一種長春新堿分子印跡傳感器的制備方法技術

本發明專利技術公開了一種長春新堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，首先，將玻碳電極用3?巰丙基三乙氧基硅烷和氯酸金修飾，制備得到納米金修飾玻碳電極；然后溶膠?凝膠印跡技術、層層自組裝法和滴涂法相結合，在修飾玻碳電極表面成功地研制了一種具有特異選擇性的長春新堿印跡電化學傳感器，本發明專利技術制備的長春新堿分子印跡傳感器的響應大大提高。該印跡傳感器對長春新堿表現出較高的親和性和選擇性。該長春新堿分子印跡傳感器與電化學工作站連接構成能夠專一模板分子識別傳感器。本發明專利技術制得的傳感器成本低、靈敏度高、特異性好、檢測快速，可反復使用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及的是一種分子印跡傳感器的制備方法及快速檢測應用
，特別涉及一種檢測長春新堿分子印跡傳感器的制備方法，具體是基于分子印跡特異性識別作用，用于檢測藥品、生物樣品中的長春新堿。
技術介紹
長春新堿能抗癌，療效比長春堿約高10倍，可用于治療急性淋巴細胞性白血病，療效較好，對其他急性白血病、何杰金氏病、淋巴肉瘤、網狀細胞肉瘤和乳腺癌也有療效。與長春花堿（vinblastine）、泛洛洛新及泛洛洗汀等一起含在蔓長春花（Vincamajor）中的生物堿。具有使細胞分裂（有絲分裂）在中期停止的作用，這與秋水仙素相似，但其作用比秋水仙素更強。與秋水仙素一樣可以與微管蛋白結合而抑制其生物活性，但結合部位不同。另外它與秋水仙素不同的是對微管蛋白以外的蛋白質如肌動蛋白及10納米細絲蛋白等也起作用。在臨床醫學上作為抗癌劑之一而被應用，特別是對造血器官的腫瘤比較有效。長春堿硫酸鹽可用于治療何杰金氏病和絨毛膜上皮癌，療效較好；對淋巴肉瘤、網狀細胞肉瘤、急性白血?。╒P，VDLP方案中的\V\為長春新堿,D為柔紅霉素,\L\為門冬酰胺酶,\P\為潑尼松）、乳腺癌、腎母細胞瘤、卵巢癌、睪丸癌、神經母細胞瘤和惡性黑色素瘤等也有一定療效。長春新堿是一種雙吲哚型生物堿。分子式C46H56N4O10，分子量為824.96。存在于夾竹桃科植物長春花中。甲醇中重結晶時為針狀結晶。熔點211～216℃。由于夾竹桃科植物除了長春新堿以外還含有其它多種組分，如長春堿、次長春堿，而它們的性質相似，導致長春新堿提取分離、測定的困難，因此，找到一種選擇性好、靈敏度高、操作簡便使用的檢測長春新堿的方法十分重要。傳統檢測長春新堿的方法主要有高效液相色譜、液相色譜-質譜法，色譜法的準確度受到一定限制、而且儀器比較貴需要專業人員操作，也限制了其應用。分子印跡技術是當前開發具有分子識別功能的高選擇性材料的主要方法之一，它是通過在模板分子周圍形成一個高度交聯的剛性高分子，除去模板分子后在分子印跡聚合物的網絡結構中留下具有結合能力的識別位點，對模板分子表現出高選擇識別性能的一種技術。這項技術以其構效預定性和特異識別性越來越受到人們的關注，已經成功用于固相萃取或微固相萃取，親和色譜或毛細管電泳及傳感器等領域。依據此技術制備的分子印跡傳感器，應用于藥物分析、環境保護及生命科學研究中起著十分重要的作用。將功能分子以適當方式修飾到電極上，制備選擇性好、靈敏度高、有一定使用壽命可再生的電化學傳感器成為分析科學工作者努力探索的課題。但是傳統的印跡方法所制備的印跡膜厚度難以控制，高交聯度使得電子傳遞速度和響應慢、檢測下限高而且再生和可逆性差，影響分子印跡技術在電化學傳感器中的應用。因此，建立一種靈敏、快速、簡便、特異性高、重復性好經濟使用的檢測方法，對研究人員、生產企業、質控人員、進出口商檢、政府管理部門等的迫切需要的，對食品、藥品、環境安全中的長春新堿含量準確定量測定十分必要，對于長春新堿生產和藥理研究也具有重要的意義。
技術實現思路
本專利技術的目的是將分子印跡與電化學傳感器相結合，提供了一種檢測長春新堿分子印跡傳感器的制備方法，主要是以長春新堿為模板，在玻碳電極表面通過3-巰丙基三乙氧基硅烷、石墨烯及納米金粒子之間的電化學作用而制備的分子印跡傳感器。儀器與試劑CHI660B電化學工作站（上海辰華儀器公司），實驗采用三電極體系：鉑絲電極為輔助電極，Ag/AgCl為參比電極（SCE），玻碳電極（GCE）為工作電極；KQ-250E型超聲波清洗器（坤峰超聲儀器有限公司）。石墨烯；3-巰丙基三乙氧基硅烷、無水乙醇；衣康酸，N,N-二甲基甲酰胺（DMF）；氯金酸；長春新堿；丙烯酸甲酯；過硫酸銨，磷酸緩沖溶液。氧化石墨烯的制備：在反應器中，按如下組成質量百分濃度加入，濃硫酸：50~60%，石墨烯：3~8%，高錳酸鉀：1.0~5%，超聲分散20~30min，再加入32~42%去離子水，各組分含量之和為百分之百，溫度升至65±2℃攪拌反應8~10h，冷卻至室溫，過濾，用去離子水反復洗滌至濾液為中性，真空干燥，得到氧化石墨烯；本專利技術的目的通過如下技術方案實現。一種長春新堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，該方法具有以下工藝步驟：（1）納米金修飾玻碳電極：將玻碳電極依次用0.3μm、0.05μmAl2O3粉末進行表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮氣吹干，將玻碳電極放入含3-巰丙基三乙氧基硅烷質量百分濃度為18~23%的乙醇溶液中，溫度升至50±2℃，浸泡6~8h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮氣吹干，將玻碳電極浸泡在0.1~0.2mol/L氯酸金溶液中，浸泡時間為4~6h，再放入質量百分濃度為20%的水合肼溶液中浸泡10min，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮氣吹干，即得納米金修飾玻碳電極；（2）印跡溶膠的制備：在反應器中，按如下組成質量百分濃度加入，乙醇：62~72%，氧化石墨烯：5~8%，丙烯酸甲酯：10~18%，衣康酸：5~10%，過硫酸銨：2~6%，攪拌10min，再加入長春新堿：1.0~3.0%，各組分含量之和為百分之百，溫度升至65±2℃攪拌反應6~8h，即得印跡溶膠；（3）長春新堿分子印跡傳感器的制備方法：取步驟（2）的印跡溶膠于12μL滴加到步驟（1）制備的納米金修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發干溶劑后，將其用乙醇與硫酸（體積比為乙醇：硫酸為18:1）混合溶液浸泡6~8h，除去電極上的模板分子，即得長春新堿分子印跡傳感器。本專利技術的優點及效果是：本專利技術將溶膠-凝膠印跡技術、石墨烯、納米金粒子、層層自組裝法和滴涂法相結合，在玻碳電極表面成功地研制了一種具有特異選擇性的印跡電化學傳感器。通過與無石墨烯和納米金修飾的分子印跡電極那個的響應進行比較，本申請制備的長春新堿分子印跡傳感器的響應大大提高。該印跡傳感器對長春新堿表現出較高的親和性和選擇性，響應電流與長春新堿的濃度在1.0×10-7~9.0×10-5mol/L范圍內呈良好的線性關系，檢測限為1.38×10-8mol/L將本專利技術制備的長春新堿分子印跡傳感器成功用于藥品、生物樣品中長春新堿的檢測中，回收率在95.82~104.6%之間，因此本專利技術制備的分子印跡傳感器可廣泛應用于化工、生物醫藥、食品、環保檢測等相關領域。具體實施方式實施例1（1）納米金修飾玻碳電極：將玻碳電極依次用0.3μm、0.05μmAl2O3粉末進行表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮氣吹干，將玻碳電極放入含3-巰丙基三乙氧基硅烷質量百分...

