本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種疫苗制劑及其制備方法和用途，所述疫苗制劑包含疫苗載體和抗原組分，其中所述疫苗載體為由微生物經(jīng)水熱轉(zhuǎn)化獲得的疫苗載體。本發(fā)明專利技術(shù)所述疫苗制劑是將微生物經(jīng)水熱轉(zhuǎn)化獲得的疫苗載體與抗原組分復(fù)配獲得所述疫苗制劑。本發(fā)明專利技術(shù)通過(guò)水熱反應(yīng)制備的疫苗載體材料，其孔性、親疏水性和表面免疫相關(guān)配體密度等性質(zhì)得到優(yōu)化，從而使得其與抗原組分復(fù)配時(shí)，抗原裝載效率提高，使得疫苗制劑具有強(qiáng)烈的免疫激活效果，高效地增強(qiáng)負(fù)載抗原的免疫原性，通過(guò)機(jī)體對(duì)抗原形成的特異性免疫應(yīng)答，實(shí)現(xiàn)針對(duì)特定疾病的免疫治療及預(yù)防。此外，本發(fā)明專利技術(shù)疫苗制劑的原料來(lái)源廣泛，在疫苗構(gòu)建上具有普適性，可以構(gòu)建針對(duì)不同疾病的多種疫苗制劑。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于疫苗制劑領(lǐng)域，具體涉及一種疫苗制劑及其制備方法和用途。
技術(shù)介紹
在疫苗的發(fā)展歷史當(dāng)中，最初出現(xiàn)的疫苗利用減毒或者滅活的病原生物如細(xì)菌、病毒、立克次氏體等制成。通過(guò)這種方式獲得的疫苗制劑在臨床應(yīng)用中存在著潛在的生物安全性問(wèn)題，如引起嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)和致病性病毒感染等?，F(xiàn)代疫苗制劑則通常用提純或重組的亞單位抗原來(lái)取代完整的病原生物，由于杜絕了病原體致病性復(fù)發(fā)的可能，大大提高了疫苗使用的生物安全性。然而相比于完整的病原微生物，蛋白或者多肽形式的亞單位抗原易遭受降解，同時(shí)難以被抗原提呈細(xì)胞(Antigen presentating cel I, APC)攝取。更為重要的是由于缺乏病原相關(guān)分子模式(Pathogen-associated molecular pattern，PAMP)，其接種后缺少“危險(xiǎn)信號(hào)”，因此不能有效地激活A(yù)PC。這些問(wèn)題使得單獨(dú)使用亞單位抗原時(shí)難以獲得較強(qiáng)的免疫原性，最終導(dǎo)致了免疫應(yīng)答效果的不盡理想。對(duì)于獲得性免疫機(jī)理的研宄表明，雖然機(jī)體依靠對(duì)病原體上抗原部分的特異性識(shí)別和記憶獲得免疫，但病原體中除抗體以外的其它特征成分在免疫形成中也起到了很大作用。在與病原體的相互作用過(guò)程中，病原體獨(dú)特的形貌、表面生物學(xué)性質(zhì)和向外分泌的各種生物學(xué)信號(hào)等，能夠促使免疫相關(guān)細(xì)胞趨近、識(shí)別和吞噬包括抗原成分在內(nèi)的病原體組分；同時(shí)病原體成分中的PAMP在與免疫相關(guān)細(xì)胞接觸或攝取后，能夠有效地激活這些機(jī)體細(xì)胞，誘導(dǎo)高水平的免疫應(yīng)答的發(fā)生。正是由于病原體具有這樣一系列的重要特征，機(jī)體免疫系統(tǒng)才能夠有效地對(duì)其進(jìn)行識(shí)別和應(yīng)答。受此啟示，一些研宄人員開(kāi)始嘗試開(kāi)發(fā)具有仿病原體特征的疫苗制劑并獲得了一些初步的成功。以目前最為成功的病毒小體(Virosome)為例，其因?qū)Σ《娟P(guān)鍵生理結(jié)構(gòu)和形態(tài)的模仿而得名。