【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于醫藥
，具體涉及一種微生物發酵制備青霉素?；傅姆椒?。
技術介紹
青霉素酰化酶（penicillin acylase，簡稱PA)又稱為青霉素酰基轉移酶，是 β_內酰胺類抗生素工業生產中較為關鍵的酶，用量很大。 青霉素?；讣仁前麅让赣质前饷?，可以通過產酶微生物的營養控制代謝及基 因型改變，進行大規模的生產。青霉素?；钢饕獜拇竽c埃希菌胞內酶和巨大芽孢桿菌胞 外酶獲得，報道最多的是關于埃希氏菌屬大腸桿菌發酵生產青霉素 G酰化酶。近年來的研 究傾向于3個方面：利用物理或化學誘變方法、基因工程方法對產青霉素?；傅木赀M 行改造，突變菌種的分離以及酶在不同的產酶宿主細胞中的克隆和表達。如利用紫外光誘 變巨大芽孢桿菌可以獲得酶產量增加4倍的突變菌株，利用重組DNA技術將編碼青霉素酰 化酶的基因導入宿主細胞中，構建了高產分泌型工程菌，但酶的應用性能還有待提升。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供，該方法制備得到的青霉素酰 化酶的活性在40000U/L以上。 為了實現本專利技術所述目的，專利技術人提供了以下技術方案。 -種青霉素?；傅闹苽浞椒?/a>，包括以下步驟： a.取大腸桿菌，在35-40°C條件下制備一級種子和二級種子，所用種子培養基含 有蛋白胨，酵母浸膏，NaCl ; b.將步驟a制備的二級種子接種至發酵培養基中，在35_40°C培養15_30h，得到發 酵液，所述發酵培養基含有甘油，酵母粉，蛋白胨，NaCl，微量元素水溶液； c.將步驟b制備的發酵液進行離心，棄去上清液，...
【技術保護點】
一種青霉素?；傅闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟冢ㄒ韵虏襟E：a.取大腸桿菌，在35?40℃條件下制備一級種子和二級種子，所用種子培養基含有蛋白胨，酵母浸膏，NaCl；b.將步驟a制備的二級種子接種至發酵培養基中，在35?40℃培養15?30h，得到發酵液，所述發酵培養基含有甘油，酵母粉，蛋白胨，NaCl，微量元素水溶液；c.將步驟b制備的發酵液進行離心，棄去上清液，收集下層的菌體濃縮液，即得到青霉素酰化酶的粗品溶液；d.將步驟c所得青霉素?；傅拇制啡芤哼M行均質，絮凝，超濾濃縮，沉淀除去雜蛋白，最后進行透析濃縮，即得到青霉素?；讣兤贰?
【技術特征摘要】
1. 一種青霉素?；傅闹苽浞椒?，其特征在于，包括以下步驟： a. 取大腸桿菌，在35-40°C條件下制備一級種子和二級種子，所用種子培養基含有蛋 白胨，酵母浸膏，NaCl ; b. 將步驟a制備的二級種子接種至發酵培養基中，在35-40°C培養15-30h，得到發酵 液，所述發酵培養基含有甘油，酵母粉，蛋白胨，NaCl，微量元素水溶液； c. 將步驟b制備的發酵液進行離心，棄去上清液，收集下層的菌體濃縮液，即得到青霉 素?；傅拇制啡芤?； d. 將步驟c所得青霉素酰化酶的粗品溶液進行均質，絮凝，超濾濃縮，沉淀除去雜蛋 白，最后進行透析濃縮，即得到青霉素?；讣兤?。2. 根據權利要求1所述的一種青霉素?；傅闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?，所述步驟a中， 在37-38°C條件下制備一級種子和二級種子。3. 根據權利要求1所述的一種青霉素?；傅闹苽浞椒?，其特征在于，所述步驟a中， 種子培養基含蛋白胨5-10重量份，酵母浸膏2-5重量份，NaC15-10重量份，去離子水1000 重量份。4. 根據權利要求1所述的一種青霉素?；傅闹苽浞椒?，其特征在于，所述步驟b中， 二級種...
【專利技術屬性】
技術研發人員：李紅飛，劉健，陳英新，徐永龍，梅玉龍，郝金恒，李銀，袁國強，
申請(專利權)人：石藥集團中諾藥業石家莊有限公司，
類型：發明
國別省市：河北;13
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