本發明專利技術提供血液待測體的處理方法，所述方法能夠在抑制過濾器的過濾面積的同時提高容易變形地漏過的稀少細胞或小的稀少細胞的回收率，并且能夠活著回收所述細胞。在一種方式中，涉及分離或檢測血液待測體中的稀少細胞的方法，所述方法包括：使用過濾器，對相對于所述過濾器的孔、6μl/孔以下的容量的血液待測體進行過濾處理，從而分離或檢測稀少細胞，其中，所述過濾器以200個/mm2～40000個/mm2的孔密度含有短軸直徑為3.0μm以上15μm以下且長軸直徑為所述短軸直徑的1.1倍～3倍的橢圓形或含有該橢圓且在夾著該橢圓的長軸的至少2點與該橢圓相接的形狀的孔。
【技術實現步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術提供，所述方法能夠在抑制過濾器的過濾面積的同時提高容易變形地漏過的稀少細胞或小的稀少細胞的回收率，并且能夠活著回收所述細胞。在一種方式中，涉及分離或檢測血液待測體中的稀少細胞的方法，所述方法包括：使用過濾器，對相對于所述過濾器的孔、6μl/孔以下的容量的血液待測體進行過濾處理，從而分離或檢測稀少細胞，其中，所述過濾器以200個/mm2～40000個/mm2的孔密度含有短軸直徑為3.0μm以上15μm以下且長軸直徑為所述短軸直徑的1.1倍～3倍的橢圓形或含有該橢圓且在夾著該橢圓的長軸的至少2點與該橢圓相接的形狀的孔。【專利說明】
本公開涉及，分離血液待測體中的稀少細胞的方法，血中 循環腫瘤細胞的數量測定或分析方法，以及其中使用的過濾器和稀少細胞捕獲裝置。
技術介紹
雖然血液的細胞成分主要是紅血球、白血球、血小板，但是在血液中有時存在除此 以外的細胞。作為其一例，可以舉出血中循環腫瘤細胞/CTC(CirculatingTumorCell)。 認為癌的轉移由癌細胞通過血管或淋巴管被運送到體內的其它部位并增殖引起。并且，報 告了血液中的CTC數與癌的轉移的可能性和預后有關，已知為了作為癌（特別是乳癌等轉 移性的癌）的診斷、預后診斷和治療效果的預測或判定的指標，而測定血液中的CTC數的 計數、CTC的核酸，關于其分離、濃縮提出、研究了各種手法（非專利文獻1?16、專利文獻 1?4等）。 在先技術文獻 專利文獻 專利文獻1 :日本專利第5086241號 專利文獻2 :日本專利文獻特開2011-163830號公報 專利文獻3 :日本專利文獻特開2013-17429號公報 專利文獻4 :日本專利文獻特表2010-530234號公報 非專利文獻 非專利文獻1:EFRATDOTAN，STEVENJ.COHEN，KATHERINER.ALPAUGH，NEAL J.MER0P0L.EvolvingEvidenceandFutureChallenges.Theoncologist2009 ； 14 ； 1070-1082 非專利文獻2:MartinVM，SiewertC，ScharlA，HarmsT，HeinzeR，OhlS， RadbruchA,MiltenyiS，SchmitzJ.Immunomagneticenrichmentofdisseminated epithelialtumorcellsfromperipheralbloodbyMACS.ExpHematol. 1998Mar； 26(3) ：252-64. 非專利文獻3 :L.Yang，J.C.Lang，P.Balasubramanian，K.R.Jatana，D.Schuller， etal.OptimizationofanEnrichmentProcessforCirculatingTumorCellsFrom theBloodofHeadandNeckCancerPatientsThroughDepletionofNormalCells. BiotechnolBioeng； 102 (2) ：521-534 (2009) 非專利文獻4:RalfGertler，RobertRosenberg，KatrinFuehrer，Michael Dahm，HjalmarNekarda，JoergRuedigerSiewertDetectionofCirculatingTumor CellsinBloodUsinganOptimizedDensityGradientCentrifugationRecent ResultsinCancerResearchVolume162,2003,pp149-155 非專利文獻5 :M.K.Baker，K.Mikhitarian，W.Osta，etal.Moleculardetection ofbreastcancercellsintheperipheralbloodofadvanced-stagebreastcancer patientsusingmultimarkerreal-timereversetranscription-polymerasechain reactionandanovelporousbarrierdensitygradientcentrifugationtechnology. ClinCancerRes;9 :4865-4871 (2003) 非專利文獻6:RostagnoP，MollJL，BisconteJC，CaldaniC.Detectionofrare circulatingbreastcancercellsbyfiltrationcytometryandidentificationbyDNA content：sensitivityinanexperimentalmodel.AnticancerRes. 1997,17,2481-2485 非專利文獻 7 :G.Vona，A.Sabile，M.Louha，etal.Isolationbysizeof epithelialtumorcells：anewmethodfortheimmunomorphologicalandmolecular characterizationofcirculatingtumorcells.AmJPathol;156 :57_63 (2000) 非專利文獻 8 :F.Farace，C.Massard，N.Vimond，F.Drusch，etal.Adirect comparisonofCellSearchandISETforcirculatingtumour-celldetectionin patientswithmetastaticcarcinomas.BrJCancer; 105 (6) ：847-853 (2011) 非專利文獻 9 :S.Zheng，H.Lin，J.Q.Liu，etal.Membranemicrofilterdevice forselectivecapture,electrolysisandgenomicanalysisofhumancirculating tumorcells.JChromatogrA；1162 ：154-61 (2007) 非專利文獻 10 :H.K.Lin，S.Zheng，A.J.Williams，etal.Portablefilter-based microdevicefordetectionandcharacterizationofcirculatingtumorcells.Clin CancerRes;16(20) :5011-5018(2010) 非專利文獻 11:HosokawaM，HayataT，FukudaY，ArakakiAi，etal.Anal. Chem. ，2010,82(15)，pp6629-6635Size_SelectiveMicrocavityArrayforRapidand EfficientDetectionofCirculatingTumorC本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種血液待測體中的稀少細胞的分離或檢測方法，包括：使用過濾器，以相對于所述過濾器的孔的過濾器處理容量換算成血液為6μl/孔以下的容量的方式來對血液待測體進行過濾器處理，從而分離或檢測稀少細胞，其中，所述過濾器以200個/mm2～40000個/mm2的孔密度含有短軸直徑為3.0μm以上15μm以下且長軸直徑為所述短軸直徑的1.1倍～3倍的橢圓形或含有該橢圓且在含有該橢圓的長軸的兩端的至少2點與該橢圓相接的形狀的孔。
【技術特征摘要】
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【專利技術屬性】
技術研發人員：高木英紀，
申請(專利權)人：愛科來株式會社，
類型：發明
國別省市：日本;JP
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