Virosome是通過(guò)將病毒表面的功能性蛋白嵌入脂質(zhì)體的雙分子層而制得的一類(lèi)特殊脂質(zhì)體。包括流感病毒、水皰性口炎病毒和新城疫病毒等病毒的包膜蛋白都已經(jīng)被成功用于Virosome的制備。利用其脂質(zhì)層中嵌入的功能性病毒蛋白，Virosome具有如病毒一樣的膜融合能力，因此能夠模擬病毒感染動(dòng)物機(jī)體的過(guò)程。更為重要的是，由于只使用少量低毒性病毒蛋白而不涉及其遺傳性物質(zhì)，Virosome在獲得同病毒相似的細(xì)胞入侵能力的同時(shí)避免了在活體疫苗使用過(guò)程中的生物安全性問(wèn)題。迄今，已有兩種基于Virosome的人用疫苗在29個(gè)國(guó)家上市銷(xiāo)售。目前Virosome應(yīng)用的主要限制在于抗原裝載上有較大的局限性，對(duì)抗原的分子尺寸、親疏水性都有比較嚴(yán)格的要求，裝載效率也有待提尚O盡管以Virosome為代表的仿生疫苗制劑現(xiàn)在仍處于發(fā)展初期，還存在著各種各樣的不足，但是其已經(jīng)取得的成功顯示出了通過(guò)模仿病原體所構(gòu)建的疫苗制劑的潛在優(yōu)勢(shì)和巨大發(fā)展空間。因此，如果能夠開(kāi)發(fā)出一種在APC攝取、抗原提呈和免疫激活等各個(gè)環(huán)節(jié)都具有與病原體相似能力的疫苗制劑，將有望為許多重大疾病的預(yù)防和治療提供有效的解決方案。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本專利技術(shù)的目的在于提供一種疫苗制劑及其制備方法和用途。為達(dá)到此專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)采用以下技術(shù)方案:一方面，本專利技術(shù)提供了一種疫苗制劑，所述疫苗制劑包含疫苗載體和抗原組分，其中所述疫苗載體為由微生物經(jīng)水熱轉(zhuǎn)化獲得的疫苗載體。本專利技術(shù)應(yīng)用簡(jiǎn)單且易于工業(yè)放大的水熱合成法，通過(guò)在密閉空間中對(duì)水溶液進(jìn)行加熱，使反應(yīng)環(huán)境達(dá)到亞臨界或超臨界狀態(tài)，在此情況下，反應(yīng)處于分子水平，反應(yīng)效率極高，從而將微生物模板原料轉(zhuǎn)化為疫苗載體。通過(guò)水熱反應(yīng)控制所得疫苗載體材料的孔性、親疏水性和表面免疫相關(guān)配體密度等性質(zhì)，由此可以對(duì)后續(xù)抗原成分的裝載進(jìn)行有效調(diào)控。相比于同樣使用病原體微生物為原料的減毒和滅活疫苗，本專利技術(shù)不僅能夠完全保證疫苗使用的安全性，同時(shí)通過(guò)水熱過(guò)程對(duì)微生物表面生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行調(diào)控，還能夠進(jìn)一步提升相關(guān)的免疫激活能力。優(yōu)選地，所述微生物為病原性或非病原性微生物。優(yōu)選地，所述微生物為細(xì)菌、真菌或病毒中的任意一種。優(yōu)選地，所述微生物在種屬上為但不限于干酪乳桿菌、雙歧桿菌、分枝桿菌、葡萄球菌、乳酸球菌、副溶血性弧菌、酵母菌或腺病毒中的任意一種。在本專利技術(shù)所述疫苗制劑中，所述疫苗載體保留微生物模板的外形特征，能夠促進(jìn)抗原提呈細(xì)胞對(duì)于疫苗載體及所負(fù)載抗原等的快速識(shí)別和攝取。優(yōu)選地，所述疫苗載體表面保留微生物模板的免疫相關(guān)的表面配體。優(yōu)選地，所述表面配體包括但不限于膜多糖、甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺、海藻糖或脂蛋白中的任意一種或至少兩種。