犬細管冷凍精液（以下簡稱凍精）是指將采集到的犬的新鮮精液，經過質量檢驗，稀釋等處理后，把精液封裝在微型（0.25ml)塑料細管內，利用液氮為冷源，按特定的程序和冷凍速度進行冷凍，使精液以凍結的形式保存于超低溫環境下，達到長期保存犬精液的目的。犬細管凍精的制作和使用，有利于提高優秀種公犬的利用率和異地基因交流，降低運輸成本和防止疾病的傳播以及種犬遺傳物質的保存。
【技術實現步驟摘要】
【專利說明】
:本專利技術涉及犬的細管冷凍精液制作方法。
技術介紹
:犬人工授精，技術是一種代替犬自然交配的繁殖技術，是在人工輔助下，采集種犬精液、經過品質檢測和稀釋保存等處理，再將精液輸送到母犬生殖道內，使母犬受孕的配種技術。精液冷凍，技術是指將采集到的新鮮精液，經過特殊處理后，利用液氮(一 196°C)、干冰(一79°C)或其他冷源，以凍結形式長期保存精液的技術。目前在世界許多發達國家，犬的Al與精液冷凍研究已經得到廣泛開展，并運用于實際生產中，而在國內也有人進行過研究；影響犬凍精人工授精成敗的因素眾多，本文主要從精液采集、評估、稀釋、保存(包括冷藏保存、冷凍保存，以及解凍)和輸精等方面對國內外犬的Al與精液冷凍研究進行綜述。
技術實現思路
:犬是人類最早馴養的動物之一，與人類生活密切相關，很早就被作為人類的寵物飼養，通過良好的訓練，能為人類提供良好的服務，替人類完成無法完成的任務或輔助人類更好地完成工作任務，尤其在軍警、導盲、生命探測、輔助邊防檢查和搜救等特殊需要的領域中，其應用價值巨大。犬細管冷凍精液(以下簡稱凍精)是指將采集到的犬的新鮮精液，經過質量檢驗，稀釋等處理后，把精液封裝在微型(0.25ml)塑料細管內，利用液氮為冷源，按特定的程序和冷凍速度進行冷凍，使精液以凍結的形式保存于超低溫環境下，達到長期保存犬精液的目的。犬細管凍精的制作和使用，有利于提高優秀種公犬的利用率和異地基因交流，降低運輸成本和防止疾病的傳播以及種犬遺傳物質的保存。【具體實施方式】:1.犬細管凍精制作設備:相差顯微鏡，分光光度計，普通離心機，MRS-3自動分裝機，廣口液氮生物容器，液氮，微型塑料細管，拇指管，電冰箱，低溫操作柜，細管冷凍架，玻片，量筒，量杯，刻度集精試管，恒溫水浴鍋，移液器和稀釋液等。2.種公犬的選擇和采精，用于制作細管凍精的公犬必須譜系清楚，血統純正，品種特征明顯，工作表現突出，易于訓練、馴服，服從口令，忠于訓導者。符合采精要求的公犬用手淫法采精，采精時一人保定好公犬，防止攻擊采精員，采精員用廣3%。的高錳酸鉀溶液清洗消毒公犬外陰后，一手握住公犬陰莖根部并反復按摩球狀膨大部，一手持集精試管，待公犬陰莖勃起開始排除第一部分精液時，準備及時用集精試管收集第二部分富含精子的精液，第三部分精液隨后排出，該部分精液和第一部分精液均不收集(含精子數量極少)，只收即第二部分精液用于制作細管凍精。3.稀釋液的配制:準確稱取所需試劑后混合、溶解、過濾和消毒待用。4.犬精液的處理:對所采集的精液記錄犬號或名字，用離心試管測量采精量，用血球計數板或分光光度計測定精子密度，用相差顯微鏡測定原精活力。5.犬精液的稀釋和分裝:精子密度2億/ml以上，原精活力60%以上的犬精液用預先配制的冷凍稀釋液稀釋，使每劑量有效精子數達到1200?1500萬個即可；稀釋后的犬精液用MRS-3自動分裝機在實驗室室溫下分裝在微型塑料細管內，封口和印字。6.犬精液的平衡:分裝、封口和印字的犬細管精液放置于+4°C的溫度下平衡4小時。7.犬精液的冷凍和解凍:平衡后的犬細管精液在+4°C左右溫度下整齊放在細管冷凍架上，然后把細管冷凍架和精液放入-110?