蓬亂蛋白作為腦卒中生物標志物的用途制造技術

本發明專利技術屬于醫學、生物領域，涉及蓬亂蛋白(DVL)作為腦卒中生物標志物的用途。具體地，本發明專利技術涉及蓬亂蛋白作為腦卒中診斷、罹患風險評估和預后判斷的生物標志物的用途。本發明專利技術還涉及蓬亂蛋白作為藥物篩選的靶點用于篩選治療腦卒中的藥物的用途。

【技術實現步驟摘要】
蓬亂蛋白作為腦卒中生物標志物的用途
本專利技術屬于醫學、生物領域，具體涉及蓬亂蛋白作為腦卒中診斷、罹患風險評估和預后判斷的生物標志物的用途。本專利技術還涉及蓬亂蛋白作為藥物篩選的靶點用于篩選治療腦卒中的藥物的用途。
技術介紹
從狹義上講，生物標志物是指通過化學或生物方法檢測血液或尿液來預測生理或病理狀態與疾病危險程度的一類指示劑。生物標志物是藥物研發過程中的有效工具，它提供了藥物性能及疾病進程的相關信息，反映了具體的藥物治療效果。糖尿病及免疫性疾病等多種疾病都已經根據生物標志物進行治療。然而，在腦血管病中生物標志物仍相對缺乏。而腦卒中是全球第三大高致死率、高致殘率疾病[1]，缺血性腦卒中是腦卒中的常見類型，嚴重威脅人類健康[2]。因此，探索缺血性腦卒中的生物標志物有著重要的意義。蓬亂蛋白(disheveled,DVL)作為Wnt通路的調節蛋白，參與細胞內信號轉導和對其下游靶因子的轉錄過程，在細胞增殖、腫瘤形成、胚胎發育和神經分化等方面起重要作用[3,4]。DVL是由670個氨基酸殘基組成的1種信號轉導蛋白，在機體組織細胞中廣泛表達。DVL主要包括3個保守結構域：DIX(Dis/Axinhomologousdomain)、PDZ(PSD-95與ZO-1domain)和DEP，以及位于DIX和PDZ結構域之間的富含絲氨酸/蘇氨酸區、位于PDZ結構域下游的富含脯氨酸區以及位于DEP結構域下游的高度保守C-末端區[5]，不同結構域分別與不同的信號蛋白結合來起到調節細胞的作用。但目前尚沒有將DVL作為腦卒中生物標志物的報道。
技術實現思路
本專利技術的專利技術人經過反復摸索和大量實驗，出人意料地發現蓬亂蛋白可以作為腦卒中的生物標志物，用于腦卒中的診斷、罹患風險的評估和預后的判斷等，由此完成了本專利技術。本專利技術的第一方面涉及蓬亂蛋白或其活性片段、或者檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用于診斷腦卒中和/或評估罹患腦卒中的風險。在本專利技術的一個實施方案中，其中所述的試劑盒是根據樣品中蓬亂蛋白的含量或含量的變化趨勢來診斷腦卒中和/或評估罹患腦卒中的風險。在本專利技術的一個實施方案中，其中所述的樣品為血液，例如選自血清、血漿和全血。在本專利技術的一個實施方案中，所述的樣品來源于哺乳動物，例如人、小鼠、大鼠等。在本專利技術的實施方案中，當樣品中蓬亂蛋白的含量降低或其含量低于正常值時，表明受試者患有腦卒中，或者罹患腦卒中的風險高。在本專利技術的一個實施方案中，所述的腦卒中為缺血性腦卒中。本專利技術的第二方面涉及蓬亂蛋白或其活性片段、或者檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用于評估腦卒中的治療效果或者判斷腦卒中的預后。在本專利技術的一個實施方案中，其中所述的試劑盒是根據樣品中蓬亂蛋白的含量或含量的變化趨勢來評估腦卒中的治療效果或者判斷腦卒中的預后。在本專利技術的一個實施方案中，其中所述的樣品為血液，例如選自血清、血漿和全血。在本專利技術的一個實施方案中，所述的樣品來源于哺乳動物，例如人、小鼠、大鼠等。在本專利技術的一個實施方案中，當樣品中蓬亂蛋白的含量升高時，表明腦卒中的治療有效或效果較好，或者表明腦卒中的預后較好。在本專利技術的一個實施方案中，所述的腦卒中為缺血性腦卒中。本專利技術的第三方面涉及蓬亂蛋白或其活性片段、或者檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質用于篩選預防或治療腦卒中的藥物的用途或者在制備試劑盒中的用途，其中所述的試劑盒用于篩選預防或治療腦卒中的藥物。在本專利技術的一個實施方案中，其通過檢測樣品中蓬亂蛋白的含量或含量的變化趨勢來篩選治療腦卒中的藥物。在本專利技術的一個實施方案中，其中所述的樣品為血液，例如選自血清、血漿和全血。在本專利技術的一個實施方案中，所述的樣品來源于哺乳動物，例如人、小鼠、大鼠等。在本專利技術的一個實施方案中，蓬亂蛋白可以用為藥物篩選的靶點，用于篩選預防或治療腦卒中的藥物。當施用藥物后樣品中蓬亂蛋白的水平升高時，表明該藥物可以作為預防或治療腦卒中的藥物。在本專利技術的一個實施方案中，所述的腦卒中為缺血性腦卒中。本專利技術的第四方面涉及能夠提高血液中蓬亂蛋白含量的物質用于制備預防或治療腦卒中的藥物的用途。