一種金花菜的雜交方法技術

本發明專利技術涉及一種金花菜的雜交方法。本發明專利技術技術方案涉及母本的選擇即選擇剛現蕾的花朵，花瓣還被花萼包裹，選擇盛花期時花瓣展開的花朵作為父本，用鑷子和手術刀去除母本中多余的花粉粒作母本去雄，獲取花粉即用鑷子夾取父本花朵，切離花瓣、花萼，露出雄蕊，人工授粉后包裹雜交花朵，做好信息記錄。本發明專利技術克服了現有技術存在的金花菜尚無成功雜交的先例的缺陷。本發明專利技術去雄后直接進行授粉，減少了二輪操作對柱頭造成的傷害，并確定了授粉的最佳時段，并根據金花菜的植物學、生物學特性確定了親本的選擇標準和兩種雜交技術手法，成功地實現了金花菜的雜交，并提高了雜交的成功率。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于植物育種方法的
，特別涉及。
技術介紹
金花菜(Medicago poIymorpha)為一年生或越年生苜猜,又稱南苜猜、秧草、草頭等。近年來，隨著人們對食品安全的關注，金花菜作為綠色有機食品，日益受到消費者的喜愛和政府的重視，以市場為導向的金花菜產業迎來了前所未有的發展，種植面積不斷擴大，總產不斷增加，加工產品也越來越豐富。相比快速發展的產業化進程，金花菜的遺傳育種工作明顯滯后，目前仍以地方鄉土品種為主，缺乏品質優良的高產品種。在本專利技術作出之前，金花菜尚無成功雜交的先例，這主要是因為:1.區域材料間缺少交流，沒有獲得多態性差異水平高的親本材料；2.金花菜本身的植物學、生物學特性決定的。金花菜是嚴格的自花授粉作物，花器小(成花約3mm)，結構特殊(蝶形花)，發育快(1-2天便完成自花授粉)，分布零散，受精過程對環境有較高要求，一般作物的雜交手法不適于金花菜。這些因素都給雜交工作的突破帶來了相當大的難度。隨著金花菜產業發展的要求，亟待一種適合金花菜雜交的技術方案出現。
技術實現思路
本專利技術的目的就在于克服上槨缺陷，研制。本專利技術的技術方案是:，其主要技術特征在于步驟如下:(I)親本的選擇:母本的選擇:選擇剛現蕾的花朵，花瓣還被花萼包裹，花萼緣口剛出現花瓣，花瓣的長度約為花萼的1/2，約為1mm，挑開花瓣后，雄蕊應成明顯的顆粒狀，作為母本；父本的選擇:選擇盛花期時花瓣展開的花朵作為父本；(2)母本去雄:用鑷子和手術刀去除母本中多余的花粉粒；(3)獲取花粉:用鑷子夾取父本花朵，切離花瓣、花萼，露出雄蕊；(4)人工授粉:人工授粉后包裹雜交花朵，做好信息記錄。所述對雜交種進行真偽性鑒定。所述用紙巾和膠帶仔細包裹雜交朵，并將植株移至避光處。所述用彩色細線沿莢果螺旋方向纏繞。所述步驟(1)父本的選擇中，在選擇父本前停止對金花菜的澆水。所述步驟(4)人工授粉中，對雜交花上部、下部枝葉進行修剪、摘心。本專利技術的優點和效果在于在去雄后直接進行授粉，減少了二輪操作對柱頭造成的傷害，并確定了授粉的最佳時段，并根據金花菜的植物學、生物學特性確定了親本的選擇標準和兩種雜交技術手法，成功地實現了金花菜的雜交，并提高了雜交的成功率。