本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種離子色譜在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦，先將一定體積的待測樣品與水以一定比例混合，超聲萃取，使其中的草甘膦溶于水中，后進(jìn)樣用高效液相色譜反相柱在線除去水溶性有機(jī)物基質(zhì)，無保留作用的離子被緊隨其后的富集柱保留，柱切換后經(jīng)淋洗液洗脫的離子在陰離子色譜柱中得到分離，并由抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測。本發(fā)明專利技術(shù)對在線前處理系統(tǒng)的應(yīng)用，去除轉(zhuǎn)基因大豆油樣品中的水溶性有機(jī)物，大豆油中草甘膦農(nóng)藥含量的測定具有廣泛深遠(yuǎn)的意義，本方法改變現(xiàn)有前處理除有機(jī)物使用一次性C18柱的狀態(tài)，減少了人力消耗，節(jié)省了樣品前處理的時間和繁復(fù)的操作過程。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
離子色譜在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦
本專利技術(shù)涉及一種離子色譜柱切換系統(tǒng)，具體地說，是一種利用離子色譜柱切換法在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦的新方法。
技術(shù)介紹
轉(zhuǎn)基因食品是將某些生物基因利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)轉(zhuǎn)移到其他物種中或以轉(zhuǎn)基因生物為原料加工而成的食品。為了滿足人們不同的需要，轉(zhuǎn)基因技術(shù)使目標(biāo)物種在營養(yǎng)品質(zhì)、形狀等方面進(jìn)行轉(zhuǎn)變，通過改造生物的遺傳物質(zhì)而改良了生物產(chǎn)品的消費(fèi)品質(zhì)。關(guān)于轉(zhuǎn)基因食品的優(yōu)越性及其可能存在的安全隱患和副作用，近年來得到了廣泛的關(guān)注，引發(fā)了許多思考。抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆是所有轉(zhuǎn)基因植物中種植面積最大，產(chǎn)量最多的一種作物，中國作為全球最大的大豆進(jìn)口國和消費(fèi)國，目前食用的絕大多數(shù)為抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆[I]。轉(zhuǎn)基因大豆本身是否存在營養(yǎng)價值的降低及更嚴(yán)重的致畸、致癌、致突變性留待時間的檢驗。我們可以預(yù)見到抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆對人體健康的影響，除了來源于轉(zhuǎn)入的基因，也會來源于種植過程中普遍施用的除草劑--草甘膦。草甘膦是一種非選擇性、無殘留滅生性除草劑，能有效去除多年生根雜草，是世界上應(yīng)用最為廣泛的除草劑[2]。此前有不少研究表明，極低濃度的草甘膦即可促進(jìn)癌細(xì)胞生長，具有較強(qiáng)的 致癌作用。豆油為大豆最主要的一種消費(fèi)形式，與我們的生活息息相關(guān)，因此測定抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦農(nóng)藥的殘留問題成為人們非常關(guān)切的一個問題。離子色譜作為一種測定水溶液中的陰陽離子最常用的技術(shù)[3-4]，在應(yīng)用過程中因大豆油中大量存在的有機(jī)物而產(chǎn)生瓶頸，本方法利用NGl反相色譜柱在線去除豆油中的有機(jī)物并與離子色譜聯(lián)用，測定其中的草甘膦農(nóng)藥，方法簡單，可操作性強(qiáng)，檢測限低。參考文獻(xiàn)I高效液相色譜法和離子色譜法測定轉(zhuǎn)基因大豆中草甘膦含量的研究，張碩，20122Handbook of Chemical Products-Agricultural Chemical, Chemical IndustryPress of China, 1996，p.3633H.Small, T.S.Stevens, W.S.Bauman, Novel 1n exchange chromatographicmethod using conductimetric detect1n, Anal.Chem.，47 (1975) 1801-18094P.E.Jackson, C.A.Pohlj Advances in stat1nary phase development insuppressed 1n chromatography, Trends Anal.Chem.，16 (1997) 393-400
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是在現(xiàn)有檢測方法基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)一步改進(jìn)，能夠在線去除樣品中的水溶性有機(jī)物基質(zhì)，同時利用陰離子交換色譜柱完成對草甘膦的分離，方法具有高度的集合性。所使用儀器設(shè)備簡單，靈敏度高，可廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全、衛(wèi)生防疫等各領(lǐng)域。本專利技術(shù)是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:一種離子色譜柱切換法在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦的方法，所述的系統(tǒng)包括進(jìn)樣器、六通閥、反相柱、十通閥、富集柱、陰離子分離柱、四源梯度泵、輸液泵、電導(dǎo)檢測器、廢液瓶，進(jìn)樣器和六通閥連接，六通閥分別與四源梯度泵和反相柱連接，十通閥上連接富集柱，十通閥分別與輸液泵，陰離子分離柱連接，所述的陰離子分離柱后依次連接抑制器、電導(dǎo)檢測器和廢液瓶。該離子色譜柱切換法在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦的方法，先將一定體積的待測樣品與水以一定比例混合，超聲萃取，使其中的草甘膦溶于水中，后進(jìn)樣用高效液相色譜反相柱在線除去水溶性有機(jī)物基質(zhì)，無保留作用的離子被緊隨其后的富集柱保留，柱切換后經(jīng)淋洗液洗脫的離子在陰離子色譜柱中得到分離，并由抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測。