本發(fā)明專利技術公開了一種自組裝短肽及其對金電極修飾的應用，該自組裝短肽的氨基酸序列為：Tyr?Val?Asn?Lys?Pro?Arg?Cys?Cys?Ala?Ala?Ala?Ala?Ala?Ala。本發(fā)明專利技術所述自組裝短肽能夠在金電極表面上自組裝修飾金電極，可以在納米材料的生物傳感器領域，作為一種新的生物傳感器材料。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于納米生物材料領域，具體涉及一種自組裝短肽及其在修飾金電極中的 應用。
技術介紹
分子自組裝指的是分子在不受外力介入的情況下，能夠進行自我組織，自我聚集 形成一種規(guī)則的結構，即能夠從一個雜亂無序的狀態(tài)轉變成一個有序的狀態(tài)。在最近的十 幾年里，分子自組裝系統(tǒng)（如氨基酸）已經成為分子生物學、化學以及材料學等學科的交匯 點，尤其是手性自組裝短肽，已經發(fā)展成為了一類新興的納米生物材料。由它們構成的納 米纖維，作為細胞三維培養(yǎng)的基質材料，同時一些特殊的短肽可以修飾金電極，作為一種新 的納米傳感器材料，具有高純度、可降解及無免疫反應的突出優(yōu)點，已被成功應用于細胞工 程、生物傳感器及生物醫(yī)學工程等領域。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種新型的自組裝短肽，增加自組裝短肽的種類，使之可 在修飾金電極作為傳感器材料使用。 本專利技術的技術方案為：一種自組裝短肽，其氨基酸序列為：SEQ ID NO. 1，具體是： Tyr Val Asn Lys Pro Arg Cys Cys Ala Ala Ala Ala Ala Ala。命名為GFS-15,下文中的 描述均采用該名稱。 GFS-15,其分子量為1407. 68。其自組裝原理是通過分子之間非共價鍵相互作用， 形成結構明確且穩(wěn)定，并具有某些理化性質的超分子結構或分子聚集體。 -種自組裝短肽對金電極修飾的應用。 具體地，本專利技術所述短肽在金屬鹽離子、細胞培養(yǎng)基等環(huán)境下，能進行自組裝形成 納米纖維。 另一具體應用實施例中，本專利技術所述自組裝短肽及其形成的納米纖維，能與金結 合在金電極表面上形成膜結構。所以，此自組裝短肽可成為修飾金電極的一種新材料。 本專利技術具有以下有益效果： 1、提供了一種新型自組裝短肽，增加自組裝短肽類型。 2、提供了一種新型的自組裝納米生物材料，這種新型生物材料能夠廣泛的應用到 納米生物傳感器工程、細胞工程及生物工程及等領域，并具有明顯的經濟及其社會效益。 3、提供了一種修飾金電極的納米支架材料，可廣泛應用于生物傳感器領域。【附圖說明】 圖1是本專利技術所述L型氨基酸構成的自組裝短肽GFS-15的分子結構示意圖。 圖2是本專利技術所述自組裝短肽GFS-15高效液相（HPLC)色譜圖。 圖3是本專利技術所述自組裝短肽GFS-15質譜（MS)圖。 圖4是本專利技術所述自組裝短肽GFS-15的圓二色譜圖，新型短肽GFS-15常溫下的 二級結構特征是在216nm處有一強負峰，在195nm處有一強正峰，峰形完好。 圖5是本專利技術所述自組裝短肽GFS-15的原子力顯微圖（AFM)，圖中：A表示Oh時 短肽GFS-15自組裝形成細而短的納米纖維絲；B表示24h后納米纖維的長度增加，數量增 多并交織在一起，形成三維的納米纖維網絡支架。 圖6是本專利技術所述組裝短肽GFS-15與納米金混合24h形成納米纖維絲并與納米 金包裹鏈接在的透射電鏡掃描圖（TEM)，其中A圖的放大倍數X (4000)倍圖。B圖的放大 倍數 X (8000)。 圖7是本專利技術所述自組裝短肽組裝不同時間修飾金電極表面的循環(huán)伏安曲線，把 打磨好干凈的金電極放入5000uM的短肽溶液中分別浸泡不同時間后，用電化學工作站測 其循環(huán)伏安，發(fā)現隨著時間的增加，氧化還原峰值也逐漸增加，說明該短肽在金電極表面上 形成的納米纖維結構可能成為了一種催化劑促進了電子的轉移。 圖8是本專利技術所述自組裝短肽GFS-15不同濃度下組裝修飾金電極的循環(huán)伏安曲 線。