牛血清白蛋白?鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶制造技術

本發明專利技術公開一種牛血清白蛋白?鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，在牛血清白蛋白?鉑納米材料水溶液中加入硝酸鉍水溶液，與磷酸鹽緩沖液混勻后水浴加熱，加熱完畢后的混合溶液經過超濾并水洗得到鉍?牛血清白蛋白?鉑納米復合材料模擬過氧化物酶。牛血清白蛋白?鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化酶可催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’?四甲基聯苯胺鹽酸鹽顯色，對3,3’,5,5’?四甲基聯苯胺鹽酸鹽的米氏常數為0.054?mmol/L，對過氧化氫的米氏常數為13.24?mmol/L。同時該模擬酶耐酸堿、耐高溫、耐高鹽，具有優異的室溫穩定性。

【技術實現步驟摘要】


本專利技術涉及具有模擬過氧化物酶特性的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料，屬于納米技術和仿生


技術介紹

酶是一種在生物體內具有催化活性的蛋白質、RNA或者復合體。酶催化的專一性、高效性和可調控性決定了它是作為生命體內催化底物進行反應的核心物質。酶的應用十分廣泛，利用各種生物酶不僅能夠為科學研究領域提供極大的幫助還在很大的程度上提高了人們的生活質量乃至健康水平。但是酶容易受到多種物理、化學因素的影響而失去活性，而且天然酶的來源有限，價格昂貴，對實驗操作的精確度和精細度有很高的要求。因此，隨著研究的深入，對各種人工模擬酶的合成和使用成為研究的熱點。
過氧化物酶是由微生物或植物所產生的一類氧化還原酶，它們能催化很多反應，并且以過氧化氫為電子受體催化底物氧化，而過氧化氫是生化反應中重要的中間產物，物種的生存離不開過氧化氫參與的催化反應。天然過氧化物酶含量少，易受外界環境干擾，價格昂貴。因此對于擁有模擬過氧化物酶活性的新型納米材料的研究越來越受到人們的關注。
本專利技術提供了一種具有高活性、高穩定性的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶。

技術實現思路

本專利技術的目的是提供一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶及其制備方法。
為了實現上述目的，本專利技術采用以下技術方案：
本專利技術所述的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是由下述方法制備而成的：在5mL濃度為50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL濃度為16mmol/L氯鉑酸溶液和0.5mL濃度為1.5mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80℃下反應2h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液，將牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-鉑納米復合材料的粉末；在0.6mL濃度為23.8mg/mL的牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液中加入0.6mL濃度為0.5mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8mL濃度為10mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80℃下反應2.5h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的水溶液。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在磷酸鹽緩沖液中依次加入過氧化氫，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽和牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料水溶液，混合后溫浴，溶液由無色變為藍色，在652nm處有一最大吸收峰。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的活性在pH=5時達到最大。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的活性在37℃時達到最大。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是對3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的米氏常數為0.054mmol/L，對過氧化氫的米氏常數為13.24mmol/L。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在2.79mL濃度為100mmol/L，pH=5的磷酸鹽緩沖液中依次加入1mL濃度為2mol/L的過氧化氫，0.2mL濃度為16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽，10μL濃度為4.76mg/mL的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料水溶液，混合后37℃溫浴10分鐘，溶液由無色變為藍色，在652nm處有一最大吸收峰。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在30~80℃溫度下保存2小時后模擬過氧化物酶活性無明顯變化，具有良好的穩定性。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在pH3~11保存2小時后模擬過氧化物酶活性無明顯變化，具有良好的穩定性。
所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在0~7.5mol/L氯化鈉溶液中保存2小時后模擬過氧化物酶活性無明顯變化，具有良好的穩定性；或者在室溫下保存30天后活性無明顯變化，具有良好的室溫穩定性，且相對催化活性達到98.9%。
本專利技術所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶的制備方法，包括如下步驟：在5mL濃度為50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL濃度為16mmol/L氯鉑酸溶液和0.5mL濃度為1.5mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80℃下反應2h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液，將牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-鉑納米復合材料的粉末；在0.6mL濃度為23.8mg/mL的牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液中加入0.6mL濃度為0.5mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8mL濃度為10mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80℃下反應2.5h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的水溶液。
具體地說，（一）本專利技術所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，由下述方法制備而成的：在牛血清白蛋白-鉑納米材料的水溶液中加入硝酸鉍水溶液，混勻后水浴加熱，超濾并水洗，得到牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料水溶液。
本專利技術所述的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的制備中的各組分的配比按本領域常規方法可以完成的。但本專利技術優選的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的制備由以下方法制備：在0.6mL濃度為23.8mg/mL的牛血清白蛋白-鉑水溶液中加入0.6mL濃度為0.5mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8mL濃度為10mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80℃下反應2.5h。反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的水溶液。
所述的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料水溶液通過冷凍干燥得到牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料粉末。以上過程中使用的所有玻璃器皿均經過王水浸泡，并用雙蒸水徹底清洗，晾干。
（二）本專利技術所述的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的過氧化物酶活性
在磷酸鹽緩沖液中依次加入過氧化氫、3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽和牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料水溶液，混勻后溫浴10分鐘，觀察顏色變化并測定紫外可見吸收光譜。
本專利技術所述的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，能催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽生成藍色產物，該產物在652nm處有最大吸收峰。
本專利技術所述的牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的活性在pH=5，37℃時達到最大，并本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種牛血清白蛋白?鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是由下述方法制備而成的：在5?mL濃度為50?mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5?mL?濃度為16?mmol/L氯鉑酸溶液和0.5?mL濃度為1.5?mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80?℃下反應2?h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000?r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白?鉑納米復合材料水溶液，將牛血清白蛋白?鉑納米復合材料水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白?鉑納米復合材料的粉末；在0.6?mL濃度為23.8?mg/mL的牛血清白蛋白?鉑納米復合材料水溶液中加入0.6?mL濃度為0.5?mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8?mL?濃度為10?mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80?℃下反應2.5?h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000?r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白?鉑/鉍復合納米材料的水溶液。

【技術特征摘要】
1.一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是由下述方法制備而成的：在5mL濃度為50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL濃度為16mmol/L氯鉑酸溶液和0.5mL濃度為1.5mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80℃下反應2h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液，將牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-鉑納米復合材料的粉末；在0.6mL濃度為23.8mg/mL的牛血清白蛋白-鉑納米復合材料水溶液中加入0.6mL濃度為0.5mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8mL濃度為10mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80℃下反應2.5h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料的水溶液。
2.根據權利要求1所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在磷酸鹽緩沖液中依次加入過氧化氫，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽和牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料水溶液，混合后溫浴，溶液由無色變為藍色，在652nm處有一最大吸收峰。
3.根據權利要求1或2所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的活性在pH=5時達到最大。
4.根據權利要求1或2所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的活性在37℃時達到最大。
5.根據權利要求1或2所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是對3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽的米氏常數為0.054mmol/L，對過氧化氫的米氏常數為13.24mmol/L。
6.根據權利要求1或2所述的一種牛血清白蛋白-鉑/鉍復合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在2.79mL濃...

【專利技術屬性】
技術研發人員：陳偉，沈奕珉，吳鋼偉，鄧豪華，彭花萍，
申請(專利權)人：福建醫科大學，
類型：發明
國別省市：福建;35