生物組織樣本的凍存方法和生物組織凍存容器技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種生物組織的凍存方法和生物組織凍存容器，凍存方法包括：將生物組織置于承載片的表面，將粘附有生物組織的承載片沿生物組織凍存容器的長軸方向放置于生物組織凍存容器中，密封生物組織凍存容器并置于低溫下凍存；凍存容器包括容器本體、密封蓋和至少一個用于承載分離后的生物組織的承載片，該承載片可分離地置于容器本體內(nèi)；本發(fā)明專利技術(shù)的凍存方法能夠解決由于生物組織容易被凍存在生物組織凍存容器的內(nèi)壁上而產(chǎn)生的生物組織不易被識別、不易被取出或者在取出時受損的問題，并且能避免生物組織在制作冰凍切片時被反復(fù)凍融的情況出現(xiàn)，從而有利于對生物組織的樣本質(zhì)量(例如所含的RNA、蛋白、抗原、抗體等生物大分子)的保護(hù)。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于醫(yī)療器械
，涉及一種生物組織的凍存方法和生物組織凍存容器。
技術(shù)介紹
在研究生物體生命活動的過程中，常常將離體生物組織作為實驗對象進(jìn)行研究，這些組織包括正常組織或腫瘤組織等。為了對生物組織的結(jié)構(gòu)特性或生化特性進(jìn)行更深入的研究，常常需要先對生物組織進(jìn)行低溫保存(例如在液氮中進(jìn)行保存)，在凍存后不同的時候按需求再進(jìn)行對這些生物組織的研究。凍存容器常被用來執(zhí)行對生物組織的低溫保存這一功能。為了使凍存容器既能長期維持低溫保存功能又能便于人們隨時取出在凍存容器內(nèi)保存的生物組織，凍存容器常常用耐低溫的透明材料制成，例如聚三氟氯乙烯、聚四氟乙烯等；然而，如果凍存后的生物組織為白色或透明組織，當(dāng)其粘附在凍存容器的內(nèi)壁上時，往往與凍存容器的色差較小而不容易被人眼識別并取出。另外，生物組織在低溫下大多會凍成一團并且牢牢地粘貼在凍存容器的內(nèi)壁上，通常呈團狀沉積在凍存容器的最底部，這常常使得生物組織在低溫下不易取出。若使用鑷子等夾取裝置從凍存容器上強行剝離生物組織，則有可能對生物組織的形態(tài)學(xué)造成不可逆的損害，進(jìn)而影響到實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。一般采取的方法是先將生物組織在常溫下放置一定時間，待生物組織表面溫度升高，處于解凍狀態(tài)時，再取出生物組織并置于冰凍切片機的樣品托上，使用冷凍包埋液包埋后再次低溫冷凍，然后進(jìn)行切片、染色以及進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，或進(jìn)行任何其他相關(guān)研究。這樣的操作會造成生物組織的反復(fù)凍融，有可能對生物組織的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響，從而不利于后續(xù)的形態(tài)學(xué)觀察，也可能造成生物組織內(nèi)的RNA、DNA或蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的變性和降解，從而影響到生物組織標(biāo)本的質(zhì)量，進(jìn)而對實驗結(jié)果產(chǎn)生不利的影響。
技術(shù)實現(xiàn)思路
為了解決上述問題，本專利技術(shù)的主要目的在于提供一種生物組織的凍存方法，該方法一方面能夠解決由于生物組織被凍存在凍存容器的內(nèi)壁上而導(dǎo)致的不易被識別或者不易被取出的問題，另一方面能夠避免生物組織在制作冰凍切片時被反復(fù)凍融，從而有利于對組織標(biāo)本質(zhì)量的保護(hù)。本專利技術(shù)的另一個目的在于提供一種能夠?qū)崿F(xiàn)上述方法的生物組織凍存容器。為達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)的解決方案是：一種生物組織的凍存方法，其包括如下步驟：(1)、將分離后的生物組織置于承載片的表面；(2)、將粘附有生物組織的承載片沿生物組織凍存容器的長軸方向放置于生物組織凍存容器中；(3)、密封生物組織凍存容器并置于低溫下凍存。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，承載片可以為軟木片。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，軟木片可以進(jìn)一步含有以下組分：軟木脂45±5wt％、木質(zhì)素27±3wt％、纖維素12±3wt％、丹寧酸6±3wt％、蠟狀物5±1wt％和雜質(zhì)成分5±1wt％，其中，軟木脂、木質(zhì)素、纖維素、丹寧酸、蠟狀物和雜質(zhì)成分的重量百分比之和應(yīng)為100wt％。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，軟木片可以優(yōu)選為含有以下組分：軟木脂45wt％、木質(zhì)素27wt％、纖維素12wt％、丹寧酸6wt％、蠟狀物5wt％和雜質(zhì)成分5wt％；此時，軟木片的抗拉強度為770N/mm2，或維氏硬度為240HV，或布氏硬度為228HB，或洛氏硬度為20.3HRC。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，生物組織可以包括人體組織或哺乳動物器官組織。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，低溫優(yōu)選為在‐20℃以下。一種使用上述的凍存方法對生物組織進(jìn)行凍存的生物組織凍存容器，包括：容器本體、與容器本體可拆卸連接的密封蓋、以及至少一個用于承載分離后的生物組織的承載片，承載片沿容器本體的長軸方向可分離地置于容器本體內(nèi)。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，承載片可以為軟木片。