把處理好的金電極分別浸入到由去離子水配制成的不同濃度的短肽溶液在（I-IOOuM)， 自組裝48后，測其循環(huán)伏安曲線。發(fā)現隨著濃度的增加，氧化還原峰值逐漸減小，證明該短 肽在金電極表面上形成了一層膜，阻止了電子的轉移。 圖9是本專利技術所述自組裝短肽GFS-15溶液添加不同離子組裝修飾金電極的循環(huán) 伏安曲線。把處理好的金電極分別浸入到由生理鹽水和PBS溶液配制成的1000 uM的短肽 溶液中，自組裝48后，測其循環(huán)伏安曲線。發(fā)現添加的兩中溶液都可使，氧化還原峰值逐漸 減小，證明該短肽在金電極表面上形成了一層膜，阻止了電子的轉移，并且添加生理鹽水的 效果更好。【具體實施方式】 實施例1 :由L-氨基酸構成的自組裝短肽GFS-15的制備 1、材料 Fmoc-D-Tyr-OH (9_ 荷甲氧幾酰基-D-酪氨酸）、Fmoc-D-Val-OH (9_ 荷甲氧 羰酰基-D-纈氨酸）、Fmoc-D-Asp (OtBu) -OH (芴甲氧羰酰基D-天冬氨酸-ε -叔丁氧 羰酰基）、Fmoc-D-Lys 〇oc) -OH (9-荷甲氧羰酰基-D-賴氨酸-ε -叔丁氧羰酰基）、 Fmoc-D-Pro-OH (9-荷甲氧羰酰基-D-脯氨酸）、Fmoc-D-Arg (pbf) -OH (9-荷甲氧羰酰 基-D-精氨酸-γ -叔丁氧羰酰基）、Fmoc-D-Cys-OH(9-芴甲氧羰酰基-D-半胱氨酸）、 Fmoc-L-Ala (Boc)-OH(9-芴甲氧羰酰基-L-丙氨酸）、HBTU (0-苯并三唑-1-基-Ν、Ν、Ν、 N-四甲基尿六氟磷酸脂）和HOBT (1-羥基苯并三氮唑）；哌啶，乙酸酐，溶劑：DMF(N、N-二 甲基甲酰胺）、TFA(三氟乙酸）、DCM(二氯甲烷）、NMM(N-甲基嗎啉）。 2、制備方法 采用Fmoc (荷甲氧羰基）保護的固相合成法，工藝步驟如下： (1)稱取 0· 5mmol/g 樹脂（Rink amide resin) 20g 于肽合成器中，用 200mlDCM 浸 泡樹脂30分鐘后，再用400mlDMF分三次清洗樹脂，每次清洗時間為3min，抽濾干洗滌液。 經過10-20分鐘用100mL 20 %哌啶/DMF震蕩反應30分，反應結束后，抽濾干洗滌液，用 400mlDMF清洗樹脂5次，每次清洗3min，洗完后取少許樹脂做茚三酮檢查，樹脂呈陽性，然 后向反應器中加入原料： Fomc-L-Ala(Boc)-OH 4. 455g IIOBT 15. 16g IIOBT 8. 91 g NMM 7.26ral DMF 264ml 加入后震蕩反應30分鐘，用400mlDMF清洗5次，每次清洗3min，取少許樹脂做茚 三酮檢查，樹脂呈陰性。 上述原料加完后，反應40min，抽濾，用30mlDMF洗滌樹脂4次，每次3分鐘，取少 許樹脂做茚三酮檢查，樹脂呈陰性。 (2)向合成器皿中加入5ml 20 %哌啶/DMF震蕩反應30分鐘，反應結束后，抽濾出 反應液，再用40mlDMF分4次洗滌樹脂，然后在取少許樹脂做茚三酮檢查，樹脂呈陽性，向反 應器皿中加入以下原料： (a) Fomc-L-Ala-OH 4. 455g (b) HOBT 25. Olg (c) NMM 7.26 (d) DMF 264ml 上述原料加完后，震蕩反應40分鐘，反應結束后，用30mlDMF分4次洗滌，每次3 分鐘，取少許樹脂做茚三酮檢查，樹脂呈陰性。 變換步驟⑵中（a)原料，（b) (C) (當前第1頁1 2 本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種自組裝短肽，其特征在于：其氨基酸序列為：SEQ?ID?NO.1。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：徐曉帆，陳振銀，李潤土，李萌萌，張慧楠，羅忠禮，
申請(專利權)人：重慶醫(yī)科大學，
類型：發(fā)明
國別省市：重慶;85
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