【技術保護點】
一種長春新堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，該方法具有以下工藝步驟：（1）納米金修飾玻碳電極：將玻碳電極依次用0.3μm、0.05μmAl2O3粉末進行表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮氣吹干，將玻碳電極放入含3?巰丙基三乙氧基硅烷質量百分濃度為18~23%的乙醇溶液中，溫度升至50±2℃，浸泡6~8?h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮氣吹干，將玻碳電極浸泡在0.1~0.2?mol/L氯酸金溶液中，浸泡時間為4~6?h，再放入質量百分濃度為20%的水合肼溶液中浸泡10?min，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮氣吹干，即得納米金修飾玻碳電極；（2）印跡溶膠的制備：在反應器中，按如下組成質量百分濃度加入，乙醇：62~72%，氧化石墨烯：5~8%，丙烯酸甲酯：10~18%，衣康酸：5~10%，過硫酸銨：2~6%，攪拌10?min，再加入長春新堿：1.0~3.0%，各組分含量之和為百分之百，溫度升至65±2℃攪拌反應6~8?h，即得印跡溶膠；（3）長春新堿分子印跡傳感器的制備方法：取步驟（2）的印跡溶膠于12μL滴加到步驟（1）制備的納米金修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發干溶劑后，將其用乙醇與硫酸混合溶液浸泡6~8h，除去電極上的模板分子，即得長春新堿分子印跡傳感器。...

【技術特征摘要】
1.一種長春新堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，該方法具有以下工藝步驟：
（1）納米金修飾玻碳電極：將玻碳電極依次用0.3μm、0.05μmAl2O3粉末進行表面拋光，然
后用高純水超聲清洗，用氮氣吹干，將玻碳電極放入含3-巰丙基三乙氧基硅烷質量百分濃
度為18~23%的乙醇溶液中，溫度升至50±2℃，浸泡6~8h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮
氣吹干，將玻碳電極浸泡在0.1~0.2mol/L氯酸金溶液中，浸泡時間為4~6h，再放入質量百
分濃度為20%的水合肼溶液中浸泡10min，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮氣吹干，即得納
米金修飾玻碳電極；
（2）印跡溶膠的制備：在反應器中，按如下組成質量百分濃度加入，乙醇：62~72%，氧化
石墨烯：5~8%，丙烯酸甲酯：10~18%，衣康酸：5~10%，過硫酸銨：2~6%，攪拌10min，...

【專利技術屬性】
技術研發人員：李慧芝，翟殿棠，許崇娟，
申請(專利權)人：濟南大學，
類型：發明
國別省市：山東;37