疫苗載體的這種表面特征能夠促進(jìn)免疫細(xì)胞活化和調(diào)控抗原在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)和提呈途徑，由此高效增強(qiáng)疫苗應(yīng)用后的免疫應(yīng)答水平。在本專利技術(shù)所述疫苗制劑中，所述抗原組分為抗原蛋白、表位肽、抗原編碼質(zhì)粒DNA或mRNA中的任意一種或至少兩種的組合。例如，應(yīng)用所述疫苗制劑對(duì)特定惡性腫瘤進(jìn)行免疫預(yù)防或者治療時(shí)，該疫苗制劑中所包含的抗原組分可以是該腫瘤的一種或多種相關(guān)或者特異性抗原，也可以是攜帶這些抗原編碼信息的質(zhì)粒DNA或mRNA ;應(yīng)用所述疫苗制劑對(duì)感染類(lèi)疾病進(jìn)行免疫預(yù)防或者治療時(shí)，該疫苗制劑中所包含的抗原可以是相應(yīng)病原微生物的一種或多種特異性抗原蛋白，同樣也可以是攜帶這些抗原編碼信息的質(zhì)粒DNA或mRNA。另一方面，本專利技術(shù)提供了所述疫苗制劑的制備方法，所述方法是將微生物經(jīng)水熱轉(zhuǎn)化獲得的疫苗載體與抗原組分復(fù)配，獲得所述疫苗制劑。本專利技術(shù)所述疫苗制劑的制備方法包括以下步驟:(a)微生物懸浮液經(jīng)水熱反應(yīng)，洗滌，干燥得到疫苗載體；(b)將步驟(a)得到的疫苗載體與抗原組分復(fù)配，獲得所述疫苗制劑。在本專利技術(shù)的疫苗制劑的制備方法中，步驟(a)所述水熱反應(yīng)所使用的溶媒為鹽酸、硫酸、硝酸、醋酸、氯化鈉、氯化鉀、醋酸鉀、乙醇、乙醛或戊二醛中任意一種或至少兩種的水溶液。優(yōu)選地，所述水溶液的濃度為0.001?1.000mol/L,例如0.001mol/L、0.002mol/L、0.004mol/L、0.008mol/L、0.010mol/L、0.015mol/L、0.018mol/L、0.020mol/L、0.024mol/L、mol/L、0.028mol/L、0.030mol/L、0.040mol/L、0.060mol/L、0.080mol/L、0.100mol/L、0.150mol/L、0.200mol/L、0.250mol/L、0.300mol/L、0.350mol/L、0.40mol/L、0.450mol/L、0.500mol/L、0.550mol/L、0.600mol/L、0.700mol/L、0.800mol/L、0.900mol/L 或 1.0OOmol/L0優(yōu)選地，步驟(a)所述微生物懸浮液為將微生物投入所述溶媒中制成的懸浮液。在本專利技術(shù)的疫苗制劑的制備方法中，步驟(a)所述水熱反應(yīng)的步驟是將步驟(a)得到的懸浮液轉(zhuǎn)移到水熱反應(yīng)釜中，并將水熱反應(yīng)釜置于恒溫箱，恒溫加熱。優(yōu)選地，步驟(a)所述水熱反應(yīng)溫度為100?400°C，例如100°C、110°C、120°C、140 °C> 160 °C> 180 °C> 200 °C、220 °C、240 °C、260 °C、280 °C> 300 °C、320 °C、34本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種疫苗制劑，其特征在于，所述疫苗制劑包含疫苗載體和抗原組分，其中所述疫苗載體為由微生物經(jīng)水熱轉(zhuǎn)化獲得的疫苗載體。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：馬光輝，魏煒，倪德志，岳華，周煒清，呂丕平，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：北京;11
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