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，軟木片可以優(yōu)選為含有以下組分：軟木脂45±5wt％、木質(zhì)素27±3wt％、纖維素12±3wt％、丹寧酸6±3wt％、蠟狀物5±1wt％和雜質(zhì)成分5±1wt％，但軟木脂、木質(zhì)素、纖維素、丹寧酸、蠟狀物和雜質(zhì)成分的重量百分比之和應(yīng)為100wt％。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，軟木片的厚度可以為6±2mm。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，容器本體的內(nèi)底面可以設(shè)有至少一條用于固定承載片的端部的固定槽，固定槽的槽口寬度等于承載片的端部的厚度。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，容器本體的內(nèi)側(cè)壁可以設(shè)有至少一個用于固定承載片的側(cè)邊部的卡合部。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，卡合部可以為卡槽，卡槽的槽口寬度等于承載片的側(cè)邊部的厚度。在本專利技術(shù)的優(yōu)選實施例中，卡合部可以包括兩個對向設(shè)置的卡槽，卡槽的槽口寬度等于或大于承載片的側(cè)邊部的厚度。由于采用上述方案，本專利技術(shù)的有益效果是：首先，本專利技術(shù)采用與生物組織凍存容器可分離的承載片來承載分離后的生物組織，然后將承載有生物組織的承載片放入生物組織凍存容器中凍存，生物組織在被凍存時粘附在承載片上，而不會粘附到生物組織凍存容器的內(nèi)壁上，從而解決了當(dāng)前的凍存方法中由于生物組織塊被凍存到生物組織凍存容器的內(nèi)壁上而造成的不易被識別或不易被取出的問題。其次，由于承載片具有良好的吸水性，而新鮮分離的生物組織是濕潤的，故而很容易粘附在承載片上而不易移動位置，操作者可以在凍存之前就將生物組織調(diào)整到所需的位置；當(dāng)此后需要使用該生物組織作冰凍切片時，可直接快速將承載片取出，無需等生物組織解凍即可直接制成冷凍切片或其他冷凍狀態(tài)下的組織樣品，使得生物組織在冰凍組織樣品中很大程度保持凍存前的狀態(tài)，能夠避免在制作冰凍組織樣品時對生物組織所進(jìn)行的反復(fù)凍融，有利于降低反復(fù)凍融對生物組織造成的損害，例如降低反復(fù)凍融對其中所含的RNA、蛋白、抗原抗體等生物大分子所造成的損害。附圖說明圖1為本專利技術(shù)實施例二的生物組織凍存容器的示意圖。圖2為本專利技術(shù)實施例二的放置了承載片的生物組織凍存容器的示意圖。圖3為本專利技術(shù)實施例二的樣品托的示意圖。圖4為本專利技術(shù)實施例二中固定了承載片的樣品托的側(cè)視圖。圖5為本專利技術(shù)實施例三的生物組織凍存容器的容器本體的示意圖。圖6為本專利技術(shù)實施例四的生物組織凍存容器的容器本體的內(nèi)底部示意圖。圖7為本專利技術(shù)實施例四的放置了承載片的生物組織凍存容器的容器本體的俯視圖。圖8為本專利技術(shù)實施例四的放置了承載有生物組織的承載片的生物組織凍存容器的容器本體的俯視圖。圖9為本專利技術(shù)實施例五的生物組織凍存容器的容器本體的俯視圖。圖10為本專利技術(shù)實施例五的放置了承載片的生物組織凍存容器的容器本體的俯視圖。圖11為本專利技術(shù)實施例六的生物組織凍存容器的容器本體的俯視圖。圖12為本專利技術(shù)實施例六的放置了承載片的生物組織凍存容器的容器本體的俯視圖。圖13為本專利技術(shù)實施例六的放置了承載有生物組織的承載片的生物本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
一種生物組織的凍存方法，其特征在于：包括如下步驟：將分離后的生物組織置于承載片的表面；將粘附有所述生物組織的承載片沿生物組織凍存容器的長軸方向放置于所述生物組織凍存容器中；密封所述生物組織凍存容器并置于低溫下凍存。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種生物組織的凍存方法，其特征在于：包括如下步驟：
將分離后的生物組織置于承載片的表面；
將粘附有所述生物組織的承載片沿生物組織凍存容器的長軸方向放置于所述生物組織凍
存容器中；
密封所述生物組織凍存容器并置于低溫下凍存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍存方法，其特征在于：所述承載片為軟木片。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的凍存方法，其特征在于：所述軟木片含有軟木脂45±5wt％、木質(zhì)
素27±3wt％、纖維素12±3wt％、丹寧酸6±3wt％、蠟狀物5±1wt％和雜質(zhì)成分5±1wt％，
軟木脂、木質(zhì)素、纖維素、丹寧酸、蠟狀物和雜質(zhì)成分的重量百分比之和為100wt％。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的凍存方法，其特征在于：所述軟木片含有軟木脂45wt％、木質(zhì)素
27wt％、纖維素12wt％、丹寧酸6wt％、蠟狀物5wt％和雜質(zhì)成分5wt％；或者，所述軟木
片的抗拉強度為770N/mm2，維氏硬度為240HV，布氏硬度為228HB，洛氏硬度為20.3HRC。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一所述的凍存方法，其特征在于：所述生物組織包括人體組織
或哺乳動物器官組織；或者，所述低溫為‐20℃以下。
6.一種實現(xiàn)如權(quán)利要求1至5中任一所述的凍存方法的生物組織凍存容...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：杜祥，
申請(專利權(quán))人：復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：上海;31