作為進(jìn)一步地改進(jìn)，本專利技術(shù)將高效液相色譜反相柱與陰離子交換柱串聯(lián)，利用反相柱對有機(jī)物的保留特性除去樣品中存在的水溶性有機(jī)物，后利用陰離子交換柱對不同離子的不同的保留能力，將待測離子分離洗脫，用抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測，實現(xiàn)了對樣品中有機(jī)物的在線去除，節(jié)省了樣品前處理的時間和繁復(fù)的操作過程。一種將所述的方法應(yīng)用于測定復(fù)雜機(jī)制體系中的草甘膦離子，用類似方案進(jìn)行分析可提高靈敏度和改善檢測限。本專利技術(shù)的有益效果如下:本專利技術(shù)對在線前處理系統(tǒng)的應(yīng)用，去除轉(zhuǎn)基因大豆油樣品中的水溶性有機(jī)物，大豆油中草甘膦農(nóng)藥含量的測定具有廣泛深遠(yuǎn)的意義，離子色譜作為一種測定溶液中離子的常用手段，卻因豆油中大量存在的有機(jī)物而卻步，本方法改變現(xiàn)有前處理除有機(jī)物使用一次性C18柱的狀態(tài)，減少了人力消耗，節(jié)省了樣品前處理的時間和繁復(fù)的操作過程，NGl的活化再生處理，較C18小柱一次性的使用特性也要更加的環(huán)保，另外國內(nèi)外尚無此類檢測方法。【附圖說明】圖1為本專利技術(shù)的離子色譜在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦的結(jié)構(gòu)和工作示意圖；圖1中，I一進(jìn)樣器；2—六通閥；3—反相柱；4一富集柱；5—十通閥；6—陰離子分尚柱；7—四源梯度泵；8—NaOH淋洗液；9—輸液泵；10—電導(dǎo)檢測器；11—乙腈；12—水；13—廢液瓶；圖2轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦含量測定及加標(biāo)的色譜圖；圖2中，a—實際樣品色譜圖，b—實際樣品加標(biāo)0.2mg/L草甘膦色譜圖，I—草甘膦在本方法系統(tǒng)中的色譜峰。【具體實施方式】本專利技術(shù)公開了一種離子色譜柱切換法在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦的方法，系統(tǒng)包括進(jìn)樣器1、六通閥2、反相柱3、十通閥5、富集柱4、陰離子分離柱6、四源梯度泵7、輸液泵9、電導(dǎo)檢測器10、廢液瓶13，進(jìn)樣器I和六通閥2連接，六通閥2分別與四源梯度泵7和反相柱3連接，十通閥5上連接富集柱4，十通閥5分別與輸液泵9，陰離子分離柱6連接，所述的陰離子分離柱6后依次連接抑制器、電導(dǎo)檢測器10和廢液瓶13。該離子色譜柱切換法在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦的方法，先將一定體積的待測樣品與水以一定比例混合，超聲萃取，使其中的草甘膦溶于水中，后進(jìn)樣用高效液相色譜反相柱3在線除去水溶性有機(jī)物基質(zhì)，無保留作用的離子被緊隨其后的富集柱4保留，柱切換后經(jīng)淋洗液洗脫的離子在陰離子分離柱6中得到分離，并由抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測。本專利技術(shù)將高效液相色譜反相柱3與陰離子分離柱6串聯(lián)，利用反相柱3對有機(jī)物的保留特性除去樣品中存在的水溶性有機(jī)物，后利用陰離子分離柱6對不同離子的不同的保留能力，將待測離子分離洗脫，用抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測，實現(xiàn)了對樣品中有機(jī)物的在線去除，節(jié)省了樣品前處理的時間和繁復(fù)的操作過程。將所述的方法應(yīng)用于測定復(fù)雜機(jī)制體系中的草甘膦離子，用類似方案進(jìn)行分析可提高靈敏度和改善檢測限。下面通過具體實施例，結(jié)合說明書附圖對本專利技術(shù)的技術(shù)方案作進(jìn)一步地詳細(xì)說明:本專利技術(shù)提供了一種測定轉(zhuǎn)基因大豆油中草甘膦的新分析方法，利用一臺ICS-2100離子色譜儀包含一個六通閥2、一個輸液泵9、十通閥5、電導(dǎo)檢測器10，以1nPacASll-HC為陰離子交換柱6，前處理柱3以水為流動相，流速為1.0mL/min，色譜純的乙腈11為再生液，0.5mL/min,分析柱淋洗液流動相為23mmol/LNa0H，流速為1.0mL/min,進(jìn)樣量為100 μ L，抑制器抑制電流為52mA，電導(dǎo)檢測器10進(jìn)行檢測。 本專利技術(shù)利用反相柱3在線除去樣品中本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種離子色譜在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦的方法，其特征在于先將待測樣品溶液進(jìn)樣，經(jīng)過反相柱在線除去水溶性有機(jī)物，無保留作用的離子被緊隨其后的富集柱保留，柱切換后經(jīng)淋洗液洗脫的離子在陰離子色譜柱中得到分離，并由抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種離子色譜在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦的方法，其特征在于先將待測樣品溶液進(jìn)樣，經(jīng)過反相柱在線除去水溶性有機(jī)物，無保留作用的離子被緊隨其后的富集柱保留，柱切換后經(jīng)淋洗液洗脫的離子在陰離子色譜柱中得到分離，并由抑制電導(dǎo)法進(jìn)行檢測。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的離子色譜在線前處理測定轉(zhuǎn)基因大豆油中的草甘膦的方法，其特征在于，將高效液相色譜反相柱與陰離子交換柱串聯(lián)，利用反相...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：賀婕，朱巖，
申請(專利權(quán))人：浙江大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：浙江;33
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