在本專利技術的一個實施方案中，其中所述血液選自血清、血漿和全血。在本專利技術的一個實施方案中，所述的樣品來源于哺乳動物，例如人、小鼠、大鼠等。在本專利技術的實施方案中，能夠提高血液中蓬亂蛋白含量的物質可以是任何物質，例如小分子化合物、生物大分子例如蛋白質(如抗體、配體)、多肽或核酸等，該物質可以通過與蓬亂蛋白的直接作用或間接作用來提高血液中蓬亂蛋白的含量。在本專利技術的一個實施方案中，所述能夠提高血液中蓬亂蛋白含量的物質為莫諾苷。在本專利技術的一個實施方案中，所述的腦卒中為缺血性腦卒中。在本專利技術中，所述腦卒中是指由于腦部血管突然破裂或因血管阻塞造成血液循環障礙而引起腦組織損傷的一組疾病。在本專利技術的實施方案中，所述腦卒中為缺血性腦卒中，所述缺血性腦卒中是指因腦部血液循環障礙(例如頸內動脈、頸外動脈、椎動脈、大腦中動脈因狹窄或閉塞引起的循環障礙)，缺血、缺氧所致的局灶性腦組織缺血性壞死或軟化的總稱，其是腦卒中的主要類型，占腦卒中的60％～70％。在本專利技術中，所述蓬亂蛋白來源于哺乳動物，特別是人，其序列例如為AAH17225.1所示。所述蓬亂蛋白的活性片段是指具有蓬亂蛋白功能的片段，或者降解后可以在血液中檢測到的片段，其可以為蓬亂蛋白的一部分，也可以為蓬亂蛋白的氨基酸序列經過缺失、添加或替換后得到的片段；例如該活性片段為包含蓬亂蛋白與配體或受體結合的部分的片段，或者經過氨基酸的缺失、添加或替換后仍保留蓬亂蛋白功能的片段。在本專利技術中，所述檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質為本領域所公知，或者其制備方法或獲得方法為本領域所公知，通常情況下,其可以和蓬亂蛋白或其活性片段特異性結合，通過檢測該物質即可以檢測蓬亂蛋白或其活性片段的存在或含量，例如其可以為哺乳動物體內天然存在的可以與蓬亂蛋白或其活性片段結合的配體、受體或抗體，也可以為本領域技術人員制備的能夠和蓬亂蛋白特異性結合的抗體，例如為單克隆抗體或多克隆抗體。在本專利技術的實施方案中，所述檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質為多克隆抗體，其結合位點位于人Dvl蛋白的第1-100位氨基酸之間。專利技術的有益效果本專利技術通過實驗證明了蓬亂蛋白可以作為腦卒中的生物標志物，用于腦卒中的診斷、罹患風險的評估和預后的判斷；同時，蓬亂蛋白還可以作為篩選藥物的靶點，用于篩選預防或治療腦卒中的藥物。附圖說明圖1.造模后不同時間點各組大鼠血清DVL蛋白的表達情況，n＝4；＊p<0.05，＊＊p<0.01，與假手術組相比。圖2.造模后第7天各組大鼠血清DVL蛋白的表達情況，n＝4；＊＊＊p<0.001，與假手術組相比；###p<0.001，與模型組相比。圖3.LudmilaBelayev12分評分法結果，＊＊＊p<0.001與假手術組相比；###p<0.001，與模型組相比。圖4.莫諾苷對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦梗死體積MIR檢測結果，＊＊p<0.001與假手術組相比；##p<0.01，與模型組相比。具體實施方式下面將結合實施例對本專利技術的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅本文檔來自技高網...

【技術保護點】
蓬亂蛋白或其活性片段、或者檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用于診斷腦卒中和/或評估罹患腦卒中的風險。

【技術特征摘要】
1.蓬亂蛋白或其活性片段、或者檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用于診斷缺血性腦卒中和/或評估罹患缺血性腦卒中的風險，并且，所述的試劑盒是根據樣品中蓬亂蛋白的含量或含量的變化趨勢來診斷缺血性腦卒中和/或評估罹患缺血性腦卒中的風險，所述的樣品為血液。2.權利要求1的用途，其中所述的樣品選自血清、血漿和全血。3.蓬亂蛋白或其活性片段、或者檢測蓬亂蛋白或其活性片段的物質在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用于評估缺血性腦卒中的治療效果或者判斷缺血性腦卒中的預后，并且，所述的試劑盒是根據樣品中蓬亂蛋白的含量或含量的變化趨勢來評估缺血性腦卒中的治療效果或者判斷缺血性腦卒中的預后，所述的樣品為血液...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王文，孫芳玲，郭德玉，艾厚喜，劉婷婷，
申請(專利權)人：首都醫科大學宣武醫院，
類型：發明
國別省市：北京;11