-130的液氮蒸汽中冷凍10?15分鐘，冷凍后的犬細管凍精浸入液氮保存；隨機抽取I?2支犬細管凍精立即放入40±2°C的水浴中解凍10秒左右，檢查解凍活力，解凍活力可達35%以上，頂體完整率40%左右，解凍活力35%以上的犬細管凍精包裝于液氮中長期保存。【主權項】1.犬細管凍精制作設備，其特征是相差顯微鏡，分光光度計，普通離心機，MRS-3自動分裝機，廣口液氮生物容器，液氮，微型塑料細管，拇指管，電冰箱，低溫操作柜，細管冷凍架，玻片，量筒，量杯，刻度集精試管，恒溫水浴鍋，移液器和稀釋液等。2.種公犬的選擇和采精，其特征是用于制作細管凍精的公犬必須譜系清楚，血統純正，品種特征明顯，工作表現突出，易于訓練、馴服，服從口令，忠于訓導者，符合采精要求的公犬用手淫法采精，采精時一人保定好公犬，防止攻擊采精員，采精員用f 3%。的高錳酸鉀溶液清洗消毒公犬外陰后，一手握住公犬陰莖根部并反復按摩球狀膨大部，一手持集精試管，待公犬陰莖勃起開始排除第一部分精液時，準備及時用集精試管收集第二部分富含精子的精液，第三部分精液隨后排出，該部分精液和第一部分精液均不收集(含精子數量極少)，只收即第二部分精液用于制作細管凍精。3.稀釋液的配制，其特征是準確稱取所需試劑后混合、溶解、過濾和消毒待用。4.犬精液的處理，其特征是對所采集的精液記錄犬號或名字，用離心試管測量采精量，用血球計數板或分光光度計測定精子密度，用相差顯微鏡測定原精活力。5.犬精液的稀釋和分裝，其特征是精子密度2億/ml以上，原精活力60%以上的犬精液用預先配制的冷凍稀釋液稀釋，使每劑量有效精子數達到1200?1500萬個即可，稀釋后的犬精液用MRS-3自動分裝機在實驗室室溫下分裝在微型塑料細管內，封口和印字。6.犬精液的平衡，其特征是分裝、封口和印字的犬細管精液放置于+4°C的溫度下平衡4小時。7.犬精液的冷凍和解凍，其特征是平衡后的犬細管精液在+4°C左右溫度下整齊放在細管冷凍架上，然后把細管冷凍架和精液放入-110?-130的液氮蒸汽中冷凍10?15分鐘，冷凍后的犬細管凍精浸入液氮保存，隨機抽取I?2支犬細管凍精立即放入40±2°C的水浴中解凍10秒左右，檢查解凍活力，解凍活力可達35%以上，頂體完整率40%左右，解凍活力35%以上的犬細管凍精包裝于液氮中長期保存。【專利摘要】犬細管冷凍精液（以下簡稱凍精）是指將采集到的犬的新鮮精液，經過質量檢驗，稀釋等處理后，把精液封裝在微型（0.25ml)塑料細管內，利用液氮為冷源，按特定的程序和冷凍速度進行冷凍，使精液以凍結的形式保存于超低溫環境下，達到長期保存犬精液的目的。犬細管凍精的制作和使用，有利于提高優秀種公犬的利用率和異地基因交流，降低運輸成本和防止疾病的傳播以及種犬遺傳物質的保存。【IPC分類】A01N1-02【公開號】CN104542574【申請號】CN201310497857【專利技術人】趙家才, 毛翔光, 李雯, 杜曉鵬, 曹景峰, 劉紹貴, 雷衡, 李春平 【申請人】云南省種畜繁育推廣中心, 云南恒翔家畜良種科技有限公司【公開日】2015年4月29日【申請日】2013年10月22日本文檔來自技高網...
【技術保護點】
犬細管凍精制作設備，其特征是相差顯微鏡，分光光度計，普通離心機，MRS?3自動分裝機，廣口液氮生物容器，液氮，微型塑料細管，拇指管，電冰箱，低溫操作柜，細管冷凍架，玻片，量筒，量杯，刻度集精試管，恒溫水浴鍋，移液器和稀釋液等。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：趙家才，毛翔光，李雯，杜曉鵬，曹景峰，劉紹貴，雷衡，李春平，
申請(專利權)人：云南省種畜繁育推廣中心，云南恒翔家畜良種科技有限公司，
類型：發明
國別省市：云南;53
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