育種的實施
(1)兩性花選擇與自交
選擇生長健壯、無病無害的雄性兩性株，做好標識；根據所選擇的兩性株
及其開花習性，選擇兩性花進行自交并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟
后，收獲種子保存；
(2)兩性花自交種播種與自交純化
將通過自交獲得的兩性株種子播種，經苗期和成株期，在成株期現蕾或開
花時，找到雄株兩性株，對兩性花進行自...
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉正杰，毛自朝，林春，張園，王樂，徐紹忠，李和洲，
申請(專利權)人：云南農業大學，昆明市東川區成長農業科技開發有限責任公司，
類型：發明
國別省市：云南;53
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