本專利技術在獲得不同地域多態性差異明顯的材料的基礎上，成功地進行了金花菜的雜交，并且雜交成功率達到40%左右，實現了該領域的實質性突破和創新，推進了金花菜遺傳育種的工作。本專利技術的關鍵在于親本材料的選擇和雜交的技術手法。本專利技術其他更具體的優點和效果將在下面繼續說明。【附圖說明】圖1—本專利技術流程操作示意圖。【具體實施方式】本專利技術的技術思路:采用雜交技術，選擇來源不同且多態性差異明顯的父母本，達到克服現有技術存在的缺陷的目的。下面就是本專利技術的具體說明。如圖1所示:首先是親本的選擇。 母本選擇:選擇剛現蕾的花朵，花瓣還被花萼包裹，花萼緣口剛出現花瓣。可見花瓣的長度約為花萼的1/2，約1mm，去掉其他花瓣，作為母本。父本選擇:選擇花粉成熟的植株作父本。母本去雄:用鑷子和手術刀去除母本中多余的花粉粒。獲取花粉:用鑷子夾取父本花朵，切離花瓣、花萼，露出雄蕊。人工授粉:人工授粉后包裹雜交花朵，做好信息記錄。保護處理:用紙巾和膠帶仔細包裹雜交朵。跟蹤標記:用彩色細線沿莢果螺旋方向纏繞，避免后期莢果成熟脫落丟失。雜種鑒定:對雜交種進行真偽性鑒定。具體的步驟如下:1.親本材料的選擇1.1母本的選擇選擇剛現蕾的花朵，花瓣還被花萼包裹，花萼緣口剛出現花瓣。此時可見花瓣的長度約為花萼的1/2 (約Imm);如果花瓣長度與花萼等長或超過花萼，此時雖然花瓣未打開，但是雌雄蕊已經完成了自花授粉，柱頭已經萎焉變形，花托明顯膨大，就不能作為受體了 ；另外值得注意的是，適合雜交的母本，花瓣打開后，雄蕊應明顯成顆粒狀，而某些花瓣打開后，雄蕊相連，成肉松狀，不易于下面的去雄操作。選擇合適的母本，為后面的完全去雄提供了方便，健壯的柱頭也更容易接受授粉和發育，提高了雜交的成功率。1.2父本的選擇選擇盛花期或臨近盛花期的花，花的形態成蝶形，旗瓣、翼瓣、龍骨瓣明顯。剝離花瓣后，雄蕊尚存，花藥開裂，花粉已經完全成熟，抖動時，有花粉散出，呈黃色粉末狀。如此，可以選到花粉量大，花粉高度成熟的父本花朵，方便授粉過程，提高了雜交的成功率。此外，選擇父本前，可以停止對金花菜的澆水，因為適當的干旱脅迫，可以使金花菜提前進行生殖生長，大量開花，擴大了父本的選擇范圍。2.母本去雄由于金花菜花器小，操作時要清楚、仔細、平穩。合適、健壯的母本，一定要在徹底去雄的同時，避免花粉觸碰柱頭，傷害柱頭。下面就介紹兩種易于操作的技術手法。2.1懸空操作法選擇11#手術刀和ATT-1IE型號的鑷子作為操作工具。這兩種型號的工具其尺寸、外形、做工等方面都很適用于金花菜花朵的剝離。首先對鑷子、手術刀用75%的酒精進行消毒處理。用鑷子夾斷母本花周圍大的葉片和不適宜雜交的花，用帶有乳膠手套的拇指、食指，輕捏花托部分，此時應保持手套的干燥和力度。乳膠手套可以避免手指出汗，發熱，造成花梗的軟化。用刀片從翼瓣中間將閉合的花瓣挑開，注意不要碰到雌蕊柱頭。在解剖鏡下，用刀片將花瓣、花萼在拇指、食指上切除，露出雌雄蕊，不建議用鑷子拔除，因為鑷子力度過大，會使花梗斷裂。用刀片輕輕剔除雄蕊。剔除雄蕊過程中，一定要將10個雄蕊剔除完全；剔除雄蕊時，母本雄蕊會粘到手指上，因此在去雄后，一定要用水中洗手，避免在雜交時，手指上殘留的母本花粉抖落，與母本柱頭接觸，造成自花授粉。