本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌YB-F7及其在防治植物病害中的應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)YB-F7菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為CGMCC?NO.10834;該菌株的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1。本發(fā)明專利技術(shù)所篩選分離出的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌YB-F7是一株對小麥全蝕病菌、小麥紋枯病和小麥赤霉病菌土傳病害具有較強抑制的微生物菌劑,本發(fā)明專利技術(shù)YB-F7菌劑可作為作物播種期或病害始發(fā)期施用,采用發(fā)酵制劑與種子拌種或用水稀釋后通過灌根施入作物根際或噴霧施用;可以與對本生防菌株無副作用的其它殺菌劑、植物調(diào)節(jié)劑混合使用,調(diào)節(jié)土壤微生物菌群,控制小麥土傳病害達到生態(tài)高效的目的。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【專利說明】-種甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌YB-F7及其在防治植物病害中的 應(yīng)用 -、
: 本專利技術(shù)設(shè)及植物病害防治
,具體設(shè)及一種甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌YB-F7W 及利用該芽抱桿菌防治植物病害作用及在制備防治植物病害菌劑中的應(yīng)用。 二、技術(shù)背景: 目前,微生物防治技術(shù)是現(xiàn)代化可持續(xù)發(fā)展農(nóng)業(yè)的重要組成部分,由于化學(xué)農(nóng)藥 的使用,導(dǎo)致自然界長期積累有害物質(zhì),造成環(huán)境污染、生態(tài)失衡等嚴重后果,隨著對微生 物農(nóng)藥運一有益環(huán)境、無污染、維持生態(tài)平衡的防治技術(shù)研究,代替化學(xué)農(nóng)藥的使用已成為 目前微生物防治研究的熱點。 芽抱桿菌是一種革蘭氏陽性菌,具有生長迅速、性狀穩(wěn)定、適應(yīng)性和抗逆性強,在 大田應(yīng)用中,較其它生防菌優(yōu)勢明顯,同時對人畜無毒、對環(huán)境無污染;芽抱桿菌代謝產(chǎn)物 豐富,分泌到胞外可抑制、殺死病原菌,或改變病原菌環(huán)境抑制其生長;其中一些菌株可W 產(chǎn)生多種抗菌物質(zhì),運些抗菌物質(zhì)在生防過程中起著關(guān)鍵作用。芽抱桿菌是一類常見的生 防菌,目前已有多種具有括抗、促生等功能的芽抱桿菌報道。因此,篩選高效和活性穩(wěn)定的 括抗菌株,生產(chǎn)高效的生物菌劑,推進新型微生物農(nóng)藥的研究,保障我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展具 有重要意義。 Ξ、
技術(shù)實現(xiàn)思路
: 本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問題是:提供一種甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylotrophicus)YB-F7及其在防治植物病害中的應(yīng)用。本專利技術(shù)甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌 (Bacillus methylotro地icus)YB-F7在防治植物病害中的應(yīng)用具體為用于在生物防治全 蝕病菌引起的植物±傳病害、紋枯病菌引起的植物根莖部病害或根腐鑲刀菌引起的植物莖 基腐病害中的應(yīng)用;還能夠用于制備防治全蝕病菌引起的植物±傳病害、紋枯病菌引起的 植物根莖部病害或根腐鑲刀菌引起的植物莖基腐病害菌劑中的應(yīng)用。 本專利技術(shù)通過W下技術(shù)方案解決上述問題: 本專利技術(shù)提供一種甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7,該菌 株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、,保藏編號為CGMCC NO. 10834。 所述甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7的保藏信息如下: [000引分類命名:甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌; 保藏單位:中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中屯、(CGMCC); 保藏地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路巧院3號,中國科學(xué)院微生物研究所;[00川保藏日期:2015年5月21日;[001 ^ 保藏編號:CGMCC NO. 10834。 根據(jù)上述的甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7,所述甲基 營養(yǎng)型芽抱桿菌YB-巧的核巧酸序列為SEQ ID N0.1。 本專利技術(shù)甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7用于在生物防 治全蝕病菌引起的植物±傳病害、紋枯病菌引起的植物根莖部病害或根腐鑲刀菌引起的植 物莖基腐病害中的應(yīng)用。 本專利技術(shù)甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7用于制備防治 全蝕病菌引起的植物±傳病害、紋枯病菌引起的植物根莖部病害或根腐鑲刀菌引起的植物 莖基腐病害菌劑中的應(yīng)用。 本專利技術(shù)的積極有益效果: 本專利技術(shù)所篩選出的甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7是 一株對小麥全蝕病菌(Gaeumannomyces gram inis)、小麥紋枯病菌(Rhizoctonia cerealis)、根腐鑲刀菌(Fusarium graminearunOzh傳病害具有較強抑制的微生物菌劑, YB-F7菌株對小麥全蝕病菌、小麥紋枯病菌和根腐鑲刀菌室內(nèi)抑菌效果分別為90 %、85.5% 和79.8 % ;溫室盆栽防治小麥全蝕病、小麥紋枯病效果分別達到65.7 %、76.5 %,防效高于 對照藥劑或與對照藥劑相當。本專利技術(shù)YB-巧菌株是由小麥根際±壤中分離得到的,對農(nóng)作物 安全;本專利技術(shù)YB-巧菌劑可作為作物播種期或病害始發(fā)期施用,采用發(fā)酵制劑與種子拌種或 用水稀釋后通過灌根施入作物根際或噴霧施用;并且,可W與對本生防菌株無副作用的其 它殺菌劑、植物調(diào)節(jié)劑混合使用,調(diào)節(jié)±壤微生物菌群,控制小麥±傳病害達到生態(tài)高效的 目的。 四、【附圖說明】: 圖1本專利技術(shù)YB-巧菌株對小麥全蝕病菌的抑菌效果圖; 圖2本專利技術(shù)YB-巧菌株對小麥紋枯病菌的抑菌效果圖; 圖3本專利技術(shù)YB-巧菌株對小麥根腐鑲刀菌的抑菌效果圖; 圖4本專利技術(shù)生防菌YB-巧防治小麥紋枯病室內(nèi)防效測定示意圖; 圖5本專利技術(shù)生防菌YB-巧防治小麥全蝕病盆栽試驗示意圖; 圖6本專利技術(shù)YB-巧菌株16rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育樹示意圖。 五、【具體實施方式】: W下結(jié)合實施例進一步闡述本專利技術(shù),但并不限制本專利技術(shù)的內(nèi)容。實施例1:本專利技術(shù)甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylo1:;rophicus)YB-F7菌株 的篩選與分離: 供試病原真菌:小麥全蝕病菌(Gaeumannomyces graminis )、小麥紋枯病菌 (Rhizoctonia cereal is)和根腐鑲刀菌(Fusarium graminearum)。 細菌培養(yǎng)基: NA培養(yǎng)基:牛肉浸膏3g,酵母膏l(xiāng)g,蛋白腺5g,葡萄糖10g,瓊脂15g,水lL,pH6.8~ 7.0,12rC 高壓滅菌 30min。LB液體培養(yǎng)基:蛋白腺lOg,酵母浸膏5g,化C1 lOg,水lL,pH 7.0,121°C高壓滅菌 30min。 本專利技術(shù)甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7的分離與純化: 本申請人在河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院駐馬店西平縣于營村實驗田種植基地,于2010~ 2014年進行小麥根部病害分離及±壤根際微生物多樣性變化調(diào)查研究,在此研究試驗中對 括抗菌株平板篩選分離。±壤采集是從小麥根際±壤去掉根部表面約5cm的覆±,按S形,隨 機采集植株根系結(jié)合的松散±體,或從±壤中整體挖出,采用抖±法抖掉混合±樣,將每個 地點采集的3個重復(fù)±樣陰干。稱取Ig陰干的±樣裝入滅菌試管中,加入9mL無菌水,在滿旋 儀上充分滿旋l-2min,制成1:10的±壤稀釋液。從所得±壤稀釋液中取出11^,加入91^無菌 水充分滿旋成1:10的上壤稀釋液,依次類推,制成1: 1〇3、1: 1〇4、1: 1〇5的上壤稀釋液,各取 200化±壤稀釋液于平板中間,用涂布棒將菌液涂開使菌液均勻的分布于NA平板表面,置于 28°C的恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)約2地。挑取不同菌落形態(tài)的單菌落,通過鏡檢后在NA平板上劃 線,28°C純化培養(yǎng),菌落生長特性不發(fā)生顯著變化的菌株保存于NA培養(yǎng)基斜面?zhèn)溆茫吹玫?分離純化的括抗菌。 括抗菌篩選: 將上述分離純化得到的括抗菌W病原真菌(即小麥全蝕病菌、小麥紋枯病菌和根 腐鑲刀菌)為祀標,采用平板對時培養(yǎng)法,將直徑5mm的菌柄接種于PDA平板十字交叉中央 處,25°C培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)l-2d,接4種不同細菌,25°C培養(yǎng)2-3d后,觀察其抑菌效果,并測量 抑菌帶大小,選擇抑菌效果較好的菌株進行復(fù)篩,即得到了抑菌效果較好的初篩括抗本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus?methylotrophicus)YB?F7,其特征在于:該菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為CGMCC?NO.10834。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:全鑫,楊艷艷,薛保國,孫虎,楊麗榮,武超,
申請(專利權(quán))人:河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所,
類型:發(fā)明
國別省市:河南;41
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