懸空操作法的效果就是使手指可以自由拿別花，自由轉動，在解剖鏡子下，可以尋找最佳視角，立體地觀察花的構造，小心剔除雄蕊。在后期的雜交時，也可以清楚地在視線內小心操作，提高雜交的成功率，眼睛也不會覺得酸痛。2.2載玻片法對鑷子、手術刀進行消毒處理。用鑷子剔除多余的花葉，然后用透明膠帶貼住花梗，固定在載玻片上。置于解剖鏡下，用手術刀進行花瓣、花萼的去除。在去除雄蕊后，輕輕的將膠帶從載玻片上撕開。載破片法可以有效的避免手指接觸花朵造成的傷害，透明的載玻片也不影響在解剖鏡下的觀察，而且固定住的花，對于手指粗大、手抖的人，更容易操作。3.獲取花粉選取盛花期的花，花朵自然展開，可以輕松獲得成熟花粉。判別有無成熟的花粉，只要用鑷子捏取花，輕觸幾下大拇指指甲，若指甲上有黃色粉末，則說明花粉成熟。4.人工授粉用鑷子將父本花的旗瓣、翼瓣、龍骨瓣拔取，可以清晰地看見雄蕊、雌蕊。在解剖鏡下，輕輕地將父本雄蕊觸碰母本柱頭，來回反復幾次，直至看到柱頭上粘有花粉。金花菜是典型的閉花自花授粉，所以在授粉時，要避免母本本身花粉觸碰柱頭。對授粉花周圍的枝葉進行適當修剪。金花菜是莖長、分枝多、花芽易分化的牧草。對雜交花上部和下部多余的枝葉進行修剪，以及對雜交花所在的花序、側枝花芽進行摘心，可以減少養分供應的分散，對雜交花朵進行集中供養。值得注意的是，要保留雜交花著生處的葉片，這樣可以保證雜交花所需的光合作用，配合集中供養，提高雜交的成功率。5.保護處理 雜交完成后，要輕輕擺立好花盆，先用彩色細線打結套在花梗上，再在自粘性標簽上記錄此次雜交的親本單株、時間等信息，對折貼于細線上，做為標記，再用面紙、透明膠帶包裹花朵。面紙剪成三角形，便于折疊，將花梗連同枝條本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種金花菜的雜交方法，其特征在于步驟如下：(1)親本的選擇：母本的選擇：選擇剛現蕾的花朵，花瓣還被花萼包裹，花萼緣口剛出現花瓣，可見花瓣的長度約為花萼的1/2，挑開花瓣后，雄蕊應成明顯的顆粒狀，作為母本；父本的選擇：選擇盛花期時花瓣展開的花朵作為父本；(2)母本去雄：用鑷子和手術刀去除母本中多余的花粉粒；(3)獲取花粉：用鑷子夾取父本花朵，切離花瓣、花萼，露出雄蕊；(4)人工授粉：人工授粉后包裹雜交花朵，做好信息記錄。

【技術特征摘要】
1.一種金花菜的雜交方法，其特征在于步驟如下: (1)親本的選擇: 母本的選擇:選擇剛現蕾的花朵，花瓣還被花萼包裹，花萼緣口剛出現花瓣，可見花瓣的長度約為花萼的1/2，挑開花瓣后，雄蕊應成明顯的顆粒狀，作為母本； 父本的選擇:選擇盛花期時花瓣展開的花朵作為父本； (2)母本去雄:用鑷子和手術刀去除母本中多余的花粉粒； (3)獲取花粉:用鑷子夾取父本花朵，切離花瓣、花萼，露出雄蕊； (4)人工授粉:人工授粉后包裹雜交花朵，做好信息記錄。2.根據權利要求1所述的...

【專利技術屬性】
技術研發人員：魏臻武，陳祥，任海龍，王小山，劉國志，
申請(專利權)人：揚州大學，
類型：發明
國別省市：江蘇;32